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- 供应商:
上海研生
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39
- 英文名:
Human Prostate PrimacellTM:Normal Prostate Epithelial Cells
- 生长状态:
贴壁/悬浮
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- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 器官来源:
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- 是否是肿瘤细胞:
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- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
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- 相关疾病:
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- 规格:
1.2ML/1.5ML
人前列腺上皮细胞培养试剂盒【Human Prostate PrimacellTM:Normal Prostate Epithelial Cells】细胞培养简介:
什么是细胞培养?细胞培养是从动物或植物中取出细胞,然后使其在合适的人工环境中生长。这些细胞可于培养前直接从组织中取出并采用酶或机械方法进行解离,或者也可来自已经建立的细胞系或细胞株。
1)原代培养:
原代培养是指将细胞从组织中分离后,使其在合适的条件下增值直到占据所有可用基质(即:达到汇合状态)的培养阶段。在此阶段。必须将细胞转移到新的容器中并更换新鲜培养基,从而对细胞进行传代培养,为其提供更多继续生长的空间。
2)细胞系:
首次传代培养后,原代培养物即被称为细胞系或者亚克隆。来自于原代培养的细胞系寿命有限(即:有限细胞系,见下文),随细胞的传代,生长能力最强的细胞会占据优势,最终导致细胞群体在基因型和表型上达到一定程度的均一性。
3)细胞株:
如果将细胞系的一个亚群通过克隆或者其他方法从培养物中明确地选择出来,则次细胞系就成为一个细胞株。与亲代细胞系起始时相比,细胞株往往会获得其他一些遗传学改变。
培养环境:
细胞培养的一大优势在于能够控制细胞生长的物理化学环境(即温度、pH值、渗透压、O2和CO2压力)和生理环境(即:激素和营养素浓度)。除温度外,培养环境均由生长培养基控制。
虽然细胞培养的生理环境不如其物理化学环境明确,但是通过对血清成分更好地了解、确定细胞增殖所需的生长因子以及更好地了解培养过程中的细胞微环境(即:细胞间相互作用、气体扩散、细胞-基质相互作用),现在可以采用无血清培养基进行一些细胞系的培养。
人前列腺上皮细胞培养试剂盒【Human Prostate PrimacellTM:Normal Prostate Epithelial Cells】
前列腺是雄性哺乳动物生殖系统一个重要附属器官,其结构和功能活动均受雄性激素的调控。其中,前列腺由具有不同细胞角蛋白表达谱的三个带组成。基底细胞主要表达高分子量细胞角蛋白(CK5和CK14),腔分泌细胞主要表达低分子量细胞角蛋白(CK8和CK18),而中间细胞则同时表达基底和管腔细胞角蛋白。 虽然前列腺组织机械韧性很强,但利用本公司试剂盒中提供的前列腺组织分离体系来分离,EDTA/EGTA处理过的薄的前列腺组织片能使得前列腺组织中上皮细胞的一些功能特性发生改变,从而将上皮细胞分离开来。
本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的前列腺上皮细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件,分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外,本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系,可以最大程度地降低所培养的人原代前列腺上皮细胞中成纤维细胞的含量。 人前列腺上皮细胞培养试剂盒适合于培养人的前列腺上皮组织细胞。本试剂盒包含: (1)OptiTDSTM人前列腺上皮细胞组织解离液(3×1ml) (2)人前列腺上皮细胞组织处理缓冲液(100ml) (3)FibrOutTM人前列腺上皮细胞成纤维抑制剂(1ml(500X)) (4)人前列腺上皮组织洗液(5 x 100 ml) (5)人前列腺上皮细胞生长因子(1ml500X)及血清(5x10ml) (6)人前列腺上皮细胞基础培养基(5 x 100ml) (7)人前列腺上皮组织预备液 (1 x 100 ml) (8)人前列腺上皮细胞培养试剂盒使用说明书
人前列腺上皮细胞培养试剂盒【Human Prostate PrimacellTM:Normal Prostate Epithelial Cells】一、所需仪器:
离心机
生物安全柜
电动移液器
CO2培养箱
倒置显微镜
液氮罐
恒温水浴锅
人前列腺上皮细胞培养试剂盒【Human Prostate PrimacellTM:Normal Prostate Epithelial Cells】二、所需试剂:
胎牛血清(FBS)
无菌1×PBS pH=7.2
完全培养基
三、所需耗材:
离心管(15ml、50ml)
T-25细胞培养瓶
一次性无菌移液管(2ml、5ml、10ml)
1号染色体开放阅读框106抗体 英文名称:C1orf106 0.2ml
磷酸化非受体型酪氨酸蛋白激酶抗体 英文名称:Phospho-Syk (Tyr323) 0.1ml
锌指蛋白903抗体 英文名称:ZBTB4 0.2ml
蛋白激酶受体B1+B2抗体 英文名称:EphB1+EphB2 0.2ml
环指蛋白22抗体 英文名称:RNF22 0.2ml
转录因子E3 英文名称:TFE3 0.1ml
胞外分泌型丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶FAM20C抗体 英文名称:FAM20C 0.2ml
磷酸化核转录因子NFKB-RelB蛋白抗体 英文名称:Phospho-RelB(Ser573) 0.1ml
松弛肽/松弛素抗体 英文名称:Relaxin 1 0.2ml
磷酸化视网膜母细胞瘤相关蛋白1抗体 英文名称:phospho-Rb (Ser249) 0.1ml
双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗原DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase) 0.5mg
