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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
10000
- 供应商:
KA&M BIO
- 检测范围:
附带说明书
- 检测方法:
酶联免疫法
- 应用:
科研
- 适应物种:
检测种属
- 标记物:
辣根包被
- 样本:
上清
- 规格:
96T
人葡萄糖氧化酶(GOD)elisa检测试剂盒
人葡萄糖氧化酶(GOD)elisa检测试剂盒使用前预备实验
1、使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37℃溶解。
2、标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为 10,000pg/mL(贮液)。先将其稀释为5,0000pg/mL(标准曲线高浓度)后,再准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入500μL的标准品稀释液,依次倍比稀释成 5,000pg/mL,2,500pg/mL,1,250pg/mL,625pg/mL,312pg/mL,156pg/mL,78pg/mL,标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
3、检测溶液A及检测溶液B:Detection A 及Detection B 在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。临用前分别以检测稀释液 A 或 B1:100 稀释(如:10μL 检测溶液 A/990μL 检测稀释液 A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μL/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2mL。
4、浓洗涤液:用 580mL 蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。
5、底物溶液:请用灭菌的移液器吸头吸取所需体积的 TMB 至另一干净容器中使用,容器中剩余的底物应予丢弃,不要倒回TMB瓶中。
人葡萄糖氧化酶(GOD)elisa检测试剂盒使用注意事项
1、手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
2、自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套试剂才能保证检测效果,因为所有试剂都是有关联的,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守KA&M-BIO试剂盒的说明操作才会得到佳的检测结果。
4、在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
5、浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
6、刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
7、所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
8、有效期:6个月。
人葡萄糖氧化酶(GOD)elisa检测试剂盒仅供科研。不得用于临床诊断治疗。
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文献和实验度高,主要缺点是试剂腐蚀性大,邻甲苯胺被怀疑有致癌性,既有碍于健康又易损坏仪器。以上非酶法均为非特异性方法,由于非糖还原物质,如谷胱甘肽,维生素C、肌酸、肌酐、尿酸等也都能参与反应,可使结果比酶法偏高0.3~0.6mmol/L.3.酶法:包括葡萄糖氧化酶-过氧化物酶(GOD-POD)偶联法、己糖激酶(HK)法和葡萄糖氧化酶-氧速率(GOD-OR)法。酶法采用特定的酶促生化反应步骤,因此具有特异性高。(1)葡萄糖氧化酶-过氧化物酶偶联法(GOD-POD法):目前应用最广泛的常规方法。医学教育网|搜索整理
来源的G-6-PD,则以NAD+作为辅因子,NADH的生成量也在340nm测定。 (2)评价:该法准确度和精密度高,特异性高于葡萄糖氧化酶法,适用于自动化分析,为葡萄糖测定的参考方法。轻度溶血、脂血、黄疸、氟化钠、肝素、EDTA和草酸盐等不干扰本法测定。 3. 葡萄糖氧化酶法 (1)原理:葡萄糖氧化酶(glucose oxidase, GOD)催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸和过氧
洗涤是为了洗去一抗与抗原的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。 孵育二抗 孵育 RT1 小时。 一般采用HRP标记的二抗,稀释比例为1:5000。二抗的稀释比例不能太低,否则容易导致非特异性的结合。注意二抗的选择有多种,要根据一抗来选择抗兔、抗鼠或者抗羊的二抗,以及根据后面的显色条件来选择HRP、AP或者GOD(葡萄糖氧化酶)酶链的二抗或者标志其他探针(如核素等)的。 洗涤 用 TBST先快速洗三次,把milk尽快的wash掉。 然后5mins *5。 洗涤
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