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- ARL0020SKT
- 2025年07月16日
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- 文献和实验
- 技术资料
产品货号：ARL0020SKT 保存温度：-20℃ 18个月
| 组分名称 | 数量 |
| 酶标板（96孔） | 1块 |
| 包被缓冲液 | 15ml |
| 封闭缓冲液 | 15ml |
| 洗涤母液（25X） | 30ml |
| SA-HRP工作液 | 15ml |
| 酶标板覆膜 | 3张 |
| TMB底物液 | 15ml |
| 底物终止液 | 15ml |
| 产品说明书 | 1份 |
产品介绍：
本试剂盒用于检测生物素标记效果，其原理是生物素标记在蛋白上之后，可以随蛋白吸附在酶标板上，链霉亲和素HRP(简称SA-HRP)是链霉亲和素与HRP偶联的复合物，链霉亲和素可以与生物素特异性结合反应，HRP可以催化TMB底物显色；生物素标记效率越高，其结合的SA-HRP就越多，催化TMB显色就越深。
试剂盒的准备：
除了本试剂盒中准备的试剂外，你还需准备去离子水，移液器和吸头，加样皿，离心管等。
操作步骤：
1.将生物素标记产物按照1ug/ml开始，1:2用包被缓冲液连续倍比稀释，每个稀释度100ul/孔加入酶标板中，覆膜4℃过夜。【根据实际情况，建议每个稀释度做复孔，连续做10个稀释度】
2.第二天丢弃酶标板中包被液，在吸水纸上拍干，加入封闭缓冲液150ul/孔，覆膜37℃ 60min。
3.弃酶标板中封闭缓冲液，在吸水纸上拍干，加入350ul/孔洗涤液【使用前15min用去离子水将洗涤母液（25X）稀释为1X工作液】，静置30s，弃液，重复清洗3次。
4.加入SA-HRP工作液100ul/孔到酶标板中，覆膜37℃ 60min。
5. 弃酶标板孔液，在吸水纸上拍干，加入洗涤液350ul/孔，静置30s，弃液，重复清洗3次。
6.加入100ul/孔TMB显色液，避光显色5-10min （此时颜色变蓝）。
【如果实验室没有酶标仪，可以直接肉眼观测。】
7.加入100ul/孔反应终止液终止显色（此时颜色变黄），酶标仪读数。
*本试剂仅供实验室研究使用
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文献和实验亲和素和从卵白中提取的亲和素一样，也由4条相同的肽链组成。因链霉亲和素在检测应用中发生的非特异性结合远较亲和素低，因此日渐受重视，已有取代亲和素之势。 各种抗体或酶的标记物在国内已有商品供应，使用方便。BAS ELISA 具有的特点： ①对于所有的抗原抗体系统，包括免疫细胞化学、ELISA、免疫印迹法等都适用，应用范围极广； ②BAS 在温和条件下可与各类生物大分子如蛋白质、脂多糖等结合，并且这种结合对原生物大分子的生物活性无影响； ③每个亲和素分子可与 4 个生物素分子结合，所以可以偶合更多连接生物素
法测定IgM抗体，导致假阳性反应。因此中和IgG的间接法近来颇受青睐，用这类试剂检测抗CMV IgM和抗弓形虫IgM抗体已获成功。 7.ABS-ELISA法 ABS为亲和素(avidin)生物素(biotin)系统(system)的略语。亲和素是一种糖蛋白，分子量60000，每个分子由4个能和生物素结合的亚基组成。生物素为小分子化合物，分子量244。用化学方法制成的衍生物素- 羟基琥珀酰亚胺酯可与蛋白质和糖等多种类型的大小分子形成生物素标记产物，标记方法颇为简便。生物素与亲和素的结合具有很强
，但也有力所不及的时候，比如分离培养法就不能检出支原体M. hyorhinis菌株的存在。 如果实在不想等这么久，或者希望在分离培养法的等待过程中先拿到初步结果，可以试一试酶学检测法、ELISA法、DNA染色法或PCR法。不过需要注意的是，上述检测方法都不能单独检出所有类型的支原体，而且灵敏度也没有分离培养法高，所以最好结合使用两种方法以获得最可靠的检测结果。 02 酶学检测法 酶学检测是将可疑样本添加到特定底物中，在这一体系内支原体的酶可以将ADP转化
