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- 详细信息
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264
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
20T|50T|100T
特别提示:包括TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC标记POD法,通用)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC标记POD法,通用)
产品货号:TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC标记POD法,通用)
产品规格:20T|50T|100T
TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒(FITC 标记/POD 法)是用来检测细胞在凋亡过程中细胞核DNA 的断裂情况,其原理是生物素(biotin)标记的dUTP 在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT Enzyme)的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂DNA 的3’-OH 末端,再以streptavidin-FITC 与生物素结合,使结果可用荧光显微镜检测;荧光素亦可被偶联过氧化物酶Peroxidase(POD)的抗荧光素抗体(POD-conjugated Anti-FITC)标记,在POD 底物二氨基联*(代"苯")*(DAB)的存在下,产生很强的颜色反应(呈棕色),特异准确地定位正在凋亡的细胞,因而在普通光学显微镜下即可观察和计数凋亡细胞。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA 的断裂,因而没有3’-OH 形成,很少能够被标记或染色。
注意事项
1. 各个样本请用免疫组化笔做好标记,另外加2 张样本切片分别用于阳性片和阴性片制备并做好标记。
2. 在每步反应或浸洗的间隙时,配制下一步即用的工作液。
3. 反应液最好根椐计算好的样本数量集中配制,再分别滴加于各样本上,避免因每个样本单独配制而产生的试剂损耗,TdT 酶反应液如需短暂保存时,请置于冰上。
4. 配制好的DAB 工作液应为浅棕色,如颜色过深,请勿使用。
5. 操作请戴手套,防止试剂沾染皮肤,如有沾染请立即用大量清水冲洗。
除了TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC标记POD法,通用),,我公司还供应以下相关产品:
| 货号 | 名称 | 规格 |
| YT133 | Annexin V-EGFP细胞凋亡检测试剂盒 | 20次|50次 |
| YT134 | TUNEL检测阳性对照制备试剂盒 | 10次 |
| YT138 | Caspase 1 活性检测试剂盒 | 20次|100次 |
| YT143 | Caspase 8 活性检测试剂盒 | 20次|100次 |
| YT149 | 罗丹明123 | 5mg |
| WE0326 | 细胞周期与凋亡检测试剂盒 | 50次 |
| WE0327 | Alexa Fluor 488/PI细胞凋亡检测试剂盒 | 50次 |
| SNM538 | TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒(显色法,通用型) | 50T|20T |
| KFS199 | Caspase 3荧光法检测试剂盒(AFC) | 20T|50T|100T |
| KFS317 | XTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂 | 500T|1000T |
| SY0478 | AnnexinV-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒 | 20T |
| SY0495 | DAPI双链DNA染料 | 10mg |
| ZN1529 | 细胞凋亡检测试剂盒V(POD) | 100T |
| ZN1542 | MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 | 500T |
| ZN1543 | WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 | 100T/500T |
| QN1293 | CCK-8试剂盒 | 100T|500T|500T*10 |
| QN1310 | 线粒体提取试剂盒 | 50T|100T |
| HR0439 | 正常细胞、凋亡细胞与坏死细胞检测试剂盒 | 100T |
| HR0453 | DAPI染色试剂盒 | 100T |
| HR0459 | Hoechst33258染色试剂盒 | 100T |
| HR0466 | Colchicine | 25ml |
| HR0469 | Thymidine | 5ml |
| HR0433 | Caspase 9活性检测试剂盒 | 20T/50T/100T |
| HR0427 | Caspase 6活性检测试剂盒 | 20T/50T/100T |
| HR8287 | Annexin V Alexa Fluor647/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒 | 50T/100T |
| HR0475 | Caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO | 200μl |
| HR0515 | Brdu | 100mg |
| HR0411 | 细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒 | 50T/100T |
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文献和实验的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。由此,TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型,绿色荧光)为例) TUNEL检测:使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min,再使用二甲苯脱蜡2次,每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗,便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
用了许多方法检测小鼠的肝脏、脑部、睾丸等组织的细胞凋亡,其中 TUNEL 法做的最多,我购买的试剂盒主要是 roche、 promega 公司,结果大多数成功,偶尔也有失败,下面我把实验中的关键问题与大家共享一下,同时也希望能对初学者有所帮忙。 TUNEL 法的实验原理 基本原理:对不同组织切片先增加细胞膜通透性,然后让 rTDT 和生物标记的 dTUTP 进入细胞内,在 rTDT 的辅助下 dTUTP 与核断裂的 DNA 3』-OH 结合,再用 HRP 标记的链霉
荧光素FITC标记抗体的方法(Marsshall法、Chadwick法、改良法、透析标记法)
Marsshall(1958)法标记荧光抗体,也可以根据条件采用Chadwick等标记法或Clark等(1963)的透析标记法。 1 . Marsshall 法 (1)材料抗体球蛋白溶液、0.5mol/L(pH9.0)碳酸盐缓冲液、无菌生理盐水、异硫氰酸荧光素、1%硫柳汞水溶液、50mL小烧杯、4℃冰箱、电磁搅拌器、透析袋、玻棒、pH7.2或3.0的0.01mol/L PBS等。 (2)方法及步骤 ①抗体的准备 取适量已知
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