WHEATON 3890-04 培养瓶 摇瓶，深扰流板，瓶口

各种用途的细胞培养瓶特性

改性处理后，可以让细胞更好的进行贴壁培养，这样根据细胞贴壁面积又可以分为25～175cm2多种。 国产的 细胞培养 瓶一般盖子都是封闭的，不带内垫，常用于密闭培养，可保证其密闭性;进口的培养瓶的盖子样式比较多：密闭盖、聚酯盖、透气盖、隔垫盖等。密闭盖的性能和国产的是相同的，聚酯盖常用于开放培养，只需轻轻旋松瓶盖便可保证瓶内气体与环境中气体的交换。透气盖是在瓶盖中加了0.2μm疏水滤膜，提供无菌气体交换，减少污染的风险。常用于开放培养，推荐用于CO2

常见细胞消化问题

的影响）；2、加入0.125% (0.25%也可以) 胰酶6滴（25cm2的培养瓶），使胰酶刚刚可以布满整个底；3、作用1min左右,用含10%血清的培养液3-5ml中和；4、轻柔吹打细胞脱壁, 离心。丁香园网友annemouse的观点为：赞同不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。丁香园网友yingyu的观点为：我认为还是要PBS洗一下丁香园网友狮心的观点为：我对付难消化细胞的做法是弃取培养液后，用0.04%的EDTA冲洗一次，再用1/4v的0.04

蛋白质印迹（Western blot）实验方案

缓冲液（湿转）25 mM Tris 碱190 mM 甘氨酸20% 甲醇测定 pH，pH 应为约 8.3。必要时进行调节。对于大于 80 kDa 的蛋白质，我们推荐加入最终浓度为 0.1% 的 SDS。转膜缓冲液（半干转）48 mM Tris39 mM 甘氨酸20% 甲醇0.04% SDS封闭缓冲液5% 奶粉或 BSA（牛血清白蛋白）加入 TBST 缓冲液中。混匀并过滤。过滤失败可能导致出现「斑点」，其中微小的黑色颗粒会在显色过程中污染印迹。实验步骤一、样品裂解◇ 制备细胞培养物裂解物1. 将细胞培养皿置于