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- 供应商:
上海研生
- 库存:
50
- 英文名:
Human Bone PrimacellTM:Osteblasts
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 年限:
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- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 器官来源:
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- 是否是肿瘤细胞:
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- 细胞形态:
Human Bone PrimacellTM:Osteblasts
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- 规格:
1.2ML/1.5ML
小鼠膀胱上皮细胞培养试剂盒【Human Bone PrimacellTM:Osteblasts】
膀胱是一个储尿器官。在哺乳类,它是由平滑肌组成的一个囊形结构,位于骨盆内,其后端开口与尿道相通。膀胱与尿道的交界处有括约肌,可以控制尿液的排出。其中,人膀胱上皮细胞传5代以上仍可以保持原代细胞的分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 虽然膀胱上皮组织机械韧性很强,但利用本公司试剂盒中提供的膀胱上皮组织分离体系来分离,EDTA/EGTA处理过的膀胱上皮组织片能使得膀胱上皮组织细胞的一些功能特性发生改变,从而将膀胱上皮组织细胞分离开来。
本试剂盒适用于分离培养小鼠膀胱上皮细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件,分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外,本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系,可以最大程度地降低所培养的膀胱上皮原代细胞中成纤维细胞的含量。 小鼠膀胱上皮细胞培养试剂盒适合于培养小鼠的膀胱上皮细胞。本试剂盒包含: (1)OptiTDSTM小鼠膀胱上皮细胞组织解离液 (3×1ml) (2)小鼠膀胱上皮细胞组织处理缓冲液(100ml) (3)FibrOutTM小鼠膀胱上皮细胞成纤维抑制剂(1ml(500x)) (4)小鼠膀胱上皮组织洗液(5 x 100 ml) (5)小鼠膀胱上皮细胞生长因子(1ml500x)及血清(5x10ml) (6)小鼠膀胱上皮细胞基础培养基(5 x 100ml) (7)小鼠膀胱上皮组织预备液 (1 x 100 ml) (8)小鼠膀胱上皮细胞培养试剂盒使用说明书
小鼠膀胱上皮细胞培养试剂盒【Human Bone PrimacellTM:Osteblasts】主要来源ATCC、ScienCell、DSMZ、等了解更多品牌请咨询我们在线客服!
小鼠膀胱上皮细胞培养试剂盒【Human Bone PrimacellTM:Osteblasts】一、客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;
收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
二、如为贴壁细胞,请在显微镜下观察细胞密度:
1. 未超过80%汇合度时,用75%酒精(建议配置75%酒精的水也是灭菌超纯水,喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作;然后打开盖子,先用枪头把培养基吸出10ml左右,放在离心管里,然后瓶口过火(严禁直接倾倒),这样可以保证不污染,再用10ml的移液管,将剩余的培液全部吸出,放于离心管中,培养瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培养16hr(时间根据细胞生长情况调整)之后,传代或者冻存。
2. 超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。具体步骤如下:
1) 弃去培养液,用3ml PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次;
2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来;
3) 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中,按要求分瓶。
三、如为悬浮细胞,吸出培养液,1000转/分钟离心5分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
注意:换液时一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造成生长不好。
小鼠膀胱上皮细胞培养试剂盒【Human Bone PrimacellTM:Osteblasts】四、细胞出现问题,可重发的情况有哪些?判定标准是什么?
(1)细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、破损、漏液等,重发;
(2)冻存的细胞复苏后,绝大多数细胞未存活,重发;
(3)存活的细胞静置24小时后,绝大多数细胞未存活,重发;
(4)冻存的细胞复苏后或存活的细胞静置4小时后并且未开封,出现污染,重发;
(5)视具体情况而定。
五、细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?
