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- 康朗生物
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- 上海
- 2025年07月14日
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- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
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大量
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干冰
- 器官来源：
淋巴、脾及血液
- 组织来源：
淋巴、脾及血液
小鼠脾巨噬细胞提取物
脾脏是机体最大的免疫器官，占全身淋巴组织总量的25%，含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞，是机体细胞免疫和体液免疫的中心。脾脏中大量的巨噬细胞具有强大的吞噬抗原颗粒的作用，还可作为抗原提呈细胞(APC)，调节和增强免疫应答.除自身能释放肿瘤坏死因子(TNF)、 IFN、IL-1等活性物质直接参于抗肿瘤作用外，还能调节细胞毒素T淋巴细胞(CTL)、淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)细胞的抗肿瘤作用，具有广泛的免疫感应及效应功能。
基因组DNA制备：采用酶解法裂解细胞，利用硅胶膜离心柱特异地吸附DNA，去除蛋白质、盐类、脂类等杂质，有效地保持基因组DNA的完整性。提取的DNA适用于酶切、PCR、Southern Blot等实验。
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。康朗生物提供的总RNA样品附有RNA样品OD值、浓度、总含量等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及2μg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的质控分析，保证了产品的质量。
microRNA制备:采用具有超强的裂解能力和抽提灵敏度microRNA试剂盒制备，结合试剂盒采用的特殊吸附膜，大大增加了小分子RNA的吸附力，获得的microRNA纯度好，得率高，可以直接用于各种下游实验，如Northern Blot分析，Real-Time PCR，Microarray Analysis等。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl,1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备细胞蛋白裂解液，离心去除细胞碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。
细胞沉淀制备：首先分离培养出高质量的原代细胞，然后经平衡盐溶液清洗去除细胞表面杂质，最后用合适的裂解液裂解细胞并离心获得细胞沉淀。
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文献和实验。也可以不用低渗处理，直接在淋巴细胞分离液上分离巨噬细胞。 5．离心200×g 10分钟，去上清液。用RPMI-1640培养液洗涤细胞一次。将细胞悬液加在淋巴细胞分离液（比重1.077）上，离心400×g 20分钟，收集交界面的巨噬细胞。弃去沉淀的死细胞和红细胞。 6．用RPMI-1640培养液洗涤巨噬细胞2次。台盼蓝染色检测细胞活力和细胞数，将细胞配成所需浓度。此时巨噬细胞活力可达90％以上，巨噬细胞占全部细胞的90％以上。三、从小鼠脾脏、胸腺和骨髓中分离巨噬细胞 1．用外科方法无菌摘取
实验简介脾脏是机体最大的免疫器官，含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞，是机体细胞免疫和体液免疫的中心，ft 机体免疫失衡时，免疫细胞的数量和比例都会发生变化，流式细胞仪能够直接检测出该变化的发生。该实验通过一个优化设计的 8 色方案，检测出了小鼠脾脏中 T、B 细胞亚群以及 FOXp3 的表达，从图中可以看出细胞分群好， 结果的判读准确，操作简便，证明 CytoFLEX 卓越的性能和便捷的操作性。材料与方法▶ 试剂▶ 样品制备Sample Typec57bl/6 小鼠脾脏细胞Species小鼠Age
以上。 三、从小鼠脾脏、胸腺和骨髓中分离巨噬细胞 1．用外科方法无菌摘取小鼠脾脏和胸腺，置于盛有预冷RPMI-1640培养液（含1％小牛血清）的平皿中，剪去结缔组织和脂肪。用无菌注射器芯将脾脏或胸腺挤压通过200目的钢丝网，获得单个细胞。 2．离心200×g 10分钟，去上清液。用含1％小牛血清的RPMI-1640培养液将细胞配成约1×108～5×108/ml。
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