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详见说明书
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- 供应商:
上海博湖
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24
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- 生长状态:
贴壁/悬浮
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详见说明书
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
详见说明书
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
- 免疫类型:
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- 物种来源:
人/小鼠/大鼠/其他
- 相关疾病:
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细胞描述
大鼠肠巨噬细胞培养试剂盒肠指的是从胃幽门至肛门的消化管。肠是消化管中最长的一段,也是功能最重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。其中,肠巨噬细胞及肠上皮细胞是肠道屏障的重要组成部分,它们功能的稳定对维持肠道屏障功能具有重要作用。肠道屏障受损时,各自的生理功能也会出现相应的改变。大鼠肠巨噬细胞可以保持原代细胞的分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 利用本公司试剂盒中提供的肠组织分离体系来分离,EDTA/EGTA处理过的肠组织能使得肠组织中巨噬细胞的一些功能特性发生改变,从而将肠巨噬细胞分离开来。本试剂盒适用于分离培养大鼠肠巨噬细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件,分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外,本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系,可以最大程度地降低所培养的巨噬原代细胞中成纤维细胞的含量。 大鼠肠巨噬细胞培养试剂盒适合于培养大鼠的肠巨噬细胞。本试剂盒包含: (1)OptiTDSTM大鼠肠巨噬细胞组织解离液(3×1ml) (2)大鼠肠巨噬细胞组织处理缓冲液(100ml) (3)FibrOutTM大鼠肠巨噬细胞成纤维抑制剂(1ml(500X)) (4)大鼠肠巨噬组织洗液(5 x 100 ml) (5)大鼠肠巨噬细胞生长因子(1ml500X)及血清(5x10ml) (6)大鼠肠巨噬细胞基础培养基(5 x 100ml) (7)大鼠肠巨噬组织预备液(1 x 100 ml) (8)大鼠肠巨噬细胞培养试剂盒使用说明书
细胞传代:
大鼠肠巨噬细胞培养试剂盒1. 显微镜下观察细胞,神经干细胞悬浮成“神经球”生长,通常情况下,每两天换液一次,每四天传代一次。
2. 在生物安全柜或者超净台中,将培养瓶中的含有神经球的培养基转移到15ml离心管中。
3. 500rpm离心5分钟,收集神经干细胞。
4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶,在超净工作台中轻轻吹打10次,注意不要消化太久,消化的目的是缩小神经球的体积,不要消化能单个神经干细胞,那样会影响其生长速度。
5. 然后加入5ml培养基,吹打均匀后1000rpm 离心5分钟。
6. 离心后,去掉上清,用新鲜培养基重悬细胞,按照1:2-1:3的比例进行细胞传代培养。
细胞复苏:
1. 大鼠肠巨噬细胞培养试剂盒 取出冻存管后,投入37℃水浴中,震荡解冻2 min。
2. 酒精消毒管壁外侧后,将其转入超净台中,将管内细胞转移至离心管中,加入5 ml 37℃预热的DMEM/F12+10%FBS培养基。
3. 将离心管离心(1000rpm,5 min)。
4. 弃去上清,再加入2ml DMEM/F12+1%N2+2%B27完全培养基,转入培养瓶中培养。
细胞冻存:液氮冻存(冻存液:DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO)。
细胞运输:干冰运输(冻存管)/ 常温运输(T-25培养瓶)
细胞鉴定:神经干细胞采用nestin免疫荧光染色鉴定。左图是白光视野中的“神经球”形态,放大倍数为200x,右图为nestin染色后的荧光图片(绿色),放大倍数为200x。
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大鼠肠巨噬细胞培养试剂盒悬浮细胞的传代
悬浮细胞传代比贴壁细胞传代稍微简单一些。由于细胞已经在生长培养基中悬浮,因此无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离,整个过程较为迅速,对细胞的损伤也较小。悬浮培养时不进行生长培养基的更换;而是每 2 到 3 天加料一次,直到细胞汇合。可以直接在培养瓶中稀释细胞,然后继续培养扩增,或者也可以从培养瓶中取出一部分细胞,将余下的细胞稀释到该细胞系适宜的接种密度。悬浮细胞传代后的延滞期一般比贴壁细胞短
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