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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
204
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
10×1ml
特别提示:包括5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(还原)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(还原)
产品货号:RFT071
产品规格:10×1ml
本品是以溴酚蓝为染料,5倍浓缩的SDS-PAGE凝胶电泳上样缓冲液,应用于还原型SDS-PAGE的蛋白样品制备和上样。该缓冲液中含有DTT,可使蛋白质分子的链内二硫键和链间二硫键断裂,通过二硫键连接的各蛋白亚单位彼此分离,经考马斯亮蓝染色以后在电泳凝胶上显现清晰蛋白条带。
产品特点:
1、加样前在室温或37-40℃数分钟解冻后轻轻摇匀,以确保溶液混合均匀。
2、本试剂含有DTT,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
3、本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤:
1、将5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 (还原)与蛋白样品按照1:4的比例混匀。
2、将蛋白样品置于95℃中加热3-5分钟。
3、待蛋白样品充分变性后冷却至室温,以小于3000 rpm的条件离心30秒。
4、离心后,以微量进样器取适量上清,直接加入SDS-PAGE凝胶加样孔内。
5、进行常规电泳,通常染料到达距离凝胶底端0.5-1 cm处即可停止电泳。
储存条件:-20℃。
除了5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(还原),,我公司还供应以下相关产品:
名称:L-谷胱甘肽(还原型)
货号:BTN120705
规格:5g
还原型谷胱甘肽是人类细胞质中自然合成的一种肽,由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成,含有巯基(-SH),广泛分布于机体各器官内,作为一种抗氧化剂,可以保护肝脏细胞膜,增强肝脏的解毒能力,为维持细胞生物功能呈有重要作用。本产品可用于配制纯化GST标签蛋白的洗脱液。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期两年。
名称:彩色预染蛋白分子量标准(10-170kD)
货号:YT621
规格:200μl|600μl|3ml
本品包含了从10kD到170kD共10种纯化的预染蛋白质,其中15kD和70kD条带为红色,其余条带为蓝色(参见下图),适合作为SDS-PAGE或Western的蛋白质分子量标准。特别适合在Western时使用,这样在转膜后可以直接并清楚地观察到转膜效果。须注意右图所示分子量仅适用于常规的Tris-Glycine凝胶。根据上样孔的大小,本彩色预染蛋白质分子量标准通常每次上样3-5微升,即可在电泳时、电泳后或转膜后观察到非常清楚的蛋白条带,一个包装的本产品大约可以使用约40-65次。
产品特点:
1. 提供了两条鲜艳的红色条带(15kD和70kD),有利于快速准确辨认蛋白质分子量标准的条带。同时本产品中含有类似于溴酚蓝的指示性红色染料,电泳时会呈现红色条带并处于zuì前沿。
2. 提供了从10kD到170kD共10条条带,条带清晰,分子量范围比较宽,蛋白分子量比对比较方便。
3. 本彩色预染蛋白质分子量标准已经配制在1×SDS-PAGE上样缓冲液中,可以直接使用,无需煮沸。
蛋白条带包括:10kD,15kD,25kD,35kD,45kD,55kD,70kD,100kD,130kD,170kD
注意事项:
1. 本彩色预染蛋白质分子量标准不可在100℃加热或煮沸,并不得加热至40℃以上,室温融化后混匀即可直接使用。
2. 本彩色预染蛋白质分子量标准用1X SDS-PAGE上样缓冲液配制,不适用于非变性PAGE胶。
