BK病毒DNA定量标准

乙型肝炎病毒DNA定量检测临床应用的若干问题与思考

检测国际“金标准”是罗氏公司生产的 COBASAmpliPrep-COBAS TaqMan(CAP-CTM) 实时荧光 PCR HBV DNA 定量检测试剂盒，其血清 HBVDNA 检测灵敏度为 170 拷贝／mL (30 IU/mL)。有学者将雅培公司生产的 HBV DNA 定量检测试剂盒与 CAP-CTM 进行了比较，发现两者灵敏度相似。 目前，国产的 HBV DNA 实时荧光 PCR 定量检测试剂盒灵敏度为 1×10^3 拷贝／mL，与国外产品尚有一定差距。虽然某些国产试剂盒声称检测灵敏

如何获得高质量、高可信度的荧光定量PCR结果--高质量cDNA标准

荧光定量PCR（Real-time PCR）是目前基因表达定量分析的重要检测手段，已经为越来越多的研究者所采用。“好的开始是成功的一半”，Perrez-Novo等(Perrez-Novo et al., 2005)曾报道获得高质量RNA对后续PCR定量结果的准确性是非常重要的，而高质量RNA是获得高质量cDNA的必要条件，所以本文着重介绍一下如何获得高质量cDNA。 高质量cDNA应具备以下几个特点：无基因组DNA残留、能准确反应出样本真实的转录情况和信息完整且浓度适当等特点。

蛋白质的定量法与标准曲线的制备

蛋白质的定量工具。此法的优点是迅速、简便，不消耗样品及不受低浓度的盐类干扰。但此种测定方法的缺点是，许多其它物质在此波长附近亦有吸光现象，如核酸虽在260nm会有最大吸光值，但在280nm处仍会有吸光的现象。一般而言，纯的蛋白质之280nm/260nm比值约1.75，但此数值会依蛋白质含方香族胺基酸含量而变，因此利用此方法测定蛋白质的浓度最大的缺点是，对于测定那些与标准蛋白质中色胺酸(tryptophan)、酪胺酸(tyrosine)含量差别大的蛋白质，测定的浓度会有一定的误差;再者，样品中