货号 |
英文品名 |
中文名 |
规格 |
储存条件 |
AT090 |
SFRE Medium 199-2 (With Earle's Salts, L-Glutamine, Galactose and Glucose, Without Sodium bicarbonate and Insulin) |
SFRE 199 -2培养基 (含有Earle's盐、谷氨酰胺、半乳糖和葡萄糖, 不含碳酸氢钠和胰岛素) |
1L, 5L, 10×1L, 20L |
2-8°C |
产品描述:
SFRE Medium 199是对M199培养基的改良,用于原代狒狒肾(Bak)细胞的生长和维持。培养基在M199培养基基础上添加了胰岛素、(丙)酮酸钠、硫酸锌,并升高了精氨酸-盐酸、半胱氨酸、胱氨酸、L -谷氨酰胺、L -谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、酪氨酸和葡萄糖的浓度,使其实现最大的无毒活性。SFRE 199 -2还添加了半乳糖,以避免乳酸过度积累,并使pH值在细胞延长的维持期内,保持在生理范围。
AT090是SFRE 199-2培养基,含有Earle's盐、L-谷氨酰胺、半乳糖和葡萄糖。它不含胰岛素,因此在使用前必须单独添加。对于不同的细胞系,建议用户查阅相关文献,以了解细胞所需的培养基添加成分和生理生长的需求。
使用方法:
1. 将12.1g悬浮在900ml的组织培养级水中,持续温和搅拌,直到粉末完全溶解。不要加热水。
2. 加入2.20g碳酸氢钠粉末(TC230)或29.3ml的7.5%碳酸氢钠溶液(TCL013)用于制备1L培养基,并搅拌至溶解。
3. 用1N HCl或1N NaOH将pH调低所需pH值的0.2-0.3 pH单位,因为过滤时pH值会升高。
4. 用组织培养级别水将最终体积补足至1000ml。
5. 培养基过滤除菌。采用正压而非真空将培养基通过0.22微米或更小的无菌膜过滤器。正压可减少二氧化碳的丢失。
6. 根据需要,无菌补充无菌添加剂。将无菌培养基分装至无菌容器中。
7. 将液体培养基保存在2-8°C,避光。
质量控制:
外观
灰白色至乳白色均匀粉末。
可溶性
12.1 g / L的透明溶液。
不含碳酸氢钠的pH值
4.70-5.30
用碳酸氢钠调节pH
7.20 -7.80
不含碳酸氢钠的渗透压
260.00 -300.00
含碳酸氢钠的渗透压
300.00 -340.00
培养反应
培养基的促生长能力通过细胞形态分析进行定性评估,通过细胞计数及对照品的比较进行定量评估。细胞至少传三代。
内毒素含量
不超过5EU / ml
储存和保质期:
1.所有干粉培养基和制备好的液体培养基应储存在2-8°C,在效期之前使用。尽管按推荐条件储存,个别干粉培养基在某些情况下可能会出现变质/降解的迹象。这通过颜色的变化、外观的变化、颗粒物的存在和溶解后的浑浊表现出来。
2. 不建议制备浓缩培养基。在浓缩培养基中,溶解性较差的游离碱性氨基酸和盐复合物含量可能发生沉淀。
3. 制备好的培养基的pH值和碳酸氢钠浓度是影响细胞生长的关键因素。这也受培养基的量和培养容器体积(表面体积比)的影响。例如在大瓶如Roux瓶中,随着相当体积的CO2释放,pH值会明显上升。因此,对于每种细胞类型,必须确定pH值、碳酸氢钠浓度、表面体积比的最佳条件。我们建议严格监测pH值。如果需要,可用无菌的1N HCl或1N NaOH或充二氧化碳来调pH值。
4. 如需要,可在过滤除菌前或除菌后在培养基中补充添加剂,注意无菌防护措施。培养基的保质期将取决于加入培养基中的添加剂的性质。