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| 种属来源 | 小鼠 |
|---|---|
| 组织来源 | 肌肉 |
| 形态 | 成肌细胞 |
| 培养基 | 90%DMEM(高糖)+10%胎牛血清(FBS |
| 背景资料 |
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文献和实验1) 细胞消化液的配制及存储:我采用的是0.25%Trypsin+0.05%EDTA的消化液,BUFFER采用的是D-Hank's液。配完后分装成4-5ml/tube,于-20度冰箱中储存。2) 消化前的处理:当细胞生长至亚融和状态需要传代时,提前半小时将配好的消化液放在细胞培养孵箱中预热,同时将配好的高压无菌的D-Hank's液也进行预热。3) 消化细胞:将预热的D-Hank's液洗细胞2次,2ml/25cm2,然后再加入预热的消化液,作用3-5min,并反复振荡,镜下观察。当细胞被消化
地控制细胞分化率。 RAW264.7 细胞三天不传代更容易分化,很难吹下,每一次接种密度都要控制好;培养过程中一般无法保证 100% 不分化,分化的细胞贴壁性比未分化的要强,传代时只要容易吹下的细胞就可;吹打的力度一定要轻,切勿暴力吹打。 图 8:分化的 RAW 264.7 细胞形态 ④C2C12 细胞 C2C12 细胞是小鼠成肌细胞,属于贴壁细胞,分化很快,形成可伸缩的肌管并生成特征性的肌蛋白。用骨形成蛋白 2(BMP-2) 诱导 C2C12 细胞,会导致 C2C12 细胞的分化途径从成肌细胞
章内容充实丰富,小编决定分两次给大家详细解读,本次重点阐述高通量数据分析部分。 一、样本介绍 本文所研究的样本是人和小鼠(C2C12)的肌母细胞(myoblasts ,GM)以及诱导分化后的肌管细胞(myotubes ,DM),每个样本有A,B两个重复进行RNA-Seq(在circRNA进行差异表达分析中,作者还用到了人肌营养不良(DMD)样本)。作者采用FindCirc软件流程检测circRNA,结果如下表: 表1 Number of detected linear and circular
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