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- 2025年07月13日
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上海博湖
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49
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- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 年限：
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- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 器官来源：
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- 是否是肿瘤细胞：
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- 细胞形态：
上皮样/成纤维样/其它
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- 物种来源：
人/小鼠/大鼠/其他
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培养条件
THP-1，人单核白血病细胞RPMI-1640(GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)和0.05mM β-巯基乙醇，90%；优质胎牛血清，10%。
气相：空气，95%；二氧化碳，5%。
温度：37摄氏度。
细胞描述
THP-1，人单核白血病细胞细胞生长：悬浮生长
细胞数量：1×106个
细胞传代：1:2~1:3传代；每周换液2~3次
细胞特性：该细胞对乳汁珠和激活的红细胞有吞噬作用，无表面和胞质免疫球蛋白。 可以用佛波醇TPA诱导单核细胞分化。
细胞检测：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
细胞冻存：液氮冻存（基础培养基+10%DMSO+20%FBS）
细胞运输：干冰运输（1 Vial）或活细胞运输（T-25 flasks）
细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗
细胞传代：
THP-1，人单核白血病细胞1. 显微镜下观察细胞，神经干细胞悬浮成“神经球”生长，通常情况下，每两天换液一次，每四天传代一次。
2. 在生物安全柜或者超净台中，将培养瓶中的含有神经球的培养基转移到15ml离心管中。
3. 500rpm离心5分钟，收集神经干细胞。
4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶，在超净工作台中轻轻吹打10次，注意不要消化太久，消化的目的是缩小神经球的体积，不要消化能单个神经干细胞，那样会影响其生长速度。
5. 然后加入5ml培养基，吹打均匀后1000rpm 离心5分钟。
6. 离心后，去掉上清，用新鲜培养基重悬细胞，按照1:2-1:3的比例进行细胞传代培养。
细胞复苏：
1. THP-1，人单核白血病细胞 取出冻存管后，投入37℃水浴中，震荡解冻2 min。
2. 酒精消毒管壁外侧后，将其转入超净台中，将管内细胞转移至离心管中，加入5 ml 37℃预热的DMEM/F12+10%FBS培养基。
3. 将离心管离心（1000rpm，5 min）。
4. 弃去上清，再加入2ml DMEM/F12+1%N2+2%B27完全培养基，转入培养瓶中培养。
细胞冻存：液氮冻存（冻存液：DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO）。
细胞运输：干冰运输（冻存管）/ 常温运输（T-25培养瓶）
细胞鉴定：神经干细胞采用nestin免疫荧光染色鉴定。左图是白光视野中的“神经球”形态，放大倍数为200x，右图为nestin染色后的荧光图片（绿色），放大倍数为200x。
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THP-1，人单核白血病细胞α-酮戊二酸α-Ketoglutaric acid328-50-7含量：≥98.0%
α-酮戊二酸钠α-Ketoglutaric acid disodium salt305-72-6含量：≥98.0%
6-羟基多巴胺6-OHDA636-00-0含量：≥98.0%
腐胺Putrescine dihydrochloride333-93-7含量：≥98.0%
精胺Spermine71-44-3含量：≥98.0%
THP-1，人单核白血病细胞悬浮细胞的传代
悬浮细胞传代比贴壁细胞传代稍微简单一些。由于细胞已经在生长培养基中悬浮，因此无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞的损伤也较小。悬浮培养时不进行生长培养基的更换；而是每 2 到 3 天加料一次，直到细胞汇合。可以直接在培养瓶中稀释细胞，然后继续培养扩增，或者也可以从培养瓶中取出一部分细胞，将余下的细胞稀释到该细胞系适宜的接种密度。悬浮细胞传代后的延滞期一般比贴壁细胞短。
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文献和实验Purpose Materials10ml 6% dextran + 7ml citrate/citric acidDextran: T500 --> 6g+100ml PBSCitrate solution: 25g Na Citrate + 8g citric acid + 500 ml PBS 43 ml blood 12 ml RT Histopaque 107718 ml cold H2 O2 ml 10x PBSM199 for HUVECs: 1L powder pocket
急性粒单核细胞白血病（M4）：符合下列条件之一： ①骨髓NEC中，原始细胞大于/等于30%，骨髓原粒及原粒以下阶段的粒细胞大于/等于30%至小于80%；不同分化程度的单核细胞大于20%；周围血单核细胞大于/等于5 X 109/L. ②骨髓检查同上，血斗核细胞系小于SX10‘/L，但血或尿溶菌酶高于正常值3倍以L，或单核细胞酯酶染色证实单核细胞系大于20%. ③骨髓细胞形态检查符合MZ，但有下列条件之一： a.血单核细胞大于/等于sxlo‘/L. b
白细胞之一，胞体较大，直径约为15-30酶μm，胞质内没有颗粒，它们约占血液中白细胞数的4%-8%。单核细胞来源于骨髓中的造血干细胞，并在骨髓中发育。当它们从骨髓进入血流时仍然是尚未成熟的细胞。与其他血细胞比较，单核细胞内含有更多的非特异性脂酶，并且具有更强的吞噬作用。单核细胞在血液中停留2-3天后迁移到周围组织中，细胞体积继续增大，直径可达50-80μm，细胞内所含的溶酶体颗粒和线粒体的数目也增多，成为成熟的细胞。固定在组织中的单核细胞称为组织巨噬细胞，它们经常大量存在于淋巴结、肺泡
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