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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
450
- 英文名:
Instant Immunohistochemistry Kit For Primary Antibody From Rabbit Or Mouse
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
- 规格:
80T|160T
特别提示:包括即用型免疫组化试剂盒(小鼠/兔源一抗)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:即用型免疫组化试剂盒(小鼠/兔源一抗)
英文名称:Instant Immunohistochemistry Kit For Primary Antibody From Rabbit Or Mouse
产品货号:ZN1833
产品规格:80T|160T
本试剂盒采用SABC系统,适于一抗为小鼠或者兔来源的抗体。SABC 是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素对生物素分子有极高的亲和力,是一般抗原抗体亲和力的一百万倍,等电点 pI=6.0~6.5,对组织和细胞的非特异吸附很低。根据研究,SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶可以保证 SABC 具有很高的敏感性。所以 SABC 兼具高敏感性,低背景和操作简便等优点。百奥莱博采用独特方法生产的SABC不仅有很强的信号放大作用,而且非常稳定。
试剂盒组成:
| 组分 | 规格 |
| 5%BSA封闭液 | 6ml/12ml |
| 生物素标记山羊抗小鼠/兔IgG | 6ml/12ml |
| SABC | 6ml/12ml |
保存条件:4℃可保存一年,应避免冷冻。
石蜡片染色步骤:
1. 石蜡切片,常规脱蜡至水。
2. 3%H2O2去离子水室温孵育5-10分钟,以消除内源性过氧化物酶活性。PBS冲洗,5分钟×3次。
3. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4. 封闭。5%BSA封闭液 37℃孵育30分钟,甩干,勿洗。
5. 滴加一抗(小鼠或者兔IgG),37℃孵育1-2 小时或4℃过夜。PBS冲洗,5分钟×3次。
6. 滴加生物素标记山羊抗小鼠/兔IgG,37℃孵育30分钟。PBS冲洗,5分钟×3次。
7. 滴加 SABC,37℃孵育30分钟。PBS冲洗,5分钟×3次。
8. 显色:镜下控制反应时间。显色剂可选DAB(ZN1968)或AEC(ZN1963)。自来水充分冲洗。
9. 根据需要进行苏木素(ZN1971)复染,染色时间为0.5-2分钟。脱水,透明。
10. 选用中性树胶,水溶性封片剂(ZN2946)或其他适当的封片剂封片。
建议:
1. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(ZN1955)、EDTA抗原修复液(ZN1951)、PBS缓冲液、TBS缓冲液(ZN1953)等作为抗原修复液。
2. 酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、抗原修复液Ⅰ(ZN1954,与热修复配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。
除了即用型免疫组化试剂盒(小鼠/兔源一抗),,我公司还供应以下相关产品:
名称:剥离*烷
货号:SY0794
规格:200ml
本品为剥离*烷,组分主要为4%的二氯二甲基*烷。备聚丙*酰胺凝胶时,常使用Bind-Silane(亲和*烷)处理长玻璃板,使凝胶与之粘贴。用Repel-Silane(剥离*烷)处理短玻璃板,使凝胶易于分离。
使用方法
制备聚丙*酰胺凝胶时,请先将长、短玻璃板用1M的NaOH浸泡一段时间,并用洗涤剂清洗一遍,之后用水洗掉洗涤剂,再用去离子水冲洗干净。zuì后用乙醇擦拭玻璃板。
1 长玻璃板的处理
每次铺胶前均需用亲和*烷对长玻璃板进行处理。
1)用镜头纸蘸取少许亲和*烷溶液(1ml左右,视玻璃板大小而定)涂在长玻璃板上,自上而下涂一次,从左至右涂一次,将整块玻璃板涂满,涂匀。
2)5-10分钟后,用干净的镜头纸轻轻擦拭玻璃板以除去多余的亲和*烷。
【注】:或用95%的乙醇清洗长玻璃板3次,以去除多余的亲和*烷。
2短玻璃板的处理
每次铺胶前均需用剥离*烷对短玻璃板进行硅化处理。
1)处理短玻璃板前必需更换手套,以防手套上的亲和*烷污染短玻璃板,使短玻璃板也粘胶。
2)用镜头纸蘸取适量剥离*烷溶液(1.5ml左右,视玻璃板大小而定)涂在短玻璃板上,自上而下涂一次,从左至右涂一次,将整块玻璃板涂满,涂匀。
