- ¥2600 - 4980
- 康朗生物
- KL-A0574
- 国产/进口
- 2025年07月15日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
86
- 英文名：
布氏杆菌(BS)单重凝胶PCR检测试剂盒
- 保质期：
-18℃以下，有效期6个月
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件：
-18℃以下，有效期6个月
- 规格：
48次/盒
本试剂盒适合于增菌培养物、疑似病料及组织、血液样本中布鲁氏菌(BS)的特异性检测，用于布鲁氏菌(BS)的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。
本试剂盒用一对布鲁氏菌特异性引物，对布鲁氏菌DNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
布氏杆菌(BS)单重凝胶PCR检测试剂盒组成：
| 组份 | 数量 | 规格 |
| 布鲁氏菌PCR反应液(BS-PCR MIX) | 1管 | 720μL/管 |
| DNA抽提液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| 阳性对照(BS-PTC) | 1管 | 50μL/管 |
布氏杆菌(BS)单重凝胶PCR检测试剂盒储存条件：-20℃以下，有效期6个月。
使用方法：
一、样品采集：
?血清：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入无菌的干燥玻璃管，室温(22-25℃)放置30-60min，血标本可自发完成凝集析出血清，或直接使用水平离心机，3000rpm离心5min，吸取上层血清，转移至1.5mL灭菌离心管。
?血浆：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入含EDTA2Na(乙二四乙酸二钠)或柠檬酸钠抗凝剂的玻璃管，立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次，使抗凝剂与静脉血充分混匀，5-10min后即可分离出血浆，转移至1.5mL灭菌离心管。
?粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
?病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。
二、DNA提取：
可按常规方法提取，也可采用商品化DNA试剂盒提取
?培养物：取培养物50μL(培养至一定浊度)或者挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
?粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
?其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5μL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
三、布氏杆菌(BS)单重凝胶PCR检测试剂盒检测步骤：
1．试剂的准备
从试剂盒中取出PCR反应液(BS-PCR MIX)，室温融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| PCR反应液 | 15μL | N×15μL |
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μLPCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(BS-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
2．qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件：
| 预变性 | 1循环 | 94℃ for 2 min |
| PCR扩增 | 35循环 | 94℃ for 30 sec 58℃ for 30 sec 72℃ for 30 sec |
四、结果分析：
?称取1.5g琼脂糖放于250mL锥形瓶中，加入100mL 1×TAE电泳缓冲液，微波炉加热溶解，稍冷后加入10μL染色液混匀，倒入插有梳子的制胶板中。
?待胶凝固后，取10μL Maker(推荐使用DL2000 Maker)点样于左侧凝胶孔中，取10μL PCR产物依次点样于凝胶孔中，电压值设定为电泳槽正负极距离(cm)与5(V/cm)的乘积。待溴酚兰指示剂电泳至凝胶中部时停止电泳并使用凝胶成像仪或紫外透照台观察结果。
试验成立判定：
?阴性对照(NTC)：无任何的条带(引物带除外)。
?阳性对照(BS-PTC)：在260bp处有条带。
?被检样品：在260bp处有条带为阳性样品，否则为阴性样品。
?以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验和制备体外诊断试剂盒单克隆 抗体要求参照上述相关部分执行，但其生产条件、小鼠清洁级别、抗体纯度和安全试验可根据实际需要降低或减少要求。 附录：鼠源性病毒检测 1、被检病毒 人用鼠源性单抗制品中可能含有潜在污染的病毒见下表 （1）出血热病毒，受影响动物为大鼠，小鼠 （2）淋巴细胞脉络从脑膜炎病毒（LCMV），受影响动物为大鼠 （3）3型呼肠孤病毒（REO），受影响动物为大鼠，小鼠 （4）大鼠轮状病毒，受影响动物为大鼠 （5）仙台病毒，受影响动物为大鼠，小鼠 （6）脱脚病病毒，受影响
待试菌菌落，置37℃水浴，每30min观察1次结果。 (3)结果：①玻片法：5~10s内出现凝集者为阳性。②试管法：如有凝块或整管凝集出现为阳性。2h后无上述现象出现，则放置过夜后再观察。 (4)应用：本试验仅用于致病性葡萄球的鉴定。 注意事项：①玻片法为筛选试验，阳性、阴性均需进行试管法测定。②血浆必须新鲜。③应使用肝素而非枸橼酸盐作抗凝剂抗凝的血浆。④本试验也可用市购的胶乳凝集试验试剂盒测定。 4．DNA酶试验 (1)原理： 某些细菌能产生DNA酶，水解外源性DNA
/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以0.5×107到1×107在无血清培养基中，再次悬浮细胞。 分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中，5分钟内开始冷冻步骤。 细胞以1℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。 2、贴壁细胞 使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到最小。 在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。 以大约
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
