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现货
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鹿森生物
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瓶装
说明
一般描述
凝集素是碳水化合物结合蛋白。它们无处不在,常见于真菌、植物和动物体内。该蛋白质的二级结构富含β-链,并且在表面上具有碳水化合物结合位点。
应用
Triticum vulgaris(小麦)来源凝集素已用于:
处理转染细胞,以进行免疫荧光分析
立体定位注射到小鼠体内,以进行神经元示踪
免疫组化,以分析心肌细胞
用于荧光检测含有 β(1→4)-N-乙酰基-D葡糖胺的糖蛋白
生化/生理作用
凝集素在糖缀合物鉴定、成像和靶向过程中发挥着关键作用。它可用于芯片分析,实现有效的糖组图谱分析。在植物和真菌体内,凝集素可防御病原体/寄生物。凝集素在宿主识别和组织粘附中同样发挥主要作用。
WGA 不具有血型特异性,但具有与 N-乙酰基-β-D-葡糖胺残基和 N-乙酰基-β-D-葡糖胺低聚物的亲和性。WGA 不含蛋白结合糖。
包装
基于蛋白含量进行包装。
外形
含有磷酸盐缓冲盐
制备说明
由亲和纯化凝集素制备偶联物。
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文献和实验抗生物素蛋白6.6麦胚凝集素9.9三、待标记蛋白质最适稳定量的测定 (1)光电比色法:制备一系列不同浓度的等体积蛋白质溶液(1ml),分别加入5ml胶体金中,迅速混匀,然后,各加入1ml 10% NaCl溶液,摇匀,静置5min后测各管。根据胶体金颗粒的大小,OD在520~580nm之间测定,以OD值为纵坐标,蛋白质用量为横坐标作一曲线,取曲线最先与横轴相接近的那一点处的蛋白质用量为最适稳定量。图5.2中10nm的胶体金溶液中蛋白质的最适稳定量为45μg/ml。 图5-2 蛋白最适稳定
的盐类物质会降低胶体金颗粒的Zeta电位,影响蛋白质的吸附,因此,标记之前必须彻底除盐。一般将蛋白质置入透析袋中然后直接放入双蒸水或极低浓度的盐水(0.005mol/l NaCl , pH7.0)透析。 (2)去除蛋白质中的沉淀:长期低温保存的蛋白质或4 ℃ 较长时间保存的抗体,特别是在浓度高于2mg/ml的情况下,很容易形成聚合物,聚合物对标记过程及免疫金探针的稳定性有一定影响,因此,标记之前须离心以除去这些聚合物。一般以100000r/min
( 雪花莲凝集素)-生物素(Vector Labs/Abcys,France) ( 保存于 2~8°C ) 和 WGA ( 麦胚凝集素)-生物素(Sigma Aldrich,Lyon,France) ( 保存于 2~8°C ) 。 ( 3 ) 链霉亲和素-过氧化物酶(Amersham Biosciences/GE,Healthcare,Uppsala,Sweden) ( 保存于 2~8℃)。 ( 4 ) TBS 缓冲液:20 mmol/L Tris-HCl,pH 7.4,含
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