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- 康朗生物
- KLR2025
- 上海
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
原代细胞
- 细胞类型：
见说明书
- 肿瘤类型：
见文献
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 库存：
5×105
- 生长状态：
良好
- 年限：
永久
- 运输方式：
新鲜/干冰
- 器官来源：
神经
- 是否是肿瘤细胞：
见文献
- 细胞形态：
正常
- 免疫类型：
见文献
- 物种来源：
大鼠
- 相关疾病：
见文献
- 组织来源：
神经
- 规格：
5×105
细胞简介：
周细胞是一种包围全身毛细血管和静脉中内皮细胞的细胞，可以收缩。周细胞嵌入毛细血管内皮细胞的基膜中，通过物理接触和旁分泌信号与内皮细胞进行细胞通讯，监视和稳定内皮细胞的成熟过程。在大脑中周细胞帮助维持血脑屏障，周细胞是大脑神经血管单位的重要组成部分。此外，周细胞还具有调控毛细血管血流量、细胞碎屑清除和吞噬以及血脑屏障渗透性的作用。
本公司生产的大鼠脑周细胞采用密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×105/T25方瓶，α-SMA、神经元-胶质抗原2（neuron-glial antigen 2，NG 2）免疫荧光染色呈阳性，细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基信息：
我们推荐使用康朗生物研制的大鼠脑周细胞专用完全培养液（产品编号：KLR5025-6）作为体外培养大鼠脑周细胞的培养基。
细胞培养过程中，传代是非常重要的环节，若操作不当会给细胞带来不可逆转的伤害，原代细胞因其培养难度高且传代次数有限，细胞消化的步骤需要格外细心与谨慎。康朗生物根据其丰富的原代细胞培养经验，总结出一套细胞消化的方法，有效降低了消化步骤对细胞的操作。现分享给大家：1. 当细胞达到80-90%融合时需要传代培养。
2. 提前准备好多聚赖氨酸（PLL，货号KL0403）或纤维粘连蛋白（BPF，货号KL8248）包被好的培养瓶。
3. 将完全培养基，胰酶/EDTA消化液（T/E，货号KL0103），胰胰中和液（TNS，货号KL0113）和不含钙镁离子的DPBS（货号KL0303）加热至室温。我们不推荐用37度水浴加热试剂和培养基。
4. 用DPBS冲洗细胞。
5. 以T-75培养瓶为例，向培养瓶中加入8mlDPBS，然后加入2ml胰酶/EDTA消化液。轻轻摇动培养瓶保证细胞被胰酶/EDTA消化液完全覆盖。将培养瓶置于37度培养箱1-2分钟直到细胞变圆。在显微镜下观察细胞形态变化。
6. 在消化期间，准备一支50ml离心管加入5ml胎牛血清（FBS，货号KL0500）。
7. 将胰酶/EDTA消化液从培养瓶中吸出至50ml离心管中（一小部分细胞已消化下来），将培养瓶继续置于37度培养箱中1-2分钟（此时培养瓶中没有液体）。
8. 在孵化结束时，轻轻拍打培养瓶侧面使细胞脱离表面。在显微镜下检查以确保所有细胞已脱离。
9. 向培养瓶中加入5ml胰酶中和液，将消化后的细胞转移至50ml离心管中。再加入5ml胰酶中和液冲洗培养瓶，以保证所有细胞被收集。
10. 在显微镜下观察剩余细胞数量以确定是否收集成功，细胞数量应小于5%。
11. 以1000转/分离心收取的细胞悬液5分钟，然后在培养基中重悬细胞。
12. 细胞计数，然后将细胞以推荐的细胞密度接种在包被好的培养瓶中。
原代细胞、细胞系与细胞株的区别
与细胞系相反，原代细胞是非常敏感的细胞，需要传统培养基之外的额外营养物质。为了优化原代细胞的存活和生长，需要针对每种细胞类型选择特定的培养基。例如，内皮细胞对营养的需求与上皮细胞或神经元有很大区别，因此需要特制的内皮细胞培养基。而传统的细胞培养基依靠血清提供生长因子、激素、脂质和其他的未知组分，以支持细胞的生长。但对于原代细胞，高血清水平可导致细胞分化，或促进污染细胞如成纤维细胞的生长。
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文献和实验剥开软组织，剥离骨外膜，暴露左侧顶骨，在冠状缝后4mm，中线旁左右侧2.5mm处，用高速颅骨钻钻2个小孔，并扩大为直径6mm的骨窗，暴露蛛网膜并保持硬脑膜完整。 将T型撞杆置于硬脑膜外，向上调节撞针2-3mm，使用20g 砝码从20cm高处，呈自由落体冲击于T型撞杆时，可以压缩深度是2-3mm，不打穿硬脑膜，造成局部脑挫裂伤，打击后，立即从致伤位置解除，以免二次击伤。 最后用古蜡封孔，防止污染，再逐层缝合头皮。
周细胞质 cortical cytoplasm 亦称表层细胞质、皮质原生质（corical prot-oplasm）或表层原生质（protoplasmic corte-x）。一般认为，是位于细胞表面靠近细胞膜内侧的细胞质，在多数情况下为凝胶状态。在细胞学上称为皮质（cortex）的，就是指这一部分。由于在显微镜下看不到它与内质之间有明显的界限，所以从表面到达哪一部分才算是表层，对此各研究者的看法是多少有些不同的。从功能方面来看，已知周细胞质与内质有着明显不同的作用（如受精时的活化
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