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HaloTag® 哺乳动物Pu
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说明
HaloTag® Mammalian Pull-Down and Labeling System(HaloTag® 哺乳动物Pull-Down 和标记系统,Cat.# G6500) 用于捕获和纯化细胞内成对的和高等级的蛋白复合物,包括瞬时的或弱相互作用的伴侣蛋白。该系统包含 HaloTag®TMRDirect™ Ligand(HaloTag® TMRDirect™ 配基),可以用同一种载体研究相关的细胞定位和实时成像,以进一步理解蛋白的全部功能。而HaloTag® Mammalian Pull-Down System 不包含HaloTag®TMRDirect™配基。 依赖于人巨细胞病毒(CMV) 即刻早期增强子、T7 或SP6 RNA聚合酶启动子,HaloTag® Control Vector (HaloTag® 对照载体) 可以在哺乳动物细胞、大肠杆菌或体外表达系统中表达HaloTag® 蛋白。它可用作任何HaloTag® 实验系统的对照,也可用于哺乳动物细胞中HaloTag® 的稳定和瞬时表达;如想获得HaloTag® 的稳定表达,共转染的载体需要含有选择标记。 Protease Inhibitor Cocktail, 50X ( 蛋白酶抑制剂混合物,50 X)是针对不同靶标蛋白酶的六种不同蛋白酶抑制剂的混合物。该产品以 冻干的形式提供,可用100% 乙醇或DMSO 重悬。 Mammalian Lysis Buffer ( 哺乳动物裂解缓冲液) 是为HaloTag®哺乳动物表达系统[ 如HaloTag® Mammalian Pull-Down and Labeling Systems 以及HaloCHIP™ System (Cat.# G9410)] 而设计的,配方中含有50mM Tris-HCl ,150mM NaCl,1% Triton® X-100 和0.1% 脱氧胆酸钠(pH 7.5)。
特点
• 直接从裂解液中快速、高效地共价捕获成对的和高等级的蛋白复合物:增强了对蛋白伴侣的捕获,包括瞬时相互作用。 • 纯度高,背景低:提高了蛋白鉴定的精度;共价连接使得诱饵蛋白在需要的时候可以保留下来。 • 能用荧光标记相同的基因融合物:将复合物捕获和细胞定位联系起来。 • 与下游所有的分析方法都兼容:可自由地在各种应用中鉴定复合物,包括质谱。
操作手册
Technical Manual TM342
储存条件
将10X TBS 缓冲液和SDS 洗脱缓冲液储存于室温,HaloLink™ Resin (HaloLink™ 树脂) 和Mammalian Lysis Buffer (哺乳动物裂解缓冲液) 储存于4 ℃,Protease Inhibitor Cocktail ( 蛋白酶抑制剂混合物) 和HaloTag® TMRDirect™ Ligand (HaloTag®TMRDirect™ 配基) 储存于-20℃。
图片
(点击放大图片)
用HaloTag® 融合蛋白作诱饵,应用HaloTag® mammalian pull-down 系统进行检测的示意图。
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