(1)客户造成细胞污染,不重发;
(2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
(3)细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;
(4)细胞培养时经其它处理的,不重发;
(5)细胞收到2天内,未告知,不重发;
(6)视具体情况而定。
小鼠膀胱上皮细胞培养试剂盒【Human Bone PrimacellTM:Osteblasts】细胞培养简介:
什么是细胞培养?细胞培养是从动物或植物中取出细胞,然后使其在合适的人工环境中生长。这些细胞可于培养前直接从组织中取出并采用酶或机械方法进行解离,或者也可来自已经建立的细胞系或细胞株。
1)原代培养:
原代培养是指将细胞从组织中分离后,使其在合适的条件下增值直到占据所有可用基质(即:达到汇合状态)的培养阶段。在此阶段。必须将细胞转移到新的容器中并更换新鲜培养基,从而对细胞进行传代培养,为其提供更多继续生长的空间。
2)细胞系:
首次传代培养后,原代培养物即被称为细胞系或者亚克隆。来自于原代培养的细胞系寿命有限(即:有限细胞系,见下文),随细胞的传代,生长能力最强的细胞会占据优势,最终导致细胞群体在基因型和表型上达到一定程度的均一性。
3)细胞株:
如果将细胞系的一个亚群通过克隆或者其他方法从培养物中明确地选择出来,则次细胞系就成为一个细胞株。与亲代细胞系起始时相比,细胞株往往会获得其他一些遗传学改变。
培养环境:
细胞培养的一大优势在于能够控制细胞生长的物理化学环境(即温度、pH值、渗透压、O2和CO2压力)和生理环境(即:激素和营养素浓度)。除温度外,培养环境均由生长培养基控制。
虽然细胞培养的生理环境不如其物理化学环境明确,但是通过对血清成分更好地了解、确定细胞增殖所需的生长因子以及更好地了解培养过程中的细胞微环境(即:细胞间相互作用、气体扩散、细胞-基质相互作用),现在可以采用无血清培养基进行一些细胞系的培养。
小鼠膀胱上皮细胞培养试剂盒【Human Bone PrimacellTM:Osteblasts】一、所需仪器:
离心机
生物安全柜
电动移液器
CO2培养箱
倒置显微镜
液氮罐
恒温水浴锅
小鼠膀胱上皮细胞培养试剂盒【Human Bone PrimacellTM:Osteblasts】二、所需试剂:
胎牛血清(FBS)
无菌1×PBS pH=7.2
完全培养基
三、所需耗材:
离心管(15ml、50ml)
T-25细胞培养瓶
一次性无菌移液管(2ml、5ml、10ml)
荧光素Cy3标记猴IgMMonkey IgM/Cy3 0.1ml
G蛋白偶联受体GPRC5C蛋白抗体 英文名称:GPRC5C 0.2ml
G蛋白γ2抗体/鸟嘌呤核苷酸结合蛋白γ2抗体 英文名称:GNG2 0.1ml
转录因子Ets差异基因5抗体 英文名称:Etv5 0.2ml
G蛋白结合蛋白2抗体 英文名称:GBP2 0.2ml
GARNL3蛋白抗体 英文名称:GARNL3 0.2ml
磷酸化干扰素调节因子3抗体 英文名称:phospho-IRF3 (Ser386) 0.1ml
环化核苷酸调控阳离子通道蛋白亚型4 英文名称:HCN4 0.1ml
组织胺H3受体抗体 英文名称:HRH3 0.1ml
羟酰谷胱甘肽水解酶蛋白抗体 英文名称:HAGH 0.2ml
DNA断裂因子相似蛋白A抗体 英文名称:CIDE A 0.2ml
小鼠膀胱上皮细胞培养试剂盒【Human Bone PrimacellTM:Osteblasts】 Adapalene 106685-40-9 阿达帕林(标准品) 质量规格:HPLC>99%,标准品
N-Acetyl-D-glucosamine 7512-17-6 N-乙酰-D-氨基葡萄糖 质量规格:>98%,BR
Phellodendrine chloride 104112-82-5 盐酸黄柏碱(标准品) 质量规格:HPLC≥98%,标准品
Zinc distearate 557-05-1 硬脂酸锌 质量规格:BR
Prothionamide 14222-60-7 丙硫异烟胺 质量规格:>98.5%,BR
Tetrabutylammonium Bis(maleonitriledithiolato)nickel(III) Complex 55401-12-2 四丁铵双(马来腈基二硫醇)镍(Ⅲ)络合物(>90.0%(T)) 质量规格:>90.0%(T)
SN38(7-Ethyl-10-hydroxycamptothecin ) 86639-52-3 7-乙基-10-羟基喜树碱(SN-38) 质量规格:HPLC>98%,BR
Brassinolide 72962-43-7 芸苔素内酯(标准品) 质量规格:分析标准品
Schizandrol B 58546-55-7 五味子酯乙(标准品) 质量规格:HPLC≥98%,标准品
Thiamethoxam 153719-23-4 阿克泰(分析标准品,98%) 质量规格:分析标准品,98%
Silicone oil 63148-62-9 硅油 质量规格:BR
Pigment Green 7 1328-53-6 颜料绿 7 质量规格:
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.in this example,a selectable marker gene(neo)replaces the viral gag and pol genes and a human gene replaces the env gene. STEP 2 MAKING THE HELPER CELL Desiging the Helper Vius 图 23-3 The helper cell should meet two basic requirements
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