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- 库存:
大量
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12个月
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 保存条件:
低温避光
- 规格:
120T
产品简介:
总蛋白(Total Protein,TP)由白蛋白和球蛋白组成。对于生物体液(血清、尿液、脑脊液)中总蛋白质含量的测定,一般要基于如下两个假设:1、所有蛋白质分子由纯多肽组成,含氮量的质量百分比为16%;2、体液中含有数百个蛋白质分子,每个分子对测定反应都具有非常相似的特性。目前常用的方法有:双缩脲法、紫外分光光度法、染料结合法、凯氏定氮法、沉淀法等。总蛋白检测试剂盒(双缩脲比吸光度微板法)多用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的总蛋白含量测定,无需与标准品进行比对。双缩脲反应的原理是在呈蓝色的碱性硫酸铜溶液存在的情况下,铜离子与肽键形成有色螯合的铜复合物,呈紫色,所产生的颜色密度与参与反应肽键数成比例,可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。双缩脲比吸光度法是按照Doumas方法所规定的双缩脲试剂、控制反应条件和校准分光光度计的情况下,根据蛋白质双缩脲复合物的比吸光度,无需检测标准品吸光度,直接计算出总蛋白质浓度。本试剂盒120T可检测60个样本,仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
总蛋白检测试剂盒(双缩脲比吸光度微板法)注意事项:
1、 上述计算公式是以所用酶标仪波长准确,带宽≤2nm时,总蛋白含量根据比吸光度直接计算。
2、 如果没有酶标仪,也可以使用分光光度计测定。使用分光光度计测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。检测比色杯准确光径很重要,可用钴盐或进行检测,其吸光度分别为0.556和0.535,如检测的吸光度与实际不符,应进行校正,校正系数F=As/Am。其计算公式为: 总蛋白(g/L)=(Ac/0.298)×51×F
3、 检测中发现所有孔都呈暗紫色,可能原因是样品含有还原剂,应适当透析或稀释样品。
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文献和实验物质浓度。 两点终点法常应用于双试剂的测定项目中,多数第一试剂通常只含缓冲液等成分,它与样本一般不起特异性反应;因此在第二试剂加入前,选择一个测光点作为第一读数点,此时的吸光度相当于样品空白。加入第二试剂后待测物质起反应,并经过一定时间反应到达平衡点,此时选择第二个读数点,两读数点吸光度之差用于计算待测物质浓度。 两点法能有效消除样品溶血、黄疸、脂浊等造成的光吸收干扰。如:酶法测定葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯、尿酸、肌酐,以及化学法测定总蛋白、总胆红素、直接胆红素、钙、磷、镁、铁等;并且都能在加入
大家目前最常用的方法是利用溶液法进行蛋白提取(如 RIPA 裂解液),但是往往会在蛋白质提取中产生两个不同的组分,即 RIPA 可溶性和 RIPA 不可溶性组分。通常 RIPA 不可溶性组分被我们直接丢弃忽略。但是已经有文章证实许多蛋白质存在于被丢弃的 RIPA 不可溶性组分中。也就是说利用溶液法提取的并非是完整的总蛋白,而仅仅是一些可溶性蛋白。溶液法进行提取蛋白时会人工激活 caspase-3 和 caspase-7;还会人工激活某些激酶活性;影响磷酸化研究;影响细胞外基质;影响定量,定性
【正常值范围】 60~80g/L医学|教育网搜集整理 【临床意义】 增高:高渗性失水,多发性骨髓瘤,阿狄森病,某些急慢性感染所致高球蛋白血症等。减低:慢性肝病,肝硬变,慢性感染,慢性消耗性疾病,长期腹泻,肾病综合征,营养不良等。
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