痰消化液(胰酶消化法）

细胞的原代培养

%胰蛋白酶平衡盐溶液70%乙醇• 器材：灭菌镊子、剪刀若干把灭菌培养皿、细胞培养瓶、小瓶、烧杯若干个吸管若干支酒精灯原代细胞培养方法三、胰酶消化法（1）胰酶消化法操作步骤——取材a. 用颈椎脱位法使孕鼠迅速死亡。b. 把整个孕鼠浸入盛有75%乙醇的烧杯中数秒钟消毒，取出后放在大平皿中携入超净台。c. 用无菌的镊子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用无菌镊子将皮肤扯向后腿。d. 用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部，取出含有胚胎的子宫，置于无菌的培养皿上。e. 剔除胚胎周围的包膜（若胚胎较大，应剪去头、爪

细胞传代方法

贴壁生长细胞传代——采用酶消化法传代。常用的消化液是0.25%胰蛋白酶液。1、将长成单层的细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液（以液面盖住细胞为宜）（我常加1ml），静置5~10分钟。2、在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入3~5ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。3、将细胞悬液吸出2ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养

免疫组织化学抗原修复

免疫组织化学抗原修复 由于石蜡切片标本多数使用甲醛固定，甲醛在组织中所形成的醛键、羧甲基等封闭了部分抗原决定簇，或由于蛋白分子之间的交联而使抗原决定簇隐蔽。因此在染色前有些抗原需要先进行抗原修复或暴露才能使组织中的抗原抗体充分结合，出现理想的染色结果。至于哪种抗原需要进行修复。需在建立染色程序时确定。常用的方法有加热抗原修复法和酶消化法两种。经大量试验验证．加热抗原修复法优于酶消化法，其机制目前仍不清楚，可能是加热打开了组织抗原因甲醛固定所引起的抗原决定簇的交联，因此使免疫