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上海博湖
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贴壁/悬浮
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常温运输/干冰运输
- 器官来源:
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- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
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- 物种来源:
人/小鼠/大鼠/其他
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- 组织来源:
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培养条件
大鼠真皮成纤维细胞DMEM培养基(添加NaHCO3 1.5g/L),90%;优质胎牛血清,10%
气相:空气,95%;二氧化碳,5%
温度:37摄氏度
细胞描述
大鼠真皮成纤维细胞细胞生长:贴壁生长
细胞形态:上皮细胞样或棱形
细胞数量:1×106个
细胞传代:1:3传代;2~3天换液1次
细胞纯度:93%
细胞活力:87%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
细胞冻存:液氮冻存(基础培养基+10%DMSO+20%FBS)
细胞运输:干冰运输(1 Vial)或活细胞运输(T-25 flasks)
细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗
大鼠真皮成纤维细胞细胞图片:
细胞种类
大鼠真皮成纤维细胞冻存
对培养的细胞进行冻存的最佳方法是将细胞置于含有(DMSO)等冷冻保护剂的完全培养基中于液氮中储存。冷冻保护剂可降低培养基的冰点,并可减缓冷却速度吗,大大降低冰晶形成的危险 (冰晶可损伤细胞,导致细胞死亡)。
注:DMSO 可促进有机分子进入组织。操作含DMSO的试剂时,应采用与此类物质安全危害相适应的设备和操作规范,并应按照当地法规处置此类试剂。
细胞冻存指导原则
冻存细胞系以备将来之用时,必须遵守以下原则。与其他细胞培养操作一样,我们建议您严格遵守您所用细胞系附带的操作说明,以便获得最佳结果。
1)在高细胞浓度情况下进行培养细胞的冻存,并且细胞传代次数尽可能少。确保冻存前活细胞百分比至少为90%。请注意最佳冻存条件取决于所用细胞系。
2)细胞应缓慢冷冻,可使用可控制降温速度的低温冰箱或者低温冷冻容器使温度每分钟大约降低1°C。
3)必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂
4)将冷冻的细胞于 -70°C 以下温度储存;温度高于 -50°C 时,冷冻的细胞将开始变质。
5)必须使用无菌冻存管储存冷冻的细胞。装有冷冻细胞的冻存管可浸于液氮或者在液氮上方的气相空间内保存
6)必须穿戴个人防护设备。
7)所有与细胞接触的溶液和设备均应为无菌状态。必须采用正确的无菌技术,并且在层流通风橱内进行。
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文献和实验实验材料: 1. 正常动物皮肤 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2 3. 细胞培养瓶(T25) 4. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊 实验方法: 1. 取正常动物皮肤,置于小培养皿内,用PBS漂洗3-4次,以除去表面血污及毛发; 2. 将洗净的组织用眼科剪剪切成1mm3 左右大小,再用PBS漂洗3次; 3. 用眼科剪将组织块移至培养瓶瓶壁
瓶倾斜放置在温箱中,干贴壁2-4 h后,将培养瓶慢慢翻转平放,继续静置培养。注意上述操作过程中动作要轻柔,让液体慢慢覆盖组织小块,严禁动作过快致使液体产生的冲力使粘贴的组织块漂起而造成原代培养失败。48 h后换液,更换2-3 ml即可。 2.6 贴块贴壁72 h后,镜下可见大量的成纤维细胞爬出,将组织块去除,继续培养2-3天,待细胞长满,即可传代。注:因为血清浓度低,内皮细胞可以爬出少量,但是很快就会死掉。 2.7 传代用0.25%胰酶常规消化,以1:2传代,传代完后,采用
大鼠成纤维细胞生长因子(FGF ) 酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中成纤维细胞生长因子(FGF ) 的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠 成纤维细胞生长因子(FGF ) 水 平。用纯化的大鼠 成纤维细胞生长因子(FGF ) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 成纤维细胞生长因子(FGF
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