3. 预染蛋白质分子量标准每一批次的分子量大小可能有所不同,属正常现象。请参考随产品所附的说明书确定精确的分子量。
储存条件:-20℃,有效期一年。
名称:DyLight405标记抗小鼠免疫荧光染色试剂盒
货号:KFS055
规格:300T
适用于细胞或组织切片的免疫荧光染色。在有适当的一抗检测特定的目标蛋白时,就可以使用免疫荧光染色试剂盒检测到红色、绿色或蓝色等荧光。免疫荧光染色试剂盒-抗小鼠DyLight405,含有DyLight405标记的山羊抗小鼠IgG(H+L)抗体,可以用于检测小鼠来源的相应一抗,观察到的颜色为非常鲜艳的蓝色。
DyLight405(Ex/Em:400nm/421nm)是一种常用的非常明亮的蓝色荧光探针。它比绝大部分常用的蓝色荧光探针更加明亮,更加不容易淬灭,而且背景更低。由于很多荧光检测仪器缺少400nm左右的激发波长,DyLight405常局限于激光共聚焦显微镜下观察。
本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液,可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月,并且在6个月内至少可以重复使用10次。本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液,可以使荧光更加持久。
本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片,至少可以检测300个样品。
注意事项:
需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭,但仍宜尽量避光,特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
荧光物质均易发生淬灭,染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存,但存放时间通常不宜超过一周,随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。
建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
如果观察时发现荧光过弱,可以适当提高一抗的浓度;如果荧光还是比较弱,可以适当提高荧光标记抗体的浓度。
需自行配制用于免疫荧光染色的相关试剂,需自备盖玻片和载玻片。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
名称:多聚-L-赖氨酸(15-30万)
货号:QN1264
规格:25mg
本品可用于促进细胞粘附到固体基质。
CAS号:25988-63-0
分子量:150,000~300,000
储存条件:2~8℃,有效期24个月。
聚赖氨酸溶液是广泛应用的组织切片与玻片黏合剂,该多聚阳离子分子与组织切片上的阴离子相互作用会产生较强的黏合力。培养瓶表面的性质对于细胞培养至关重要,细胞表面的糖蛋白(阴性)易于吸附在亲水性的表面上,因而细胞培养表面如果有相当含量的阳性电荷更能促进细胞吸附,这正是运用多聚赖氨酸优化细胞培养表面的重要所在。
应用:
适用组织学,免疫组织化学,冰冻切片,细胞涂片,原位杂交等使用的玻片的防脱片处理,以防实验操作过程中组织掉片。也可用于细胞培养,增加细胞贴壁能力。
溶液配制:用去离子水溶解,配制成母液备用。保存于-20℃。
玻片处理:
1. 灭菌水稀释聚赖氨酸溶液,一般的使用浓度为0.01%。
2. 将玻片浸在稀释的多聚赖氨酸溶液5分钟。注意增加时间不会提高包被效果。
3. 在60℃烘箱1小时干燥,或室温18-26℃过夜干燥待用。
注意:
1. 每100mL已稀释的多聚赖氨酸溶液要包被的玻片40-90张, 超过90张片子将影响其黏合力。
2. 用之前的玻片必须保持清洁。必要时用含1% HCl的70%乙醇溶液来清洗。
3. 释过的多聚赖氨酸溶液要放在2~8℃,至少在3个月内是稳定的。
4. 用过的稀释液要过滤,若出现浑浊或长菌要丢弃
5. 多聚赖氨酸浓度可以高一些,吸出来的可以重复利用至少20次。
培养瓶处理:
1. 包被培养板或者是培养瓶,一般多聚赖氨酸浓度为0.01%,
2. 准备100ml三蒸水,经高压灭菌处理。
3. 0.01%的多聚赖氨酸以50微升每平方厘米的量均匀涂于培养底物的表面,室温下静置5min,吸除多余液体。
