HaloTag® 哺乳动物Pull-Down和标记系统

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说明

HaloTag^® Mammalian Pull-Down and Labeling System(HaloTag^® 哺乳动物Pull-Down 和标记系统，Cat.# G6500) 用于捕获和纯化细胞内成对的和高等级的蛋白复合物，包括瞬时的或弱相互作用的伴侣蛋白。该系统包含 HaloTag^®TMRDirect™ Ligand(HaloTag^® TMRDirect™ 配基)，可以用同一种载体研究相关的细胞定位和实时成像，以进一步理解蛋白的全部功能。而HaloTag^® Mammalian Pull-Down System 不包含HaloTag^®TMRDirect™配基。

依赖于人巨细胞病毒(CMV) 即刻早期增强子、T7 或SP6 RNA聚合酶启动子，HaloTag^® Control Vector (HaloTag^® 对照载体) 可以在哺乳动物细胞、大肠杆菌或体外表达系统中表达HaloTag^® 蛋白。它可用作任何HaloTag^® 实验系统的对照，也可用于哺乳动物细胞中HaloTag^® 的稳定和瞬时表达；如想获得HaloTag^® 的稳定表达，共转染的载体需要含有选择标记。

Protease Inhibitor Cocktail, 50X ( 蛋白酶抑制剂混合物，50 X)是针对不同靶标蛋白酶的六种不同蛋白酶抑制剂的混合物。该产品以
冻干的形式提供，可用100% 乙醇或DMSO 重悬。

Mammalian Lysis Buffer ( 哺乳动物裂解缓冲液) 是为HaloTag^®哺乳动物表达系统[ 如HaloTag^® Mammalian Pull-Down and Labeling
Systems 以及HaloCHIP™ System (Cat.# G9410)] 而设计的，配方中含有50mM Tris-HCl ，150mM NaCl，1% Triton^® X-100 和0.1%
脱氧胆酸钠(pH 7.5)。

特点

• 直接从裂解液中快速、高效地共价捕获成对的和高等级的蛋白复合物：增强了对蛋白伴侣的捕获，包括瞬时相互作用。

• 纯度高，背景低：提高了蛋白鉴定的精度；共价连接使得诱饵蛋白在需要的时候可以保留下来。

• 能用荧光标记相同的基因融合物：将复合物捕获和细胞定位联系起来。

• 与下游所有的分析方法都兼容：可自由地在各种应用中鉴定复合物，包括质谱。

操作手册

Technical Manual TM342

储存条件

将10X TBS 缓冲液和SDS 洗脱缓冲液储存于室温，HaloLink™ Resin (HaloLink™ 树脂) 和Mammalian Lysis Buffer (哺乳动物裂解缓冲液) 储存于4 ℃，Protease Inhibitor Cocktail ( 蛋白酶抑制剂混合物) 和HaloTag^® TMRDirect™ Ligand (HaloTag^®TMRDirect™ 配基) 储存于-20℃。

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