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- 上海谷研
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- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
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- 细胞类型：
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- 肿瘤类型：
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- 供应商：
上海谷研
- 库存：
22
- 英文名：
Rat Intestinal PrimaCell: Normal Intestinal Macrophages
- 生长状态：
贴壁；悬浮
- 年限：
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- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 器官来源：
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- 是否是肿瘤细胞：
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- 细胞形态：
详见说明书
- 免疫类型：
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- 物种来源：
人/小鼠/大鼠/其他
- 相关疾病：
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- 组织来源：
详见说明书
- 规格：
1.2ML/1.5ML
1. 细胞纯度高：原代分离得到的目的细胞最高纯度可达到95%以上；
2. 细胞活力强：原代分离的细胞一般不能长久传代，提供P0-P3代的细胞，活力达80%以上，无污染；
3. 多种鉴定方式：可根据需求提供流式细胞检测、免疫细胞化学、Realtime PCR及蛋白印迹等多种检测方法。
大鼠肠巨噬细胞培养试剂盒品牌【Rat Intestinal PrimaCell: Normal Intestinal Macrophages】
肠指的是从胃幽门至肛门的消化管。肠是消化管中最长的一段，也是功能最重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。其中，肠巨噬细胞及肠上皮细胞是肠道屏障的重要组成部分，它们功能的稳定对维持肠道屏障功能具有重要作用。肠道屏障受损时，各自的生理功能也会出现相应的改变。大鼠肠巨噬细胞可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 利用本公司试剂盒中提供的肠组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的肠组织能使得肠组织中巨噬细胞的一些功能特性发生改变，从而将肠巨噬细胞分离开来。
本试剂盒适用于分离培养大鼠肠巨噬细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以最大程度地降低所培养的巨噬原代细胞中成纤维细胞的含量。 大鼠肠巨噬细胞培养试剂盒适合于培养大鼠的肠巨噬细胞。本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM大鼠肠巨噬细胞组织解离液（3×1ml） （2）大鼠肠巨噬细胞组织处理缓冲液（100ml） （3）FibrOutTM大鼠肠巨噬细胞成纤维抑制剂（1ml（500Xᰀ
实验试剂：
1、大鼠肠巨噬细胞培养试剂盒品牌培养基： PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement
2、冻存液： PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO
3、洗涤液： 1 × PBS （pH 7.4 ）+ 1% P/S
4、染色液： 0.4% Trypan Blue
5、消化液： PriCells Isolation of Primary Cell Kit
6、检测试剂：鼠抗人及大鼠desmin一抗，肌球蛋白（myosin）单克隆抗体
实验操作：
1、 大鼠肠巨噬细胞培养试剂盒品牌新生小鼠拉颈椎处死，乙醇消毒腿部，在超净工作台内，取肌肉于平皿，Hank’s洗3次，剔除脂肪、结缔组织，将肌肉标本剪约0.1cm3小块；
2、 将剪碎的肌肉移至离心管，Hank’s洗3次，静置1min，弃去上层液及漂浮组织
3、 向上述离心管中加入0.25%胰酶，37度水浴消化20min，每5min摇动或吹打1次离心管，然后加入生长培养基终止消化；
4、 反复吹打后，依次100，200，400目过筛，滤液收集后，1000r/min离心10min；
5、 弃去清夜，用生长培养基重悬细胞，悬液加入未经PPL包被的培养瓶中，差速贴壁去除成纤维细胞，37度培养1h后，转移包被瓶中，生长培养基培养，4d换液，以后每天换液1次。
硫酸妥布霉素Tobramycin79645-27-5
硫酸西梭米星(标准品)Sisomicin53179-09-2
硫酸西梭米星/硫酸西索霉素Sisomicin53179-09-2
硫酸腺嘌呤(标准品)Adenine321-30-2
硫酸腺嘌呤Adenine321-30-2
硫酸腺嘌呤二水化合物AdenineDihydrate
硫酸小檗碱（标准品）Berberinesulphate
硫酸小诺霉素/硫酸小诺米星/硫酸沙加霉素Micronomicin66803-19-8
