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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
86
- 英文名:
兔源性成分单重荧光PCR检测试剂盒
- 保质期:
-18℃以下,有效期6个月
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件:
-18℃以下,有效期6个月
- 规格:
48次/盒
兔源性成分单重荧光PCR检测试剂盒具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒 RNA 模板。
2. 两管式 RT-PCR,一次 RT 反应产物可以作为多次 PCR 的模板。本试剂盒提供 10 次的 RT 反应试剂和 50 次的 PCR 试剂。
3. 引物经过优化,特异性高,引物是根据基因的保守区域设计,适用于所有强、中、弱新城疫毒株,产物长度为 421 bp。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
兔源性成分单重荧光PCR检测试剂盒特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
兔源性成分单重荧光PCR检测试剂盒性能指标:
1. 试剂盒检测特异性为100%
2. 检测试剂盒重现性为100%
3. 灵敏度可达到103/ml
4. 有效期为6个月
规格及成分
| 成分 | 编号 | 50 次纸盒包装 |
| MMLV 逆转录酶 (含 RI) | 80206A | 20 μL |
| RT Buffer(含 dNTP) | 60906C | 60 uL |
| PCR Mix 3.0(含染料) | 90805 | 1.5 mL |
| ND 阳性对照 | 896897 | 50 μL |
| ND 专一性引物一(正向引物) | yw896 | 50 μL |
| ND 专一性引物二(反向引物) | yw897 | 50 μL |
| RNase-free 水 | 80403 | 1 mL |
| 使用手册 | 11-171201sc | 1 份 |
自备试剂:样品 RNA。
兔源性成分单重荧光PCR检测试剂盒使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系):
| RNA 模板 | 0.01pg-500 ng (如果丌知道浓度则用 1-10 μL) |
| ND 专一性引物二(反向引物) | 2 μL |
| RNase-free 水 | 补水到 12 μL |
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。
三、PCR(60 μL 体系)
1、在 PCR 管中加入下列成分:
| 成 份 | 样品 | ND 阳性对照 | 阴性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 30 μL | 30 μL | 30 μL |
| cDNA 样品(上步的 RT 反应液) | 1-5 uL | 无 | 无 |
| ND 阳性对照 | 无 | 2 μL | 无 |
| ND 专一性引物一(正向引物) | 1 μL | 1 μL | 1 μL |
| ND 专一性引物二(反向引物) | 1 μL | 1 μL | 1 μL |
| 补水到 | 60 uL | ||
| 过程 | 温度 | 时间 | 其他 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min | |
| PCR 反应 (40个循环) |
95℃ | 30 s | |
| 50℃ | 30 s | ||
| 72℃ | 40 s | ||
| 最后延伸 | 72℃ | 5 min | |
1、取 10-20μL PCR 产物直接在 PAGE 或琼脂糖凝胶上电泳,正确的扩增产物的大小为421 bp。
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文献和实验。生长势较弱,叶色深绿、叶面有皱。果实圆筒、倒卵圆或椭圆形等,果同光滑、皮薄,肉厚1-2cm,脆嫩多汗式或面而少汁可溶性固形物含量8-12%。皮瓤均可食用。单要重多在0.5kg以下,不耐贮运。种子中等或小。较耐高湿。在日照较少,温差较小的环境也能正常生长。中国广泛栽培,东北、华北是主产区。日本、朝鲜、印度及东南亚等国也有栽培。 生长发育与果实形成:甜瓜的生长发育过程可分为发芽期、幼苗期、伸蔓期和结果期。 发芽期:播种至子叶展平第一真叶显露,约需10天,这一时期生长量小。发芽
。2、中药活性成分的提取。植物药有效成分往往被包在细胞壁以内,用纤维素酶可以破坏细胞壁的纤维素,提高有效成分的提取率。3、纤维素酶的作用机制。根据酶的作用方式纤维素酶分为C1酶、CX酶和纤维二糖酶等类型。C1酶主要作用于天然纤维素,使之转变为非结晶的纤维素。CX酶又分为CX1酶和CX2酶两种。CX1酶是一种内断型纤维素酶,它从水合非结晶纤维素分子内部作用于β-(1,4)糖苷键,生成纤维糊精与纤维二糖。CX2酶是一种外断型纤维素酶,它从水合性纤维素分子的非还原端作用于β-(1,4)糖背键,逐步切断β
以做为复制的模板. 而Annealing 则是令 Primers于一定的温度下附着于模板DNA两端。 最后在DNA聚合酶 (e.g. Taq-polymerase) 的作用下进行引物的延长 (Extension of primers)及另一股的合成。PCR的历史 PCR的发展可以说是从DNA合成酵素的发现缘起。DNA合成酵素最早于1955年发现 (DNA polymeraseI), 而较具有实验价值及可得性的Klenow fragment of E. Coli 则是于70年代的初期由Dr. H
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