4. 加入灭菌水,反复冲洗三次,无菌操作。
5. 处理后无菌晾干备用。
6. 回收后保持无菌的多聚赖氨酸可反复利用。
名称:全能核酸酶
货号:HQF31
规格:25KU/100KU/500KU
全能核酸酶Benzonase Nuclease是来源于Serratia Marcescens 经过基因工程改造的核酸酶。它能够在非常广泛的条件下(6M urea, 0.1 M Guanidine HCl, 0.4% Triton X100, 0.1% SDS, 1 mM EDTA, 1 mM PMSF), 降解所有形式的(双链,单链,线状,环状)DNA和RNA。它将核酸完全消化成3-8个碱基长度的5"-单磷酸寡核苷酸。全能核酸酶适用于去除蛋白质产品 中的污染,符合FDA关于核酸污染去除的规程。本产品可以与多种细胞细菌裂解液配合使用,去除粗提物中的核酸,降低溶液粘性,提高蛋白质产量。本公司全能 核酸酶经特殊工艺表达纯化,无蛋白酶、内毒素污染,没有标签,方便下游实验操作。尤其在IP实验中,在使用Protein A+G Sepharose Beads的同时,加入benzonase对去除核酸污染效果更佳。
单位定量:
在30分钟内使△A260降低1.0(相当于完全消化37μg DNA)定义为一个活性单位。
储存条件
-20 ℃ 保存。
名称:Western及IP细胞裂解液
货号:GL1467
规格:100ml
用途:
温和裂解细胞提取总蛋白质,主要用于Western,免疫沉淀,免疫共沉淀等。对于普通的Western、IP或co-IP,我们推荐使用本裂解液,
注意事项:
主要由Tris 、NaCl、Triton X-100组成。含有一支1.5ml PMSF。用本裂解液得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
储存条件:-20℃,12个月
名称:蛋白Marker(43~200kDa)
货号:QN2663
规格:10T
本产品包含5种蛋白质混合物,分子量范围为43kD-200kD,条带分别为:43kD,66.2kD,97.4kD,130kD,220kD。经过SDS-PAGE电泳,用考马斯亮蓝染色后可以得到分布均匀密度相近的5条带。可以用来判断SDS-PAGE电泳后蛋白质的分子量。
使用说明:
1.开封后,可根据需要分装成小管,建议每管分装10μl,-20℃贮存,每次取一管使用。
2.本产品已经含有了上样缓冲液,使用前取分装后的小管65℃预热5分钟即可上样进行电泳,上样量5-10μl。
3.建议分离胶浓度为8%。
注意:上样前,蛋白样品65℃预热是必需的,否则电泳后一些蛋白会沉积在分离胶的上沿,出现一条蛋白杂带。
储存条件:-20℃可保存至少六个月.
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文献和实验一般先配制50倍的TAE缓冲液,用时再稀释成1倍的。 50倍TAE缓冲液的配制方法为 1. 称取下列试剂于1L烧杯中: Tris 242g Na2 EDTA.2H2 O 37.2g 2.向烧杯中加入约600mL的去离子水,充分搅拌溶解
泵(或20ml注射器筒);天平;单面刀片;保温箱(或恒温水浴);刻度试管(15ml);移液管(5ml×2,2ml×8,1ml×2)。【试剂】亚硝酸钠标准液 称取分析纯NaNO2 0.1000g水溶后定容至100ml,吸取5ml用水稀释定容至1000ml,即为每ml含NaNO2 5μg(亚硝态氮近似1μg/ml)的标准液。0.1mol/L pH7.5的磷酸缓冲液:K2HPO4 19.24g,KH2PO4 2.2g,加水溶解后定容至1000ml。1%(W/V)对-氨基苯磺酸溶液:称取1.0g加入25ml浓
在氧化还原反应中失去电子的反应物叫做还原剂。还原剂能还原其他物质而自身被氧化。它失去电子后,自身的化合价(或氧化数)升高。还原剂通常是那些容易失去电子的物质。它通常是活泼金属(如Na、K、Mg、Zn、Fe)、处于低价态的(或低氧化数)的金属离子(如Fe 2 、Sn 2 )、非金属及其离子(如C、P、S、S 2- 、I - )和低价元素的含氧化物(如CO、NaNO 2 、SO 2 、Na 2 SO 3 、Na 2 S 2 O 3 )。还原
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