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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
307
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
- 规格:
100ml
特别提示:包括通用强力抗原修复液(10×)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:通用强力抗原修复液(10×)
产品货号:GL1107
产品规格:100ml
用途:
抗原修复缓冲液
注意事项:
zuì常用的抗原修复液,主要由柠檬酸组成,调pH值6.0。
储存条件:4℃,12个月
除了通用强力抗原修复液(10×),,我公司还供应以下相关产品:
名称:PVDF膜活化浸润液
货号:YT065
规格:250ml
本品是一种绿色环保、无毒无害的用于快速浸润和活化PVDF膜的溶液,并且浸润活化后的后续处理非常便捷。一个包装的本产品可以用于约75-100张常规尺寸PVDF膜(约6.6×8.5cm)的浸润和活化。
本产品安全无毒,不含剧毒的*醇或其它的有毒有害试剂,只需数秒时间就可以把疏水的PVDF膜充分浸润和活化。并且浸润活化后的PVDF膜只需简单地用转膜液洗涤数秒,即可被转膜液快速平衡并用于后续的转膜等实验。
PVDF膜是western blot实验中zuì广泛使用的转移介质之一,由于其在蛋白质截留能力、机械强度和化学相容性上都具有优越的性能而被广泛使用。PVDF膜适用于化学发光(如ECL Star、ECL Plus、ECL等)、常规显色(如DAB、TMB)、染色、同位素等方法检测蛋白。常见的PVDF膜孔径有0.45μm和0.2μm两种,后者孔径小,对小分子蛋白有较好的拦截和吸附作用,背景可能会比前者微高。
PVDF膜是疏水性的且不带电荷,不能被常规的转膜液所浸润,所以需要在使用前进行预处理以浸润和活化。zuì常见的方法是使用剧毒的*醇浸润和活化PVDF膜,使PVDF膜中微孔内的空气被低表面张力的*醇所替代,从而易于后续水或者缓冲液进入PVDF膜中的微孔内,使PVDF膜从疏水性变成亲水性,此时白色的PVDF膜会变成半透明状。通常情况,浸润活化后的PVDF膜还需要在转膜液中适当平衡2-3次,以充分去除膜上的*醇并确保转膜时的均一性,才能用于后续的转膜等实验。
我公司的PVDF膜浸润活化液采用了优化的特殊配方,含有能产生特殊表面张力的无毒去垢剂,在确保安全无毒情况下,又能实现PVDF膜的快速浸润和活化,并且后续也极易被转膜液所平衡,是PVDF膜浸润活化的理想选择。
注意事项:
1. 本产品含有挥发性成分,使用完毕后请盖紧瓶盖,以防失效。
2. PVDF膜应使用镊子轻轻夹住边角,以免划痕损坏PVDF膜。
3. PVDF膜一经浸润和活化,需保持湿润,可放置于western转膜液或洗涤液中。如不慎被干燥,则需要重新浸润和活化。
储存条件:4℃,有效期一年。
名称:蛋白A琼脂糖
货号:YT881
规格:2ml
本品主要用于免疫沉淀或免疫共沉淀,也可以用于抗体的纯化。
Protein A Agarose适合于免疫沉淀mouse IgG2a, IgG2b, IgA, rabbit IgG, 以及human IgG1, IgG2和IgG4。
Protein A共价交联到4% agarose beads上,2ml Protein A Agarose中共含有约2.5mg重组的Protein A。2 ml Protein A Agarose共可以结合约17mg human IgG。
Protein A Agarose配制在TBS溶液中,2ml中共含有0.5ml Agarose beads。
本Protein A Agarose如果用于常规的免疫沉淀,可以免疫沉淀100次。
注意事项:
1. Protein A Agarose使用前一定要充分重悬,即充分颠倒若干次使混合均匀。
2. 从蛋白样品收集开始,所有步骤中蛋白样品都必须在4℃或冰上操作。
储存条件:4℃,有效期一年。
名称:兔免疫组化(IHC)检测试剂盒
货号:SY0770
规格:150T
本试剂盒可用于检测以兔单克隆或多克隆抗体为一抗的免疫组化实验,检测原理基于高特异性高亲和力的链霉亲和素-生物素结合:已固定或培养细胞的抗原与一抗形成抗原抗体复合物,生物素化二抗特异性结合上述复合物,经辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素特异性识别生物素(即抗原所在位置),zuì后经辣根过氧化物酶底物显色即可检测相应抗原。
本品可适用于多种类型样本,如石蜡包埋切片、冰冻切片、培养细胞涂片及血液标本等。
产品组份:
封闭液————7.5ml
生物素标记抗兔二抗————7.5ml
HRP标记链霉亲和素————7.5ml
20×DAB底物缓冲液————400µl
20×H2O2浓缩液————400µl
20×DAB浓缩液————400µl
储存条件:4℃,勿冷冻,有效期一年。
名称:封闭蛋白TBS缓冲系统封闭液
货号:ZN1914
规格:500ml
产品保存:4℃保存,一个月有效
产品特点:
1.相容性好,可用于其它的免疫检测封闭。
2.快速。
3.高信噪比,背景更干净。
名称:酪蛋白PBS缓冲系统封闭液
货号:ZN1916
规格:500ml
产品保存:4℃保存,一个月有效
产品特点:
1.相容性好,可用于其它的免疫检测封闭。
2.快速。
3.高信噪比,背景更干净。
名称:显影定影试剂盒(固体)
货号:ZN1940
规格:1盒
产品规格:显影液:1000ml 定影液:1000ml
产品内容:
显影液 试剂 A(固体),试剂 B(固体),试剂 C(固体)
