TRIzol试剂伴侣

特别提示：包括TRIzol试剂伴侣在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：TRIzol试剂伴侣
英文名称：TRIzol-Mate
产品货号：BTN81027
产品规格：50次

TRIzol是用于总RNA提取(主要是动物总RNA提取)的著名产品，具有广大的客户群。但其缺点之一是一直没有柱式升级产品，客户仍然要使用既繁琐又费事的非柱式操作(另一缺点是不能用于富含多糖和多酚的材料)为解决此问题，我们特推出本产品，其操作流程如下：


产品特点：
1. RNA 质量更好，因为操作简短减少了RNA在提取过程中的降解。
2. RNA 纯度更高，OD260/OD280一般在 1.9以上，比经典 TRIzol法得到的更纯。
3. 专门的洗涤条件能有效去除基因组 DNA，进一步减少其对 RNA的污染。
4.适用于其他基于酸酚/ 异硫*酸胍提取原理的RNA提取产品，包括TRIzol、TRIzol LS、TRI Reagent等。
5.可以省略*仿处理步骤，避免接触有毒试剂(但效果稍差)。
6.跟TRIzol 结合使用，把经典操作变成了柱式操作，简化了实验流程，用户可以节约30分钟的时间。

产品组成：

成分	规格
溶液A	50ml
硅胶膜离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
RNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用及效果：


使用方法：
1. 按 TRIzol的使用说明书进行总 RNA提取到加*仿之前一步。
2. 如果需要加*仿，则继续按TRIzol的使用说明书操作，用*仿处理裂解液离心后得到上清液。如果省略*仿处理步骤，则需要将裂解物直接离心。
3. 将经过*仿处理得到的上清液或没有经过*仿处理直接离心得到的裂解液转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中。注意：如果是经过*仿处理，则离心后，下层有机相和中间层将含有DNA和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见，可以留下100μl上清液不取。同时吸取上清时zuì好缓慢进行，否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。
4. 加入等体积的溶液A，颠倒混匀 30秒。
5. 根据混合物的多少，一次或分两次转移到离心吸附柱中。
6. 每次转移后，需要13000-15000g室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
7. 加0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。但如果样品OD260/280 比值不高，可以再用0.3mL 通用洗柱液重复此步一次。
8.室温离心半分钟。此步对去除残留通用洗柱液十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响RNA的质量和使用。
9. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中，加入50-100μl RNA 洗脱液。
10.室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
11. RNA 完整性的电泳检测：如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
12. RNA产量产率测定：将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
13. RNA 纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。

疑难解答：
Q：上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗？
A：不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象，百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物，加RNase处理后，这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象，建议zuì好使用甲醛变性胶电泳和RNA 专用上样液(如我公司的RNAload)。
Q：如何确认和去处除污染的基因组DNA？
A：如果怀疑有DNA污染，可以用RNase处理RNA样品，然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失，则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用百奥莱博的非酶的DNA 去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase，由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染，所以必须严格按照厂家提供的说明书进行操作。

除了TRIzol试剂伴侣,，我公司还供应以下相关产品：


BTN3070 动物RNA提取试剂(TRIzol) 100mL
BTN101113 软体动物RNA柱式提取试剂盒 50次
BTN130845 柱式分枝杆菌RNA提取试剂盒 50次
BTN130971 柱式病毒RNA-DNA共提试剂盒 50次
BTN100805B Tris饱和酚-*仿-异*醇混合液(DNA提取用) 250mL
BTN100805C 酸酚-*仿-异*醇混合液(RNA提取用) 250mL
WE0194 病毒RNA提取试剂盒 50次
WE0404 RNA样本保存液 100ml|500ml
ALH067 血浆miRNA提取试剂盒 50次
ALH029 细菌RNA提取试剂盒(柱式吸附去除DNA) 20次|50次
ALH042 骨RNA提取试剂盒 50次
ALH036 植物RNA提取试剂盒(含DNA清除柱) 20次|50次
SY0270 脱氧核糖核酸酶I，来源于牛胰腺 15KU
SY0273 水饱和酚 250ml
QN0909 RNA抽提试剂(25:24:1) 100mL|500mL
QN0910 RNA抽提试剂(25:24) 100mL|500mL
GL1250 革兰阳性菌裂解缓冲液 100ml
GL2820 组织细胞RNA提取试剂盒(Trizol提取法) 50T