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- 上海抚生
- FS-P0516
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- 2025年07月14日
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22
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详见说明书
- 供应商：
上海抚生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
125ug/支*5
英文名称：
产品规格：125ug/支*5
产品用途：每支添加于225ml志贺氏增菌肉汤－新生霉素中每支添加于225ml志贺氏增菌肉汤－新生霉素中
产品图片：
公司提供新生霉素（125ug/支）图片的研培养基，销售培养基，与各大院校、医院、科研单位都有合作并得到了他们的一致好评与认可。公司本着客户至上的原则为客户提供高质量高品质的产品。我们的新生霉素（125ug/支）图片货期快、质量品牌有保障，售后技术服务完善。
操作步骤：
1、新生霉素（125ug/支）图片按、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液；
2、取 25 克样品液加入 225ml mEC 肉汤或 mTSB 肉汤中， 37 ℃ 增菌培养 18-24 小时；
3 、用 3mm 接种环取 1 环增菌液，划线接种到 O157 菌显色培养基上，做 2 个平板；
4 、 37 ℃培养 18-24h ， O157:H7 菌显紫色 ， 大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色， 其它细菌显黄色或无色；
5 、对典型菌落可做 O157:H7 菌血清学试验和全套生化试验。
菌液制备与稀释：
1.新生霉素（125ug/支）图片金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、枯草芽孢杆菌
挑取四代以内（含四代）上述菌种的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基中，30～35℃培养18～24h，使用pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液或0.9%氯化钠溶液进行十倍稀释，制成每1ml含小于100cfu的菌悬液。
(稀释梯度：通常情况下为10-6～10-7、枯草芽孢杆菌10-5～10-6)
2. 白色念珠菌
挑取四代以内（含四代）的白色念珠菌新鲜培养物至沙氏葡萄糖液体培养基中，经20～25℃培养2～3天；使用pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液或0.9%氯化钠溶液进行十倍稀释，制成每1ml含小于100cfu的菌悬液。
(稀释梯度：通常情况下为10-6～10-7)
3. 黑曲霉
挑取四代以内（含四代）的新鲜培养物至沙氏葡萄糖琼脂培养基斜面中，经20～25℃培养5～7天（生长大量黑色菌丝）,加入5ml含0.05%聚山梨脂80的pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液，将孢子洗脱。使用含0.05%聚山梨脂80的pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液或含0.05%聚山梨脂80的0.9%氯化钠溶液进行十倍稀释，制成每1ml含小于100cfu的菌悬液。
(稀释梯度：通常情况下为10-5～10-6，因菌丝数量不同，可能有误差)
培养基制备：
被检培养基：称取培养基30.0g于1000ml纯化水中,微温溶解，分装试管，121℃高压灭菌15分钟,冷却，备用。
另准备胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基进行稀释菌悬液计数，培养基灭菌后置于44.5℃水浴保温待用。
新生霉素（125ug/支）图片【实验方法】
1. 培养基阳性组：取稀释后的各试验菌悬液1ml分别加于预先制备的试管培养基中，每种细菌接种两支试管。同时分别取1ml菌悬液加于无菌空平皿中，用于计数，每种细菌做两个平板。
2. 培养基阴性组：即空白对照，即不添加菌液。
3. 接种量计数：步骤1中的平皿中，细菌倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，霉菌和白色念珠菌倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基。同时每种培养基做1个空白。
4. 培养条件：
无菌检查：20～25℃培养14天或直至出现浑浊（不超过14天）
MPN计数：30～35℃培养箱中培养3天
控制菌检查：30～35℃培养箱中培养18～24小时
倾注计数用的的胰酪大豆胨琼脂培养基平板置30～35℃培养箱中培养3天
倾注计数用的沙氏葡萄糖琼脂培养基平板置20～25℃培养箱中培养3～5天
IL12B Others Human 人 IL12B / P40 人细胞裂解液 (阳性对照)
真皮微血管内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
RPS6KA2 Others Human 人 RSK3 / RPS6KA2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
VERO C1008细胞，非洲绿猴肾细胞 人胰腺腺泡上皮癌,HPAC细胞 CM-M087小鼠软骨细胞完全培养基100mL
大鼠胰腺外分泌腺细胞;AR42J
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS5A
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文献和实验样品的蛋白浓度。 BCA法： 1.按50体积BCA试剂A加入1倍体积BCA试剂B配置适量BCA工作液，充分混匀。 2.将BSA冻干标准品（10mg/支）用生理盐水或PBS稀释成2000ug/ml，1000 ug/ml,500 ug/ml,250 ug/ml,125 ug/ml,62.5 ug/ml,31.25 ug/ml,15.625 ug/ml八个浓度的蛋白标准溶液。 3.M231用细胞总蛋白提取试剂提取总蛋白。 4.各取20ul蛋白标准品和待测M231
0.0 1.5 0.753 3.2标准蛋白曲线的制作 取11支编号的试管，分别准确加入如下表所示的牛血清白蛋白溶液，然后分别加入1.5ml考马斯亮蓝G-250蛋白染色试剂，摇匀，放置3min后，在595nm比色读取OD值，结果如下表所示： 管号 标注蛋白浓度（ug/ml） 牛血清蛋白标 准液（ml） 水（ml） 考马斯亮蓝G-250 蛋白染色试剂（ml） OD595
红蛋白含量。 （4）.活性碳/葡聚糖处理血清：激素含量大大降低。 （5）.透析型胎牛血清：次黄嘌呤和胸腺核苷含量大大降低。 82、其他细胞培养用液：除培养基、血清、谷氨酰胺外，其他几种液体也属必须，不可省略。 （1）.双抗：200倍，（1 ml/支）其终浓度为青霉素100 U/ml；链霉素100 ug/ml，-24 ℃保存。 （2）.L-谷氨酰胺：100倍，（1 ml/支）， 终浓度2 mM，-24 oC
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