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- 上海抚生
- FS-P0070
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- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
54
- 英文名：
EC-MUG Medium
- CAS号：
咨询在线客服
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海抚生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
250g
1. 培养基阳性组：取稀释后的各试验菌悬液1ml分别加于预先制备的试管培养基中，每种细菌接种两支试管。同时分别取1ml菌悬液加于无菌空平皿中，用于计数，每种细菌做两个平板。
2. 培养基阴性组：即空白对照，即不添加菌液。
3. 接种量计数：步骤1中的平皿中，细菌倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，霉菌和白色念珠菌倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基。同时每种培养基做1个空白。
4. 培养条件：
无菌检查：20～25℃培养14天或直至出现浑浊（不超过14天）
MPN计数：30～35℃培养箱中培养3天
控制菌检查：30～35℃培养箱中培养18～24小时
倾注计数用的的胰酪大豆胨琼脂培养基平板置30～35℃培养箱中培养3天
倾注计数用的沙氏葡萄糖琼脂培养基平板置20～25℃培养箱中培养3～5天
产品名称：EC-MUG培养基品牌
英文名称：EC-MUG Medium
产品规格：250g
产品用途：用于生活饮用水及其水源水中的大肠埃希氏菌的检测用途:用于生活饮用水及其水源水中的大肠埃希氏菌的测定。成分（g/L）胰蛋白胨 20.0g乳糖 5.0g三号胆盐 1.5g磷酸氢二钾 4.0g磷酸二氢钾 1.5g氯化钠 5.0gMUG 0.05gPH值 6.8±0.2用 法称取本品37.0克，加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中，115℃高压灭菌20分钟备用。
产品图片：
公司提供EC-MUG培养基品牌的研培养基，销售培养基，与各大院校、医院、科研单位都有合作并得到了他们的一致好评与认可。公司本着客户至上的原则为客户提供高质量高品质的产品。我们的EC-MUG培养基品牌货期快、质量品牌有保障，售后技术服务完善。
操作步骤：
1、EC-MUG培养基品牌按、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液；
2、取 25 克样品液加入 225ml mEC 肉汤或 mTSB 肉汤中， 37 ℃ 增菌培养 18-24 小时；
3 、用 3mm 接种环取 1 环增菌液，划线接种到 O157 菌显色培养基上，做 2 个平板；
4 、 37 ℃培养 18-24h ， O157:H7 菌显紫色 ， 大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色， 其它细菌显黄色或无色；
5 、对典型菌落可做 O157:H7 菌血清学试验和全套生化试验。
培养基制备：
被检培养基：称取培养基30.0g于1000ml纯化水中,微温溶解，分装试管，121℃高压灭菌15分钟,冷却，备用。
另准备胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基进行稀释菌悬液计数，培养基灭菌后置于44.5℃水浴保温待用。
菌液制备与稀释：
1.EC-MUG培养基品牌金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、枯草芽孢杆菌
挑取四代以内（含四代）上述菌种的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基中，30～35℃培养18～24h，使用pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液或0.9%氯化钠溶液进行十倍稀释，制成每1ml含小于100cfu的菌悬液。
(稀释梯度：通常情况下为10-6～10-7、枯草芽孢杆菌10-5～10-6)
2. 白色念珠菌
挑取四代以内（含四代）的白色念珠菌新鲜培养物至沙氏葡萄糖液体培养基中，经20～25℃培养2～3天；使用pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液或0.9%氯化钠溶液进行十倍稀释，制成每1ml含小于100cfu的菌悬液。
(稀释梯度：通常情况下为10-6～10-7)
3. 黑曲霉
挑取四代以内（含四代）的新鲜培养物至沙氏葡萄糖琼脂培养基斜面中，经20～25℃培养5～7天（生长大量黑色菌丝）,加入5ml含0.05%聚山梨脂80的pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液，将孢子洗脱。使用含0.05%聚山梨脂80的pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液或含0.05%聚山梨脂80的0.9%氯化钠溶液进行十倍稀释，制成每1ml含小于100cfu的菌悬液。
(稀释梯度：通常情况下为10-5～10-6，因菌丝数量不同，可能有误差)
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文献和实验细胞来说要少很多。 最后，针对细胞上清液的外泌体的提取。这个是老生常谈的问题，这里就不再多讲了。如果实验室有超速离心机的话，那就使用超速离心的方法，按照前文建议的预处理操作后，超离后的沉淀也会增加的，同时外泌体的质量也会提升。如果实验室没有超离的情况下，也可以通过试剂盒的方法来提取，除了进口品牌外，也可以使用一些国产试剂盒，质量也不亚于进口品牌的。 总结一下，为了获得高质量的外泌体：需要在细胞培养时减少正常血清的使用，推荐去外泌体血清或者外泌体专用无血清培养基；收获
方法见示意图1）。 图1 脾脏研磨方法示意图 2）将悬有脾脏细胞的分离液立即转移入无菌离心管中，在上层覆盖适量的RPMI 1640培养基，且需保持液面分界清晰。 3） 800g，室温，离心 20min-30min（注：设置较慢的加速度和减速度，如果有十档，设为第三档）。 4） 离心结束后，吸弃RPMI 1640培养基，小心吸取脾脏单个核细胞层（即白膜层）并转移至15mL离心管中。离心结束后，管内液面从上至下依次为RPMI 1640培养基层、脾脏单个核细胞层、分离液层和红细胞层（见图
血，按照1：1比例加入RPMI 1640培养基，将血液进行稀释（以降低血液粘稠度），轻柔混匀，备用。 2） 向无菌离心管内加入适量的单个核细胞分离液，将稀释后的脐带血平铺到分离液液面上方（分离液：稀释脐带血=1：2），保持两液面界面清晰。 3） 800g，室温，离心 20min-30min（注：设置较慢的加速度和减速度，如果有十档，设为第三档）。 4） 离心结束后，吸弃血浆层，小心吸取CBMC层（即白膜层）并转移至15mL离心管中。离心结束后，管内液面从上至下依次为稀释血浆层、CBMC层、分离
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