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- SH411-01
- 2025年11月12日
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100ml
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上海觅拓
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瓶
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文献和实验0.5M EDTA FW M L pH8.0 xg = 292.25 0.5 0.5 **93.06g** Add to about 300mls H2 O while spinning
；3. 用等体积酚/氯仿/异戊醇抽提样品，1700×g，离心 10 min。如果样品溶解得不好，再加 1 体积不含蛋白酶 K 的消化缓冲液，重复离心。如果在界面上有一层厚的白色物质，重复抽提一次，将上层 (水溶液) 转移至一个新离心管中；4. 加入 1/2 体积 7.5mol/L 乙酸铵和 2 倍体积 100% 乙醇，12 000 rpm 离心 2 min；5. 用 70% 乙醇洗涤，晾干，沉淀用 TE 缓冲液或无菌双蒸水重新溶解, 使终浓度在约 1 mg/mL。注: 加入 0.1% 的 SDS 和 1? 滋
对柱子进行清洗。（如果出现载量严重下降或者压力增加，需考虑彻底清洗） CIP（彻底清洗） 常规柱子（除了Ni excel）如出现反压严重升高或者柱子明显颜色改变，说明柱子需要进行彻底的清洗。 1. 脱镍： (1) 脱镍缓冲液：20mM 磷酸缓冲液，0.5M NaCl，50mM EDTA，pH 7.4。 (2) 使用5-10个柱体积的脱镍缓冲液冲洗柱子， (3) 然后再用5-10个柱体积的水冲洗柱子。 2. 去除沉淀蛋白、疏水性蛋白及脂蛋白：将柱子置换到1M NaOH中，室温1-2小时（若需
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