硫酸锌七水(AR)Zincheptahydrate
硫酸新霉素(标准品)Neomycin1405-10-3
硫酸新霉素Neomycin1405-10-3
硫酸亚钛(>98%,BR)Titaniumsulfate
硫酸亚铁铵六水Ammoniumsulfate,
硫酸亚铁七水(AR)Iron(II)heptahydrate
硫酸异帕米星Isepamicine67814-76-0
大鼠肠巨噬细胞培养试剂盒品牌核糖核酸酶L抑制蛋白抗体 订购|咨询
Rho GTP酶激活蛋白24抗体 订购|咨询
GTP酶激活蛋白ASAP3抗体 订购|咨询
激活素受体1C抗体 订购|咨询
整合素样金属蛋白酶与凝血酶13型抗体 订购|咨询
去整合素样金属蛋白酶11抗体 订购|咨询
去整合素样金属蛋白酶12抗体 订购|咨询
去整合素样金属蛋白酶15抗体 订购|咨询
去整合素样金属蛋白酶2抗体 订购|咨询
腺苷脱氨酶抗体 订购|咨询
原代细胞分离：
一、大鼠肠巨噬细胞培养试剂盒品牌细胞培养
1取材 在无菌环境下从机体取出某种组织细胞（视实验目的而定），经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器血中，这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。2培养 将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。3冻存及复苏（可参阅后面有关章节）为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度－196℃，将细胞收集至冻存管中加入含保护剂（一般为二甲亚砜或甘油）的培养基，以一定的冷却速度冻存，最终保存于液氮中。在极低的温度下，细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法，即从液氮中取出冻存管后，立即放入37℃水中，使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。
二、原代细胞分离
凡是来源于胚胎、组织器官及外周血，经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。1悬浮细胞的分离方法组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，最简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。2实体组织材料的分离方法对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。
三、细胞增殖检测技术
目前主要有两种用于检测细胞增殖能力的方法。一种是直接的方法，通过直接测定进行分裂
的细胞数来评价细胞的增殖能力。另一种是间接的方法，即细胞活力（cell viability）检测方法，通过检测样品中健康细胞的数目来评价细胞的增殖能力。显然，细胞活力检测法并不能最终证明检测样品中的细胞是否在增殖。如细胞在某一培养条件下会自发启动凋亡程序，但药物的干扰可抑制凋亡的发生；这时若采用细胞活力检测法，显然可以区分两种条件下的细胞数量，但我们并不能从药物干扰组细胞数大于对照组的事实说明药物可促进细胞增殖的结论。所以最直接的证据应该采用方法一。
其中常见检测：CCK8检测法 ，MTT检测法，Brdu检测法，Edu检测法，平板克隆形成。
四、细胞周期检测技术
细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程，所需的时间叫细胞周期时间。
常用的方法：流式检测细胞周期，标记有丝分裂百分率法。
五、细胞凋亡检测
常见检测方法：流式检测细胞凋亡，线粒体膜电位，活性氧检测，Hoechst染色，电镜，TUNEL。
六、细胞转移能力检测
常见检测方法：细胞划痕实验，Transwell实验，Invasion实验
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文献和实验D 型氨基酸氧化酶（DAAO）与过氧化氢检测试剂盒联用，对产物中的 D 型氨基酸的总量进行评价。结果显示只有芽孢杆菌属和类芽孢杆菌属的肠道菌能够产生 D 型氨基酸，且在芽孢杆菌属内，菌株在种和菌株的水平上产 D 型氨基酸的能力也有差异，并与 16S rRNA 相似度没有明显的相关性（图 2），暗示单纯依靠 16S rRNA 测序获得微生物组菌种组成信息，无法准确预测菌群合成 D 型氨基酸的水平。 图 2：DAAO 法评估大鼠肠道菌生产 D 型氨基酸的能力与 16S rRNA 的关系 最后
细胞来说要少很多。 最后，针对细胞上清液的外泌体的提取。这个是老生常谈的问题，这里就不再多讲了。如果实验室有超速离心机的话，那就使用超速离心的方法，按照前文建议的预处理操作后，超离后的沉淀也会增加的，同时外泌体的质量也会提升。如果实验室没有超离的情况下，也可以通过试剂盒的方法来提取，除了进口品牌外，也可以使用一些国产试剂盒，质量也不亚于进口品牌的。 总结一下，为了获得高质量的外泌体：需要在细胞培养时减少正常血清的使用，推荐去外泌体血清或者外泌体专用无血清培养基；收获
脾脏（spleen）位于上腹部左后侧，体积较大，长条形，是体内最大的淋巴器官，也是血流通路中的过滤器官。脾脏内定居着大量的淋巴细胞和其它免疫细胞，是机体发生特异性免疫应答的场所。 1 原理 单个核细胞的体积、形态和比重与其它细胞不同，在沉降过程中不同比重的细胞会处于不同的分布位置。因此，可利用各种血细胞和单个核细胞比重之间的差异将各种血细胞与单个核细胞分离开来。 2 方法 1）无菌条件下取出脾脏，在培养皿中加入适量的分离液，将脾脏放入细胞筛中，置于分离液中进行研磨（具体
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