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- 2026年01月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
原代细胞
- 库存：
100
- 细胞类型：
科研
- 品系：
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- 组织来源：
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- 物种来源：
人/小鼠/大鼠/其他
- 细胞形态：
上皮样/成纤维样/其它
- 器官来源：
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- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 年限：
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- 生长状态：
贴壁/悬浮
细胞类型：原代细胞
人子宫颈上皮细胞MatchPair™: 宫颈上皮和肿瘤原代细胞产品简介：
连续培养的细胞系容易发生遗传漂变，有限细胞系最终会发生衰老，所有培养的细胞都易受到微生物污染，即使运转情况最好的实验室也会遇到设备故障的问题。由于已建立的细胞系是一种宝贵资源，更换细胞系成本高昂，而且耗费时间，因此，必须将其冷冻起来，长期保存。
传代时如有少量富余细胞，应立即作为种细胞储备冻存，加以保管，不得用作常规实验之用。利用冻存的种细胞储备可制备和补充工作细胞储备。如果种细胞储备用尽，可利用冻存的工作细胞储备制备新的种细胞储备，这样与最初冻存时相比，细胞代数增加较少。
人子宫颈上皮细胞MatchPair™: 宫颈上皮和肿瘤原代细胞细胞种类：
冻存
对培养的细胞进行冻存的最佳方法是将细胞置于含有(DMSO)等冷冻保护剂的完全培养基中于液氮中储存。冷冻保护剂可降低培养基的冰点，并可减缓冷却速度吗，大大降低冰晶形成的危险 (冰晶可损伤细胞，导致细胞死亡)。
注：DMSO 可促进有机分子进入组织。操作含DMSO的试剂时，应采用与此类物质安全危害相适应的设备和操作规范，并应按照当地法规处置此类试剂。
细胞冻存指导原则
冻存细胞系以备将来之用时，必须遵守以下原则。与其他细胞培养操作一样，我们建议您严格遵守您所用细胞系附带的操作说明，以便获得最佳结果。
1）在高细胞浓度情况下进行培养细胞的冻存，并且细胞传代次数尽可能少。确保冻存前活细胞百分比至少为90%。请注意最佳冻存条件取决于所用细胞系。
2）细胞应缓慢冷冻，可使用可控制降温速度的低温冰箱或者低温冷冻容器使温度每分钟大约降低1°C。
3）必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂
4）将冷冻的细胞于 -70°C 以下温度储存；温度高于 -50°C 时，冷冻的细胞将开始变质。
5）必须使用无菌冻存管储存冷冻的细胞。装有冷冻细胞的冻存管可浸于液氮或者在液氮上方的气相空间内保存
6）必须穿戴个人防护设备。
7）所有与细胞接触的溶液和设备均应为无菌状态。必须采用正确的无菌技术，并且在层流通风橱内进行。
人子宫颈上皮细胞MatchPair™: 宫颈上皮和肿瘤原代细胞实验规范或建议：
安全注意事项
生物危害性物质必须储存在液氮上方的气相空间内。将密封的冻存管置于气相空间储存可避免冻存管发生爆炸。如果使用液氮进行储存，必须注意玻璃和塑料冻存管有发生爆炸的危险，应佩戴面罩或护目镜。
人子宫颈上皮细胞MatchPair™: 宫颈上皮和肿瘤原代细胞培养技术传授：
冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低 1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
- 将已经冷冻的细胞转移到液氮容器中，置于液氮上方的气相空间中储存。
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烜雅公司生产的人子宫颈上皮细胞MatchPair™: 宫颈上皮和肿瘤原代细胞质量佳，发货速度快，售后有保证。可支持各大院校先票货
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文献和实验实验材料： 1. 动物子宫颈部穿刺或切除所得组织 2. 3T3成纤维细胞 3. 0.25%胰蛋白酶/EDTA 4. KCM：DMEM中添加10%FBS、0.5ug/ml氢化可的松和1×10-10 mol/L霍乱毒素 5. EGF：100ugEGF溶于1ml无菌的UPW中。按100ul分装，在-20℃条件下储存。用10ml的含有血清的培养液配制100ug/mlEGF工作液，按100ul分装，在4℃储存。使用时，用含有
阴道可见的正常脱落上皮细胞： 1.鳞状上皮细胞：从外阴向内直至子宫颈外口的黏膜均被覆鳞状上皮。在其脱落细胞中可见底层、中层、表层3层细胞，细胞形态与正常脱落的鳞状上皮细胞基本相同。阴道上皮细胞形态变化与卵巢激素关系密切相关。 （1）底层细胞：分为内底层和外底层细胞。阴道涂片一般不见内底层细胞，仅在哺乳期、闭经后，阴道高度萎缩或糜烂、创伤时才见。 外底层细胞根据来源不同，分为3型：①宫颈型外底层细胞；②产后型外底层细胞；③萎缩型外底层细胞。 （2）中层细胞
的形态和生理特性。最后，与传统的2D细胞培养条件相比，这些水凝胶允许对细胞进行包封，以实现细胞在更贴近天然组织环境的3D环境中进行生长。 TRUEGEL3D™的功能和优点 TrueGel3D™适用于多种细胞系（MDCK、上皮细胞、成纤维细胞、癌细胞、原代细胞（包括淋巴细胞）、基质和胚胎心肌细胞）。 TrueGel3D™中形成水凝胶骨架的基本成分（葡聚糖、PVA、PEG）不会干扰细胞行为 凝胶透明，支持细胞成像分析 基于不同的凝胶速度，多种TrueGel3D™试剂盒可供选，可支持多种应用
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