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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
原代细胞
- 细胞类型:
见说明书
- 肿瘤类型:
见文献
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 库存:
5×105
- 生长状态:
良好
- 年限:
永久
- 运输方式:
新鲜/干冰
- 器官来源:
心脏
- 是否是肿瘤细胞:
见文献
- 细胞形态:
正常
- 免疫类型:
见文献
- 物种来源:
大鼠
- 相关疾病:
见文献
- 组织来源:
心脏
- 规格:
5×105
细胞简介:
心肌的工作细胞包括心房肌细胞和心室肌细胞,受植物性神经支配,属于有横纹的不随意肌,具有兴奋收缩的能力。动物体内心肌细胞为短圆柱状,一般只有一个细胞核,心肌细胞之间有闰盘结构。该处细胞膜凹凸相嵌,并特殊分化形成桥粒,彼此紧密连接,但心肌细胞之间并无原生质的连续。心肌细胞的细胞核多位于细胞中部,形状似椭圆或似长方形,其长轴与肌原纤维的方向一致。肌原纤维绕核而行,核的两端富有肌浆,其中含有丰富的糖原颗粒和线粒体,以适应心肌持续性节律收缩活动的需要。
本公司生产的小鼠心肌细胞(新生)采用酶解法制备而来,细胞总量约为5×105/T25方瓶,肌钙蛋白I(cTn I)呈阳性,细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基信息:
我们推荐使用康朗生物研制的小鼠心肌细胞(新生)专用完全培养液(产品编号:KLM6008-5)作为体外培养小鼠心肌细胞(新生)的培养基。
细胞培养过程中,传代是非常重要的环节,若操作不当会给细胞带来不可逆转的伤害,原代细胞因其培养难度高且传代次数有限,细胞消化的步骤需要格外细心与谨慎。康朗生物根据其丰富的原代细胞培养经验,总结出一套细胞消化的方法,有效降低了消化步骤对细胞的操作。现分享给大家:1. 当细胞达到80-90%融合时需要传代培养。
2. 提前准备好多聚赖氨酸(PLL,货号KL0403)或纤维粘连蛋白(BPF,货号KL8248)包被好的培养瓶。
3. 将完全培养基,胰酶/EDTA消化液(T/E,货号KL0103),胰胰中和液(TNS,货号KL0113)和不含钙镁离子的DPBS(货号KL0303)加热至室温。我们不推荐用37度水浴加热试剂和培养基。
4. 用DPBS冲洗细胞。
5. 以T-75培养瓶为例,向培养瓶中加入8mlDPBS,然后加入2ml胰酶/EDTA消化液。轻轻摇动培养瓶保证细胞被胰酶/EDTA消化液完全覆盖。将培养瓶置于37度培养箱1-2分钟直到细胞变圆。在显微镜下观察细胞形态变化。
6. 在消化期间,准备一支50ml离心管加入5ml胎牛血清(FBS,货号KL0500)。
7. 将胰酶/EDTA消化液从培养瓶中吸出至50ml离心管中(一小部分细胞已消化下来),将培养瓶继续置于37度培养箱中1-2分钟(此时培养瓶中没有液体)。
8. 在孵化结束时,轻轻拍打培养瓶侧面使细胞脱离表面。在显微镜下检查以确保所有细胞已脱离。
9. 向培养瓶中加入5ml胰酶中和液,将消化后的细胞转移至50ml离心管中。再加入5ml胰酶中和液冲洗培养瓶,以保证所有细胞被收集。
10. 在显微镜下观察剩余细胞数量以确定是否收集成功,细胞数量应小于5%。
11. 以1000转/分离心收取的细胞悬液5分钟,然后在培养基中重悬细胞。
12. 细胞计数,然后将细胞以推荐的细胞密度接种在包被好的培养瓶中。
原代细胞、细胞系与细胞株的区别
与细胞系相反,原代细胞是非常敏感的细胞,需要传统培养基之外的额外营养物质。为了优化原代细胞的存活和生长,需要针对每种细胞类型选择特定的培养基。例如,内皮细胞对营养的需求与上皮细胞或神经元有很大区别,因此需要特制的内皮细胞培养基。而传统的细胞培养基依靠血清提供生长因子、激素、脂质和其他的未知组分,以支持细胞的生长。但对于原代细胞,高血清水平可导致细胞分化,或促进污染细胞如成纤维细胞的生长。
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文献和实验新生细胞 neoplastic cell,regenerative cell
新生细胞 neoplastic cell, regenerative cell ( 1)( 1)从广义上讲,是指引起组织新生( newformation)的细胞。如炎症、再生、代偿性肥大、虫瘿、肿瘤时新出现的细胞。( 2)目前一般是指后二者,特别是指肿瘤细胞。 ( 2)在昆虫中形成中肠的上皮细胞在蜕皮、变态时常常退化、脱落。此时在一部分中肠组织上有一群被称为新生细胞的细胞。这些细胞分裂增殖后补充组织的缺少部分。在直翅目及鞘翅目中,新生细胞构成再生小块
分离表皮细胞,需要新生鼠的皮肤全层。不知道有血会不会有影响。用乙醚试试?不会出血 方法一一般用酒精擦拭全身以后,直接用剪刀断头处死,滴尽体内血,用棉球擦干净颈部血,然后大头针固定就好了,不到一分钟就行了,而且不会影响细胞的活力,也没有应激反应。方法二既然是要分离细胞要注意无菌操作1、对乳鼠进行消毒:将乳鼠浸泡在75%的酒精中片刻,或用酒精擦拭乳鼠全身。2、处死和放血:用无菌剪刀剪乳鼠的左腋下(相当于心脏的位置)彻底放血。3、取材:取的表皮组织置无菌生理盐水或PBS液中清洗,再进行分细胞
一、概述 整体动物心肌细胞的增殖能力在出生后仅能维持一个短时期,小鼠在出生3周后DNA合成所需的酶的活性及心肌细胞的增殖能力就明显降低至成年鼠水平。小鼠心肌细胞的原代培养,一般选用生后1-10d的乳鼠心脏,尤以出生1-4d的较好,此时心肌细胞已分化充分,适于作各种研究,而出生4d以后的乳鼠心脏中分离出来的心肌细胞较慢发育成为有自律性搏动的心肌细胞。二、试剂1、培养液:1:1 混合的DMEM / F12 培养液,添加终浓度为10%小牛血清(FCS)、100IU/ml 青霉素、100μg/ml
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