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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
26
- 英文名:
10g
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
10g
1. 根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
Nicotinamide(Sirt1 抑制剂 )10g费用注意事项:
1. 组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
Nicotinamide(Sirt1 抑制剂 )10g费用实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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文献和实验PNAS:RAS 抑制剂又添一员,新型蛋白模拟物或为癌症治疗
13、RAB10、RAB14、RAB18、RAB5C 和 RAP1B)。序列分析表明,在 Sos 螺旋发夹结合区富集的 Ras 相关蛋白和其他 G 蛋白之间存在高度的序列相似性。图片来源:PNAS总的来说,该研究开发了一种 Sos 蛋白模拟物,它结合野生型和突变型 Ras,并对致癌 Ras 细胞具有选择性毒性作用。这种模拟物将为开发高 Ras 突变型癌症靶向抑制剂提供坚实的理论依据。延伸阅读该研究是同一团队十年前报道的跟进研究。图片来源:ScienceDirect 截图2011 年,Paramjit S
的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。 常用抑制剂 PMSF 1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶); 2)10mg/ml溶于异丙醇中; 3)在室温下可保存一年; 4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L); 5)在水液体溶液中不稳定,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。 EDTA 1)抑制金属
疾病 在将来的可靠性。因为17-AAG是第一个被发现的该类抑制剂,而试验目前仍处于临床二期,癌症病人的临床反馈信息是有限的。现已知的药物作用主要是稳定 病情,主要在恶性骨髓瘤,这与细胞抑制类药物效果一致。 5.HSP90的前景展望 因为距HSP90的发现已有10多年了,在研制HSP90作为抗癌药的过程中取得了无数的突破。这些化合物也证实HSP90复合物在各种生物过程中的重要作 用。然而在癌症治疗领域,HSP90的作用仍面临两大挑战。首先是提高现有药剂药理性质同时保持特异的靶向
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