定影液 试剂 A(固体),试剂 B(固体),试剂 C(液体)
产品保存:室温避光保存,六个月有效。
产品说明:显影定影试剂盒是一个用于 Western blotting 后续压片后的洗片试剂。本试剂盒中的显影和定影试剂的配方特别适合于×光片的显影定影。
使用方法:
1.显影液配制:显影液试剂 A 倒入烧杯中,加入 500-700ml 约 50℃水 ,玻棒拌至充分溶解,再加入显影液试剂 B,玻棒搅拌至充分溶解,然后加入显影液试剂C,玻棒搅拌至充分溶解,zuì后加水定容至 1000 ml,玻棒搅拌混匀即可,倒入避光容器(棕或黑色瓶)中,室温避光保存。
2.定影液配制:把定影液试剂 A和试剂 B 倒入烧杯中,加入 700ml 约 60℃水,玻棒搅拌至充分溶解,待冷却后加入定影液试剂 C,玻棒搅拌混匀后加水定容至1000 ml,玻棒搅拌混匀即可,倒入避光容器(棕或黑色瓶)中,室温避光保存。
3 显影:把×光片完全浸没在显影液内,显影 10 秒至 10分钟。具体显影时间视根据显影情况而定,可以在红灯下观察,当发现显影的程度已经达到预期目标,即可终止显影。
4 水洗:在清水中冲洗干净,以完全除去显影液。
5.定影:浸没在定影液内,定影 30 秒至 3分钟。定影时间长一点,对定影的结果没有明显影响。
6.水洗:在清水中冲洗干净,以充分洗去各种残留溶液。
名称:免疫荧光试剂盒(小鼠源IgG型一抗)(Cy3)
货号:ZN1859
规格:100T|200T|500T
本试剂盒采用SABC系统,是专为免疫化学而设计的,用以显示组织或细胞中的抗原分布。SABC-Cy3代表了新一代的免疫荧光方法。Cy3比传统上的荧光更具有亲水性,因而不会因疏水性而引起非特异性吸附或聚合,从而背景更低。而且其敏感性和稳定性都更好。Cy3在554nm激化,在568-574nm发射荧光,呈鲜红色。
试剂盒组成:
| 组分 | 规格 |
| 正常浓缩山羊血清(稀释比1:10) | 1ml/2ml/5ml |
| 生物素标记羊抗小鼠IgG(参考效价1:100) | 0.1ml/0.2ml/0.5ml |
| SABC- Cy3(参考效价1:100) | 0.1ml/0.2ml/0.5ml |
另附有三个滴瓶可供稀释试剂用
保存条件:4℃可保存一年,应避免冷冻。
石蜡片染色步骤:
1. 切片脱蜡至水。
2. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
3. 封闭:滴加稀释的正常山羊血清封闭液(稀释比1:10),室温 20 分钟,甩干,勿洗。
4. 滴加适当稀释的一抗(小鼠IgG),37℃孵育 1~2小时或4℃过夜。PBS洗5分钟×3次。
5. 滴加稀释的生物素标记羊抗小鼠IgG(参考效价1:100),37℃孵育30分钟。PBS洗5分钟×3次。
6. 滴加稀释的 SABC-Cy3(参考效价1:100),37℃孵育30分钟。PBS洗5分钟×4次。
7. 水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。荧光显微镜观察
建议:
1. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(ZN1955)、EDTA抗原修复液(ZN1951)、PBS缓冲液、TBS缓冲液(ZN1953)等作为抗原修复液。
2. 酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、抗原修复液Ⅰ(ZN1954,与热修复配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。
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文献和实验抗原修复方法 Antigen Retrieval Methods
考虑人为染色的可能性。由于染色在任何给定的实验中都受多种变量的影响,因此应使用对照来验证特异性抗体结合。 R&D Systems 提供多种试剂,可提高组织抗原检测率并增强免疫反应性。在初始优化阶段,研究人员可将经中性 pH 7.0 通用抗原修复液(产品编号:CTS015)处理的样本与未经抗原修复的相同组织切片进行比较。根据组织的不同,可能需要使用酸性或碱性抗原修复液进行后续测试。R&D Systems 发现,使用碱性抗原修复试剂(产品编号:CTS013)进行处理通常效果良好。我们还提供酸性(产品
一、SP 法 1)脱蜡、水化;2)PBS 洗 2~3 次各 5 分钟;3)3% H2O2(80% 甲醇)滴加在 TMA 上,室温静置 10 分钟;4)PBS 洗 2~3 次各 5 分钟;5)抗原修复;6)PBS 洗 2~3 次各5分钟;7)滴加正常山羊血清封闭液,室温 20 分钟。甩去多余液体。8)滴加Ⅰ抗 50μl,室温静置 1 小时或者4℃过夜或者37℃1小时。9)4℃ 过夜后需在37℃复温45分钟。10)PBS 洗 3 次各 5 分钟;11)滴加 Ⅱ 抗 40~50 μl,室温
不完全:使用正常山羊血清或 1%~5% BSA 封闭 1h。 (5)离子相互作用造成的背景:降低抗体稀释液的离子强度。 (6)切片或细胞过于干燥或孵育温度过高:实验过程中请保持切片处于湿润状态,一抗孵育时尽量使用 4℃ 过夜孵育。 (7)内源性过氧化物酶残余:适度延长内源性过氧化物酶阻断剂阻断时间。 (8)样本于缓冲液或抗原修复液中浸泡太久:样本在溶液中浸泡时间不要超过 24h。 Q4:为什么会出现非特异性染色,如何避免? (1)抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加非特异性染色:由于本试剂盒使用
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