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- 康朗生物
- KLM3080
- 上海
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
原代细胞
- 细胞类型：
见说明书
- 肿瘤类型：
见文献
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 库存：
5×105
- 生长状态：
良好
- 年限：
永久
- 运输方式：
新鲜/干冰
- 器官来源：
骨骼
- 是否是肿瘤细胞：
见文献
- 细胞形态：
正常
- 免疫类型：
见文献
- 物种来源：
大鼠
- 相关疾病：
见文献
- 组织来源：
骨骼
- 规格：
5×105
细胞简介：
软骨细胞（Chondrocyte），幼稚的软骨细胞位于软骨组织的表层，单个分布，体积较小，呈椭圆形，长轴与软骨表面平行，越向深层的软骨细胞体积之间增大呈圆形，细胞核圆形或卵圆形，染色浅，细胞质弱嗜碱性，常见数量不一的脂滴。软骨细胞具有合成和分泌基质与纤维的功能。
本公司生产的小鼠关节软骨细胞采用酶解法制备而来，细胞总量约为5×105/T25方瓶，细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基信息：
我们推荐使用康朗生物研制的小鼠关节软骨细胞专用完全培养液（产品编号：KLM6080-5）作为体外培养小鼠关节软骨细胞的培养基。
细胞培养过程中，传代是非常重要的环节，若操作不当会给细胞带来不可逆转的伤害，原代细胞因其培养难度高且传代次数有限，细胞消化的步骤需要格外细心与谨慎。康朗生物根据其丰富的原代细胞培养经验，总结出一套细胞消化的方法，有效降低了消化步骤对细胞的操作。现分享给大家：1. 当细胞达到80-90%融合时需要传代培养。
2. 提前准备好多聚赖氨酸（PLL，货号KL0403）或纤维粘连蛋白（BPF，货号KL8248）包被好的培养瓶。
3. 将完全培养基，胰酶/EDTA消化液（T/E，货号KL0103），胰胰中和液（TNS，货号KL0113）和不含钙镁离子的DPBS（货号KL0303）加热至室温。我们不推荐用37度水浴加热试剂和培养基。
4. 用DPBS冲洗细胞。
5. 以T-75培养瓶为例，向培养瓶中加入8mlDPBS，然后加入2ml胰酶/EDTA消化液。轻轻摇动培养瓶保证细胞被胰酶/EDTA消化液完全覆盖。将培养瓶置于37度培养箱1-2分钟直到细胞变圆。在显微镜下观察细胞形态变化。
6. 在消化期间，准备一支50ml离心管加入5ml胎牛血清（FBS，货号KL0500）。
7. 将胰酶/EDTA消化液从培养瓶中吸出至50ml离心管中（一小部分细胞已消化下来），将培养瓶继续置于37度培养箱中1-2分钟（此时培养瓶中没有液体）。
8. 在孵化结束时，轻轻拍打培养瓶侧面使细胞脱离表面。在显微镜下检查以确保所有细胞已脱离。
9. 向培养瓶中加入5ml胰酶中和液，将消化后的细胞转移至50ml离心管中。再加入5ml胰酶中和液冲洗培养瓶，以保证所有细胞被收集。
10. 在显微镜下观察剩余细胞数量以确定是否收集成功，细胞数量应小于5%。
11. 以1000转/分离心收取的细胞悬液5分钟，然后在培养基中重悬细胞。
12. 细胞计数，然后将细胞以推荐的细胞密度接种在包被好的培养瓶中。
原代细胞、细胞系与细胞株的区别
与细胞系相反，原代细胞是非常敏感的细胞，需要传统培养基之外的额外营养物质。为了优化原代细胞的存活和生长，需要针对每种细胞类型选择特定的培养基。例如，内皮细胞对营养的需求与上皮细胞或神经元有很大区别，因此需要特制的内皮细胞培养基。而传统的细胞培养基依靠血清提供生长因子、激素、脂质和其他的未知组分，以支持细胞的生长。但对于原代细胞，高血清水平可导致细胞分化，或促进污染细胞如成纤维细胞的生长。
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文献和实验「没爹」小鼠来了！科学家只用 1 个卵细胞培育出健康小鼠，还可正常繁殖后代
mammalian oocytes 的研究论文，通过基因编辑技术，他们探索了靶向表观遗传改造是否可以改善哺乳动物的孤雌生殖。他们的研究结果证明，在对 ICRs 进行基因编辑改造之后，能够直接从单个未受精的小鼠卵母细胞产生可存活的足月后代。 本研究报道的哺乳动物的孤雌生殖，是单性生殖的重要科学进步。 图片来源：PNAS 主要研究内容 研究人员指出，由于基因组印记的存在，先前旨在产生哺乳动物孤雌生殖后代的研究工作均失败了。因此，研究人员首先采用了不同的方法尝试去克服这个问题。 他们从雌性小鼠身上取出
实验材料： 1.软骨细胞来源：动物材料可选用未成年兔的膝关节、鸡胚胸软骨。人体材料可取自引产胎儿或成年人手术切除的软骨标本； 2.清洗液：不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2； 3.消化液：0.2%胶原酶Ⅱ溶液，用PBS液配制，过滤除菌； 4.培养液：RPMI1640或Ham F12、DMEM培养基，一般在培养液中加20%—30
. 尼龙膜，40μm筛网； 11. 普通器皿，30ml，或离心管50ml，带圆锥底部便于细胞离心； 12. 解剖刀片，10号； 13. 解剖刀柄，3号； 14. 镊子，2对（1大1小）； 15. 矿油凝胶（凡士林）； 16. 克隆杯，6mm； 17. 分离软骨用的锁子甲手套； 实验方法： 1. 组织收集和细胞分离； （1） 无菌条件下，用10号解剖刀片小心从软骨下骨下面解剖软骨。将软骨薄片置于含PBSA的9cm Petri培养皿中； （2） 用镊子和刀片仔细将软骨切成1mm3小块
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