古典猪瘟病毒RT-PCR检测试剂盒

古典猪瘟病毒RT-PCR检测试剂盒
本试剂盒采用RT-PCR技术检测疑似感染动物血清或组织中的CSFV。猪瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV；或称Hog cholera virus，HCV）是ssRNA病毒，属黄病毒科瘟病毒属，其RNA为单股正链。由CSFV引起的猪瘟病是一种急性、热性、高度接触性的传染病，广泛存在于全世界各养猪国家，严重危害养猪业的发展。因此，CSFV的快速准确鉴定，对该病的预防和检疫有着重要作用。

古典猪瘟病毒RT-PCR检测试剂盒产品特点：
1. 用于CSFV的定性鉴定检测和分子流行病学调查。
2. 能对样品中CSFV进行快速检测，具有良好的特异性和敏感性。
3. 使用一管式RT-PCR试剂盒，减少了操作步骤，降低了操作误差。

古典猪瘟病毒RT-PCR检测试剂盒产品组成：

组分	编号	规格
双酶一管式RT-PCR Buffer，2×	BTN91202A	750 μL
MMLV-Taq Mix	BTN91202B	100 μL
CSFV专一性引物对	yw11251126	100 μL
CSFV阳性对照	yw11271128	50 μL
超纯水	BTN100935	1mL

保存条件：-20℃保存，有效期一年。

古典猪瘟病毒RT-PCR检测试剂盒使用方法：

一、样品RNA的制备
用自选方法纯化FMDV样品的RNA，也可以另购本公司的一管式病毒RAN提取试剂盒(BTN3073)或柱式病毒RNA(BTN71001)提取试剂盒，上述两款产品跟本试剂盒兼容。

二、阳性对照
1. 为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 使用本阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。

三、设置RT-PCR反应
3. 在PCR管中加入下列成分(30μl体系)：

成份	样品	阳性对照	阴性对照
双酶一管式RT-PCR Buffer，2×	15μl	15μl	15μl
CSFV专一性引物对	2μl	2μl	2μl
样品RNA	1-5μl	无	无
CSFV阳性对照	无	2μl	无
补超纯水到	28μl	28μl	28μl
MMLV-Taq Mix	2μl	2μl	2μl

4. 轻柔混匀后上机，按下面参数进行RT-PCR：

过程	温度	时间
逆转录	60℃	30分钟
预变性	94℃	2分钟
PCR反应 (30个循环)	94℃	30s
	55℃	30s
	72℃	1分钟
延伸	72℃	5分钟

5. 电泳检测RT-PCR产物。预期的PCR产物长度为267 bp。