3)5-10分钟后,用干净的镜头纸轻轻擦拭玻璃板以除去多余的剥离*烷。
储存条件:室温,有效期一年。
名称:McDoWell固定液
货号:GL2585
规格:500ml
用途:
可用于电镜观察心内膜心肌活检。
注意事项:
主要由甲醛、*二醛等等组成。
储存条件:室温,避光,12个月
名称:多*甲醛-Tween20溶液(1%/0.05%)
货号:GL0584
规格:500ml
用途:
组织固定,常用于tunel实验
注意事项:
主要由1%多*甲醛、0.01% Tween20、磷酸盐组成,pH值为7.4。
储存条件:室温,12个月
名称:碱性磷酸酶封闭液(Levamisole法)
货号:GL1024
规格:100ml
用途:
免疫组织化学染色中内源性碱性磷酸酶封闭液,也称灭活液。
注意事项:
主要由左旋咪唑/盐酸噻咪唑组成。可以与显影液混合使用。
储存条件:室温,12个月
名称:内源性亲和素封闭液
货号:GL1030
规格:100ml
用途:
免疫组化封闭液
注意事项:
主要由脱脂奶粉、PBS等组成,替代亲和素。
储存条件:-20℃,3个月
名称:冰冻切片快速抗原修复液(5×)
货号:GL1102
规格:100ml
用途:
适合用于冰冻切片的快速抗原修复液,只需室温孵育5分钟即可完成对冰冻切片样品使用多*甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
注意事项:
本抗原修复液含有了广泛使用的SDS等抗原修复试剂等,pH值约为7.4,可以快速有效地去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联
储存条件:4℃,12个月
名称:EDTA抗原修复液(50×)
货号:GL1105
规格:100ml
用途:
抗原修复缓冲液
注意事项:
主要由EDTA、Tris等组成,调PH8.0
储存条件:室温,12个月
名称:ELISA包被缓冲液(1×)
货号:GL1137
规格:100ml|500ml
用途:
ELISA检测,又称为重碳酸盐缓冲液。稀释抗体至合适浓度。
注意事项:
由碳酸盐,叠氮钠等组成,ph为9.6。
储存条件:室温,12个月
名称:Western封闭液
货号:GL1541
规格:100ml
用途:
用于Western时转移了蛋白样品的PVDF膜或NC膜(硝酸纤维素)的封闭
注意事项:
主要由TBS、封闭剂、防腐剂、antifoam A等组成,一般每张膜封闭需要5-10ml。
储存条件:4℃,6个月
名称:Western封闭液(尼龙膜)
货号:GL1542
规格:100ml
用途:
用于Western时转移了蛋白样品的尼龙膜的封闭
注意事项:
主要由TBS、封闭剂、防腐剂、antifoam A等组成,一般每张膜封闭需要5-10ml。
储存条件:4℃,3个月
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文献和实验性免疫球蛋白产生交叉反应, 例如:检测小鼠样本蛋白,则不应选择小鼠或大鼠源的一抗,最好选兔源的一抗,则二抗则可选择偶联了检测分子(酶、荧光素、生物素等)的抗兔IgG。如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况,除免疫组化外的其它对不含内源性免疫球蛋白样本的检测方法,则抗体宿主物种的影响不大,如对不含IgG 的细胞裂解物样本的western blotting检测。 尽管如此,含有血清的组织裂解物和组织培养上清中含有免疫球蛋白,还原变性样本中含IgG,在western blot 检测中则结合
图 1 实验流程与常见问题索引 Q1:染色结果呈阴性,是怎么回事? (1)抗体来源选择错误:本试剂盒二抗为抗兔/鼠,请确保一抗来源的种属为兔源或鼠源。 (2)组织切片本身不存在目的蛋白:可通过 The Human Protein Atlas 数据库或 UniProt数据库查询目的蛋白在细胞或组织中的表达情况。 (3)抗体浓度和质量问题:提高抗体工作浓度或延长孵育时间;确认抗体可进行IHC实验,通过非IHC实验排除抗体质量问题。 (4)脱蜡不完全:可根据切片上是否存在透明颗粒,判断是否存在脱蜡
,则不应选择小鼠或大鼠源的一抗,最好选兔源的一抗,则二抗则可选择偶联了检测分子(酶、荧光素、生物素等)的抗兔IgG。 如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况,除免疫组化外的其它对不含内源性免疫球蛋白样本的检测方法,则抗体宿主物种的影响不大,如对不含IgG 的细胞裂解物样本的western blotting检测,尽管如此,含有血清的组织裂解物和组织培养上清中含有免疫球蛋白,还原变性样本中含IgG,在western blot 检测中则结合出现IgG 分子50 and 25 kDa 的重链和轻链
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