人前列腺上皮细胞培养试剂盒【Human Prostate PrimacellTM:Normal Prostate Epithelial Cells】 Tenacissoside H 191729-45-0 通关藤苷H(标准品) 质量规格:HPLC≥98%,标准品
Salmeterol-d3 497063-94-2 沙美特罗-d3 质量规格:美国进口
Nardosinone 23720-80-1 苷松新酮(标准品) 质量规格:HPLC≥98%,标准品
Glycochenodeoxycholic Acid Sodium Salt 16564-43-5 甘氨鹅脱氧胆酸钠 质量规格:>97%,BR
Bimatoprost amide 155205-89-3 比马前列腺素酰胺 质量规格:美国进口
alpha-Arbutin 84380-01-8 alpha-熊果苷(标准品) 质量规格:HPLC≥98%,标准品
Gestodene 60282-87-3 孕二烯酮(标准品) 质量规格:>99%,标准品
RIFAMPIN QUINONE 13983-13-6 醌式利福平(标准品) 质量规格:HPLC法有关物质检查
D-Aspartic acid 1783-96-6 D-天冬氨酸 质量规格:0.98
(R)-Ketorolac 66635-93-6 (R)-酮咯酸 质量规格:美国进口
Baicalin 21967-41-9 黄芩苷 质量规格:HPLC≥90%,进口分装
Fenoxaprop-p-ethyl 71283-80-2 精乙基噁唑禾草灵(标准品) 质量规格:分析标准品,97%
人前列腺上皮细胞培养试剂盒【Human Prostate PrimacellTM:Normal Prostate Epithelial Cells】一、客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;
收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
二、如为贴壁细胞,请在显微镜下观察细胞密度:
1. 未超过80%汇合度时,用75%酒精(建议配置75%酒精的水也是灭菌超纯水,喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作;然后打开盖子,先用枪头把培养基吸出10ml左右,放在离心管里,然后瓶口过火(严禁直接倾倒),这样可以保证不污染,再用10ml的移液管,将剩余的培液全部吸出,放于离心管中,培养瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培养16hr(时间根据细胞生长情况调整)之后,传代或者冻存。
2. 超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。具体步骤如下:
1) 弃去培养液,用3ml PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次;
2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来;
3) 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中,按要求分瓶。
三、如为悬浮细胞,吸出培养液,1000转/分钟离心5分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
注意:换液时一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造成生长不好。
人前列腺上皮细胞培养试剂盒【Human Prostate PrimacellTM:Normal Prostate Epithelial Cells】四、细胞出现问题,可重发的情况有哪些?判定标准是什么?
(1)细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、破损、漏液等,重发;
(2)冻存的细胞复苏后,绝大多数细胞未存活,重发;
(3)存活的细胞静置24小时后,绝大多数细胞未存活,重发;
(4)冻存的细胞复苏后或存活的细胞静置4小时后并且未开封,出现污染,重发;
(5)视具体情况而定。
五、细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?
(1)客户造成细胞污染,不重发;
(2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
(3)细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;
(4)细胞培养时经其它处理的,不重发;
(5)细胞收到2天内,未告知,不重发;
(6)视具体情况而定。
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文献和实验Human Prostate Epithelial Cell Cultures
for the processing of primary human prostate biopsy samples and the generation of human prostate epithelial (HPE) cells in serum-free conditions. Retrovirus containing human telomerase reverse transcriptase (hTERT) is used for the immortalization of primary HPE cells
Coculture of Prostate Cancer Cells
The progression of prostate cancer is accompanied by the breakdown of normal epithelial-ductal architecture. This breakdown is attributable to the loss of normal homeostatic interactions between the epithelial and stromal compartments
Primary Culture and Propagation of Human Prostate Epithelial Cells
can be technically challenging, even for laboratories experienced in immortalized cell culture. Therefore, we provide methods to isolate and culture primary epithelial cells directly from human prostate tissue. Initially, we describe the isolation of bulk epithelial
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