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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
原代细胞
- 细胞类型:
见说明书
- 肿瘤类型:
见文献
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 库存:
5×105
- 生长状态:
良好
- 年限:
永久
- 运输方式:
新鲜/干冰
- 器官来源:
消化系统
- 是否是肿瘤细胞:
见文献
- 细胞形态:
正常
- 免疫类型:
见文献
- 物种来源:
大鼠
- 相关疾病:
见文献
- 组织来源:
消化系统
- 规格:
5×105
细胞简介:
小肠是主要的消化器官,它含有肠液、胰液和胆汁,分别都含有消化蛋白质、糖、和脂肪的酶,能对蛋白质、糖、脂肪进行消化,使之变为简单的物质,如氨基酸、葡萄糖、甘油三脂等,同时胆汁能对脂肪进行分解,促进脂肪的消化。因此营养物质主要在小肠被消化,是人体的主要消化器官。而小肠上皮细胞有分泌作用,所以研究小肠上皮细胞对研究小肠功能有重要意义。
本公司生产的小鼠小肠上皮细胞采用酶解法制备而来,细胞总量约为5×105/T25方瓶,CK-18、CK-19呈阳性,细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基信息:
我们推荐使用康朗生物研制的小鼠小肠上皮细胞专用完全培养液(产品编号:KLM6061-5)作为体外培养小鼠小肠上皮细胞的培养基。
细胞培养过程中,传代是非常重要的环节,若操作不当会给细胞带来不可逆转的伤害,原代细胞因其培养难度高且传代次数有限,细胞消化的步骤需要格外细心与谨慎。康朗生物根据其丰富的原代细胞培养经验,总结出一套细胞消化的方法,有效降低了消化步骤对细胞的操作。现分享给大家:1. 当细胞达到80-90%融合时需要传代培养。
2. 提前准备好多聚赖氨酸(PLL,货号KL0403)或纤维粘连蛋白(BPF,货号KL8248)包被好的培养瓶。
3. 将完全培养基,胰酶/EDTA消化液(T/E,货号KL0103),胰胰中和液(TNS,货号KL0113)和不含钙镁离子的DPBS(货号KL0303)加热至室温。我们不推荐用37度水浴加热试剂和培养基。
4. 用DPBS冲洗细胞。
5. 以T-75培养瓶为例,向培养瓶中加入8mlDPBS,然后加入2ml胰酶/EDTA消化液。轻轻摇动培养瓶保证细胞被胰酶/EDTA消化液完全覆盖。将培养瓶置于37度培养箱1-2分钟直到细胞变圆。在显微镜下观察细胞形态变化。
6. 在消化期间,准备一支50ml离心管加入5ml胎牛血清(FBS,货号KL0500)。
7. 将胰酶/EDTA消化液从培养瓶中吸出至50ml离心管中(一小部分细胞已消化下来),将培养瓶继续置于37度培养箱中1-2分钟(此时培养瓶中没有液体)。
8. 在孵化结束时,轻轻拍打培养瓶侧面使细胞脱离表面。在显微镜下检查以确保所有细胞已脱离。
9. 向培养瓶中加入5ml胰酶中和液,将消化后的细胞转移至50ml离心管中。再加入5ml胰酶中和液冲洗培养瓶,以保证所有细胞被收集。
10. 在显微镜下观察剩余细胞数量以确定是否收集成功,细胞数量应小于5%。
11. 以1000转/分离心收取的细胞悬液5分钟,然后在培养基中重悬细胞。
12. 细胞计数,然后将细胞以推荐的细胞密度接种在包被好的培养瓶中。
原代细胞、细胞系与细胞株的区别
与细胞系相反,原代细胞是非常敏感的细胞,需要传统培养基之外的额外营养物质。为了优化原代细胞的存活和生长,需要针对每种细胞类型选择特定的培养基。例如,内皮细胞对营养的需求与上皮细胞或神经元有很大区别,因此需要特制的内皮细胞培养基。而传统的细胞培养基依靠血清提供生长因子、激素、脂质和其他的未知组分,以支持细胞的生长。但对于原代细胞,高血清水平可导致细胞分化,或促进污染细胞如成纤维细胞的生长。
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复层鳞状上皮,一般有10多层细胞。被覆于全身皮肤、口腔、喉部、鼻咽的一部分、食道、阴道的全部以及子宫颈。鳞状上皮细胞分为基底层细胞、中层细胞和表层细胞。 (1)基底层细胞 1)内底层细胞:细胞呈圆形或卵圆形,直径12~15μm;胞质巴氏染色呈深蓝、暗绿和灰蓝色,HE染色呈暗红色;胞核圆形或卵圆形,居中,染色质细颗粒状;核与胞质比(即核的直径与细胞质幅缘之比,简称核胞质比)约1:(0.5~1)。 2)外底层细胞:细胞呈圆形或椭圆形,直径15~30μm;胞质较丰富
中药药理学实验 【目的】 1.了解生大黄、制大黄对小肠蠕动的影响。 2.掌握整体动物肠运动的实验方法。 【原理】利用黑色炭末作为指示剂,观察炭末在肠道的推进距离。口服生大黄可刺激肠蠕动加速,有泻下作用。 【器材】 天平、鼠笼、手术器材、长尺、注射器、托盘等。 【药品】50%生大黄液、50%制大黄液、生理盐水(NS) 以上药液均含10%炭末。 【动物】 小鼠 【方法】 1.取禁食不禁
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