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- 品系:
详见说明书
- 细胞类型:
详见说明书
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
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28
- 英文名:
详见说明书
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
详见说明书
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
- 免疫类型:
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- 物种来源:
人/小鼠/大鼠/其他
- 相关疾病:
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- 组织来源:
详见说明书
- 规格:
详见说明书
细胞描述
小鼠淋巴成纤维细胞产品描述:小鼠淋巴成纤维细胞分离自正常小鼠淋巴节,成纤维细胞是胚胎中胚层起源的间叶细胞。它们被广泛地用于细胞和分子方面的研究。这主要是因为纤维原细胞是体外培养中最容易生长的一类细胞,它们的耐久力使它们能够用于基因转染、显微注射等多种操作。有确凿的证据表明,在身体不同的部分的成纤维细胞有显著的不同。组织中的成纤维细胞暴露在动态的机械环境中将影响健康的和正在愈合的软组织的结构完整性。纤维原细胞分泌富含I和,或III型胶原的细胞外基质。另外,有报道指出在淋巴增生疾病中脾脏成纤维细胞大量增长。公司提供的小鼠淋巴成纤维细胞,采用胶原酶消化制备而来。细胞的培养采用公司专利产品小鼠淋巴成纤维细胞培养试剂盒(MouseLymphoidPrimaCell:NormalLymphoidFibroblastCellsCatNo.3-4365)来优化目的细胞生长条件,同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下,小鼠淋巴成纤维细胞传10代以上仍可以保持原代细胞的分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。公司提供的细胞有标准的鉴定流程,保证细胞的纯度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基;2、说明书及注意事项;3、公司技售后服务标准。
保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
细胞传代:
小鼠淋巴成纤维细胞1. 显微镜下观察细胞,神经干细胞悬浮成“神经球”生长,通常情况下,每两天换液一次,每四天传代一次。
2. 在生物安全柜或者超净台中,将培养瓶中的含有神经球的培养基转移到15ml离心管中。
3. 500rpm离心5分钟,收集神经干细胞。
4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶,在超净工作台中轻轻吹打10次,注意不要消化太久,消化的目的是缩小神经球的体积,不要消化能单个神经干细胞,那样会影响其生长速度。
5. 然后加入5ml培养基,吹打均匀后1000rpm 离心5分钟。
6. 离心后,去掉上清,用新鲜培养基重悬细胞,按照1:2-1:3的比例进行细胞传代培养。
细胞复苏:
1. 小鼠淋巴成纤维细胞 取出冻存管后,投入37℃水浴中,震荡解冻2 min。
2. 酒精消毒管壁外侧后,将其转入超净台中,将管内细胞转移至离心管中,加入5 ml 37℃预热的DMEM/F12+10%FBS培养基。
3. 将离心管离心(1000rpm,5 min)。
4. 弃去上清,再加入2ml DMEM/F12+1%N2+2%B27完全培养基,转入培养瓶中培养。
细胞冻存:液氮冻存(冻存液:DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO)。
细胞运输:干冰运输(冻存管)/ 常温运输(T-25培养瓶)
细胞鉴定:神经干细胞采用nestin免疫荧光染色鉴定。左图是白光视野中的“神经球”形态,放大倍数为200x,右图为nestin染色后的荧光图片(绿色),放大倍数为200x。
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小鼠淋巴成纤维细胞悬浮细胞的传代
悬浮细胞传代比贴壁细胞传代稍微简单一些。由于细胞已经在生长培养基中悬浮,因此无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离,整个过程较为迅速,对细胞的损伤也较小。悬浮培养时不进行生长培养基的更换;而是每 2 到 3 天加料一次,直到细胞汇合。可以直接在培养瓶中稀释细胞,然后继续培养扩增,或者也可以从培养瓶中取出一部分细胞,将余下的细胞稀释到该细胞系适宜的接种密度。悬浮细胞传代后的延滞期一般比贴壁细胞短。
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文献和实验小鼠淋巴结单细胞悬液制备流程 将小鼠颈椎脱臼处死,75% 酒精浸泡 5min,取出小鼠,腹部朝上置于无菌操作台上。 用剪子从胸骨起沿正中线一直到颌下将皮肤剪开,再从颌下向左右耳根的方向切开皮肤。用镊子夹着皮肤向左右掀开并用针固定,即可见到胸骨上方的一对体积较大的颌下腺。在左右颌下腺各自的上缘,附着有黄色的颈前部淋巴结。剪断胸锁乳突肌和肌腹,并掀起它们两个断端,可见到左颌下腺背侧深部左、右各有一个小的颈深部淋巴结。用镊子和眼科小剪仔细将淋巴结摘除。 取出淋巴结,并浸泡于干净的 PBS 溶液中
丁香园网友hyong915的观点为:成纤维细胞培养(一) 原代培养1、在手术室无菌条件下,切取新鲜的皮肤,增殖性瘢痕和瘢痕疙瘩组织,修除表皮和皮下组织,盐水反复冲洗后放入含PS的DMEM培养液内带回无菌工作间。2、把组织块置于培养皿内,Hank,s液漂洗三遍后吸净Hank,s液,眼科剪反复剪切组织块成0.5-1mm3大小。用弯头吸管吸取组织块接种于40ml培养方瓶瓶壁上,组织块间留约0.3-0.5cm的间距。3、 塞好瓶塞,放入37℃电热恒温培养箱内3.5小时使培养的组织小块微干涸
liupeizc 请问哪位高手知道成纤维细胞的生长周期啊,更确切的是血管外膜成纤维细胞生长周期,谢谢! zhujoker 估计都没人做过,你如果需要观察其生物学功能,就自己做一次,也算原创了啊! freecell 这里有: http://www.currentprotocols.com/protocol/cb0201 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意
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