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- 2025年07月14日
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- 文献和实验
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55
- 英文名：
10 次
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海抚生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
10 次
1. 组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
Southern 级血液 DNAout10 次说明书详细介绍：
Southern 级血液 DNAout10 次说明书实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
Southern 级血液 DNAout10 次说明书操作流程：
1. 根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
Southern 级血液 DNAout10 次说明书的相关产品:
HMy2.CIR细胞株pCI2 ug
HO-8910PM细胞株pCI-neo2 ug
HO-8910细胞株pCL Eco2 ug
HOS细胞株pCL12 ug
HP615细胞株pCL-Ampho2 ug
HPAC细胞株pCMS-EGFP2 ug
Hs 578T细胞株pCMV/Myc/Mito2 ug
HSC-T6细胞株pCMV/Myc/Nuc/GFP2 ug
HT1080细胞株pCMV52 ug
HT-29（RFP）细胞株pCMV5 （no Nde I）2 ug
HT-29细胞株pCMV5-3002 ug
HuH-6细胞株pCMV5-Flag2 ug
HuH-7细胞株pCMV5-HA2 ug
HuT 78细胞株pCMV5-Myc2 ug
HuTu-80细胞株pCMV6 entry2 ug
Southern 级血液 DNAout10 次说明书酸二酯(>99.0%(GC)) 质量规格：BR Span* 80
酸基4-羧酯(>98.0%(T)) 质量规格：分子量1000 PEG 1000
酸钡(>99%,BR) 质量规格：BD 211705 Tryptone
化钨200(>99%,BC) 质量规格：>98% DNSCl, Dansyl chloride
钽试剂 质量规格：>98%,BR N-Ethylmaleimide
钽标准溶液(1000μg/ml) 质量规格：>99%,AR Potassium bicarbonate
坦西莫司,西罗莫司脂化物 质量规格：>98%,BR Sodium dodecanesulfonate
坦索罗辛 质量规格：>99%,BR Theophylline
坦度替尼;MLN518 质量规格：>2000U/mg Cellulase
坦度替尼（标准品） 质量规格：>95%,BR Chondroitin sulfate
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文献和实验。3）立克次氏立克次氏体Rickettsia rickettsii，是落基山斑疹伤寒的病原体。最初发现于美国的落基山地区的蒙培拉州的山谷。疾病流行时，病人的死亡率高达90%。立克次氏立克次体在自然界中寄生于蜱和蜱所寄居的动物体内，人受蜱叮咬就会染病。4）恙虫病立克次氏体，是恙虫病（丛林斑疹伤寒）的病原体。本病首先在日本发现，目前，我国东南沿海地区和台湾省也有病例报告。在日本，病人的死亡率约有60％。这种病原体由恙螨叮咬侵入人体，随血液扩散至血管内皮细胞中生长，发病。贮藏病原体的动物为野生啮齿动物并借螨
【原理】Southern 印迹是将电泳分离的 DNA 片段转移到一定的固相支持物上的过程。DNA 分子经限制性核酸内切酶酶切，经琼脂糖凝胶电泳将得 DNA 片段按分子量大小分离，然后将含 DNA 片段的琼脂糖凝胶变性，并将单链 DNA 片段转移到硝酸纤维素膜或其它固相支持物上，而各 DNA 片段的相对位置保持不变，这种滤膜可用于杂交反应。利用 Southern 印迹法可进行克隆基因的酶切图谱分析、基因组基因的定性及定量分析、基因突变分析及限制性片段长度多态性分析 (RFLP)等。【操作
概述 Southern杂交可用来检测经限制性内切酶切割后的DNA片段中是否存在与探针同源的序列,它包括下列步骤: (1) 酶切gDNA, 凝胶电泳分离各酶切片段,然后使DNA原位变性。 (2) 将DNA片段转移到固体支持物(正电荷尼龙膜)上。 (3) 预杂交。 (4) 加入探针进行杂交,然后漂洗除去非特异性结合的探针。 (5) 显色/X-光片曝光检测杂交信号，即为目的DNA
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