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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
32
- 英文名:
6×10mL
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
6×10mL
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
DNA 上样液 ( 蓝 ),6×10mL保存详细介绍:

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DNA 上样液 ( 蓝 ),6×10mL保存酸肼(标准品) 质量规格:>99%,BR 2,2'-O-Cyclouridine
酸肼(标准品) 质量规格:0.99 X-gal
酸金雀花碱;酸司巴(标准品) 质量规格:>98% Fluorescamine
酸钾铬十二水 质量规格:0.99 4-Chloro-1-naphthol (4-CN)
酸钾(标准品) 质量规格:10-15 units/mg protein,进分 Avidin from egg white
酸黄连碱(标准品) 质量规格:>15Units/mg protein Streptavidin from Streptomyces avidinii
酸核糖霉素 质量规格:>98.5%,水合物,BR Sitafloxacin Hydrate
酸铬(>98%,BR) 质量规格:>99% DHBS
酸钙二水 质量规格:>99%,BR,5水合物 Disodium beta-glycerophosphate pentahydrate
酸钙(>99%,BR) 质量规格:>95%,进口 Fura 2-AM
DNA 上样液 ( 蓝 ),6×10mL保存操作流程:
1. 根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
DNA 上样液 ( 蓝 ),6×10mL保存注意事项:
1. 组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
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文献和实验),如果沉淀很难溶解,于 65 ℃ 温育直至所有的或大部分沉淀溶解;10. 加入 0.6 倍体积异丙醇沉淀核酸,充分混匀,7500×g,4 ℃,离心 15 min;11. 用 75% 乙醇洗涤沉淀物,干燥,用尽可能少的 TE 或水重悬 (每克起始材料 0.1~0.5 mL)。【注意事项】基因组 DNA 分子量大,所有操作必须轻柔,酚/氯仿对皮肤有腐蚀作用,应该戴手套操作。二、RNA 的制备【实验目的】1. 理解生物细胞中 RNA 制备方法的原理。2. 熟悉组织细胞中 RNA 制备的基本操作。(一)细胞总
,如果假定处于感受态的受体细胞能100%地接纳DNA分子,则这种转化率直接反应了受体细胞中感受态细胞的含量;转化率的另一种表示形式是在受体细胞数相对于待转化DNA分子数大大过量时,每微克DNA转化所产生的克隆数。由于在一般规模的转化实验中,所观测到的每个受体细胞只能接纳一个DNA分子,因此上述转化率的定义也可表征为每微克DNA进入受体细胞的分子数。例如,pUC18对大肠杆菌的转化率为108 /mg DNA,其含义是每微克pUC18只有108 个分子能进入受体细胞,一微克pUC18中共有6.02×1017
28.5 ml 4.TE缓冲液 10mmol/L Tris·HCl 1 mmol/L EDTA(pH8.0) 5.70%乙醇(放-20℃冰箱中,用后即放回) 6.胰RNA酶 将RNA酶溶于10mmol/L Tris·HCl(pH7.5)、15mmol/L NaCl中,配成10mg/ml的浓度,于100℃加热15min,缓慢冷却至室温,保存于-20℃。 7.终止液:40%蔗糖、0.25%溴蓝酚 8.酚
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