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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 库存:
5次/盒
- 运输方式:
冰袋
- 器官来源:
骨骼
- 物种来源:
骨骼
- 组织来源:
骨骼
- 规格:
5次/盒
小鼠成骨细胞分离培养试剂盒
成骨细胞(Osteoblast,OB)主要由内外骨膜和骨髓中基质内的间充质始祖细胞分化而来,能特异性分泌多种生物活性物质,调节并影响骨的形成和重建过程。成骨细胞培养不仅有助于了解骨形成机制、骨骼系统疾病的分子和细胞学基础,也是药物筛选、生物材料开发和生物工程研究的重要手段。
小鼠成骨细胞分离培养试剂盒包含:
(1)小鼠成骨细胞分离培养组织处理缓冲液(500ml)
(2)小鼠成骨细胞分离培养组织解离缓冲液(100ml)
(3)小鼠成骨细胞分离培养组织解离液(5×1ml)
(4)小鼠成骨细胞培养添加剂(5×200μl)
(5)小鼠成骨细胞专用完全培养液(500ml)
(6)小鼠成骨细胞分离培养试剂盒说明书(1份)
小鼠成骨细胞鉴定试剂盒
小鼠成骨细胞鉴定试剂盒包含基于小鼠成骨细胞特定标签研发的免疫荧光染色鉴定法所需的全部试剂。该种以荧光为基础的鉴定体系包括标签特异的一抗、荧光标记的二抗和各种特异的原代细胞鉴定所必要的缓冲液和试剂。
(1)清洗液(100ml) 4℃ 保存
(2)固定液(10ml) 4℃ 保存
(3)透膜液(10ml) 4℃ 保存
(4)封闭液(10ml) 4℃ 保存
(5)一抗(20μl) -20℃保存
(6)荧光二抗(20μl) -20℃,避光保存
(7)染核液(10μl) -20℃,避光保存
(8)说明书(1份)
规格与质量控制: 本试剂盒规格为5次,所含试剂量足够鉴定12孔板的6个孔面积细胞。每批次试剂盒都做了来自相应物种的细胞鉴定测试并且提供新鲜配制的缓冲液。
稳定性/储存: 根据试剂盒相应标签提示,4℃ 保存或-20℃,避光保存。
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文献和实验细胞,吸管轻轻吹打细胞,使之形成单细胞悬液,计数后以104个/ mL接种75mL培养瓶中,于5℅CO2 培养箱, 37℃培养,完成一次传代。此后每隔两天半量换液,5-7天机械分离细胞传代1次。期间倒置显微镜下观察细胞的生长状况。胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定。
原代培养1.取新生3d以内BALB/c小鼠,断颈处死后立即投入75%酒精中消毒5min(虽有头部皮肤保护,但时间不要过长,所以事先要把准备工作做好之后再去杀老鼠)。2.D-Hank’s液漂洗后分离颅盖骨,刮除骨膜和结缔组织,DMEM清洗颅骨骨片并剪碎。(自我感觉碎一点好一些)3.加入0.25%胰蛋白酶(含0.02EDTA),37°恒温消化20min,吸出消化液,之后1mg/1mlI型胶原酶37°恒温消化20min后离心(1000r/min,5min),弃上清液。(消化时间自己摸索,之前我消化
无菌条件下取出小鼠移植瘤组织,剪成 1mm3 小块,用 0.5% 胶原酶室温消化 30 分钟到 1 小时,再加等体积 0.2% 胰酶消化 5 ~ 8 分钟,在消化过程中用吸管吹打组织块或用自制装置(分别作为加样和收集器的两个注射器中间加一小滤器连接而成,滤器中间垫两层丝质材料以隔断组织块与单细胞)来回推动注射器吹打组织以分离单细胞,终止酶消化方法同上。常规方法接种培养收获细胞。
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