谷氨酸合成酶(GOGAT)测试盒(微量法)

特别提示：包括谷氨酸合成酶(GOGAT)测试盒(微量法)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：谷氨酸合成酶(GOGAT)测试盒(微量法)
产品货号：SK070-1
产品规格：100管/96样

测定意义：
GOGAT广泛分布于植物中，和谷氨酰胺合成酶共同构成GS/GOGAT循环，参与氨同化的调控。

测定原理：
GOGAT催化谷氨酰胺的氨基转移到α-酮戊二酸，形成两分子的谷氨酸；同时NADH氧化生成NAD+，340nm吸光度的下降速率可以反映GOGAT活性大小。

需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

除了谷氨酸合成酶(GOGAT)测试盒(微量法),，我公司还供应以下相关产品：



名称：GSSG和GSH检测试剂盒
货号：YT295
规格：共100次
本试剂盒是一种简单易行的可以分别检测出GSH(还原型谷胱甘肽)和GSSG(氧化型谷胱甘肽)含量的检测试剂盒。

通过谷胱甘肽还原酶把GSSG还原成GSH，而GSH可以和生色底物DTNB反应产生黄色的TNB和GSSG。适当配制反应体系，前后两个反应合并起来后，总谷胱甘肽(GSSG+GSH)就相当于一个颜色产生的限速因素，总谷胱甘肽的量就决定了黄色的TNB形成量。从而通过测定A412就可以计算出总谷胱甘肽的量。用适当试剂先清除样品中的GSH，然后利用上述反应原理就可以测定出GSSG的含量。用总谷胱甘肽(GSSG+GSH)的量扣除GSSG的含量，就可以计算出GSH的含量。

本试剂盒的具体反应原理如下：

两个反应相合并：


还原型谷胱甘肽是绝大多数活细胞中巯基的主要来源，对于维护蛋白巯基适当的氧化还原状态有重要作用，并且是动物细胞中关键的抗氧化剂。总谷胱甘肽中通常90-95%为还原型谷胱甘肽。

本试剂盒可以检测动物组织、血浆、红细胞、和培养细胞或其它适当样品中GSH和GSSG的含量。 本试剂盒提供了蛋白去除试剂M，可以更加准确地测定出含有蛋白的样品中的GSH和GSSG的量。 本试剂盒的检测下限为0.5微摩尔/升。一个试剂盒共可以进行100次检测，可以测定100个样品的总谷胱甘肽或GSSG的含量，或可以测定出50个样品中GSH和GSSG的各自含量。

试剂盒组分：
总谷胱甘肽检测缓冲液——————60ml
谷胱甘肽还原酶—————————150μl
氧化型谷胱甘肽 (GSSG)——————5mg
DTNB——————————————4.5mg
蛋白去除试剂M——————————1g
NADPH——————————————4mg
DMSO———————————————1.5ml
GSH清除辅助液——————————0.8ml
GSH清除试剂———————————160μl

注意事项：
1. 本试剂盒检测时牵涉到氧化还原反应，所有氧化剂或还原剂都会干扰本试剂盒的测定。特别是DTT、巯基乙醇等含有巯基的试剂会严重干扰本试剂盒的测定，请尽量避免。
2. 一定要严格控制反应时的温度和反应时间，否则每次都需做标准曲线。
3. NADPH等试剂不太稳定，要严格按照后续说明操作，谨防失活。
4. 蛋白去除试剂M溶液必须新鲜配制并限当日使用。GSH清除试剂也须新鲜稀释后使用。
5. 蛋白去除试剂M较难溶解，可以通过剧烈votex并适当加热(不超过37℃)以促进溶解。
6. DMSO在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
7. GSSG配制成溶液后，需适当分装，-20℃保存至少3个月有效。DTNB溶解于DMSO后，需适当分装，-20℃保存至少3个月有效。蛋白去除试剂M配制成溶液后仅限当天使用。NADPH溶解后，适当分装，-70℃保存。稀释的GSH清除辅助液和GSH清除试剂溶液均须新鲜配制使用。

储存条件：-20℃，有效期一年。