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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
24
- 英文名:
T4 DNA Ligase
- CAS号:
9015-85-4
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
25克/100克/500克/1公斤
T4 DNA连接酶/T4 DNA Ligase;BR,1u/ul;LC1000u,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌;9015-85-4;保存:-20℃
BR,5u/ul;200u,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌;
中文名称:T4 DNA连接酶T4 DNA Ligase品牌
英文名称:T4 DNA Ligase
产品规格:BR,1u/ul
包装:LC1000U
产品规格:BR,5u/ul
包装:200U/1000U
产品规格:BR,30u/ul
包装:HC5000U
CAS号:9015-85-4
分子量:55.3kDa,单体
级别:BR
分子量:55.3kDa,单体
酶活性分析混合物:66mM二钾(PH7.2),1mM CoCL2, 0.01%(v/v) Triton X-100, 10uM oligo(dT)10, 1mM dTTP和0.4MBq/ml[3h]-dTTP
保存液组分:100mM 醋酸钾(PH6.8)、2mM β-巯基,0.01%(v/v) Triton X-100和50%(v/v)甘油
5×反应缓冲液:1M 二钾、125mM Tris,0.05%(v/v) Triton X-100,5mM CoCL2(PH7.2,25℃)
抑制剂:金属螯合剂、铵、氯化物、化物和磷酸盐离子
失活:加入EDTA,70℃加热10分钟
质量保证:测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染
注意:由于含有CoCL2,TdT反应缓冲液不能与下游应用兼容,需采用柱离心法或/抽提及沉淀方法纯化反应混合物,除去CoCL2
性状:悬浮液,重组酶。末端转移酶(Terminal transferase, TdT)是一种无需模板的DNA聚合酶,催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3'端。带有突出、凹陷或平滑末端的单双链DNA分子均可作为TdT的底物。一般操作是:先在载体上打开一单个位点,把它与末端转移酶和某一dNTP(如dATP)一起保温以使添尾,另一待插入的外源DNA段则用互补的用同法添dNTP(dTTP)用同法添尾。接着使上述两种都接上互补单链尾的DNA段彼此退火,使形成一杂合载体来转化受体菌。杂合载体中的裂隙或切口可被受全菌所修复。
用途:生化研究。催化DNA的3'末端添加同聚物;DNA的3'末端标记
保存:-20°C
T4 DNA连接酶T4 DNA Ligase品牌的技术分类:
1. 生化分离与分析技术
光谱技术已从单一的比色法发展为采用分光光度法、透射比浊法、原子吸收和火焰发射光谱法、分子荧光光谱法。分离技术除了一般的离心和超离心技术外,还有层析技术和电泳技术。层析技术包括薄层层析、凝胶层析、离心交换层析、亲和层析、气相层析、高效液相色谱(HPLC)等等。电泳技术中纸电泳、醋酸纤维膜电泳的应用已明显减少,琼脂糖电泳和聚凝胶电泳(PAG)应用增多,目前已有自动电泳仪。
2. 自动分析与酶法分析
近年来我国引进了自动生化分析仪用以监测酶活性,分析的酶范围扩大,测定准确度和精密度提高;同时自动化分析促进了酶法对代谢物测定的研究与应用,许多体内的生化反应被模拟,过去采用强碱、强酸、火焰等比较激烈的化学反应被逐渐取代。离子选择电极的应用日益增多,并作为模块组合参与自动化分析。
3. 免疫化学分析
随着单克隆抗体制备技术的广泛应用,免疫浊度法、酶免疫、荧光免疫、发光免疫等自动化检测技术迅速发展,临床化学、免疫学学科与技术之间的交叉和相互渗透,使越来越多的临床化学检验采用了免疫学技术,如apoA I,apoB等载脂蛋白的测定,脂蛋白(a)测定、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)质量测定等等。
4. 分子生物学技术
在除了对蛋白质、代谢物等分子水平的研究外,采用分子生物学技术进行基因诊断,正趋向于成熟。
β-半乳糖苷酶β-Galactosidase from Escherichia coli多少钱
谷氨酸脱氢酶L-GLDH品牌
核糖核酸酶(牛胰)Ribonuclease from bovine pancreas规格9001-99-4作用;生化研究
核糖核酸酶HRibonulease H型号9050-76-4作用;生化研究
核糖核酸酶T1Ribonulease T1 from Aspergillus oryzae多少钱
葡萄球菌选择性琼脂110号/CHAPMAN琼脂/贝尔德-帕克琼脂110号/Staphylococcus Selective Agar NO.110/Baird Parker Agar NO.110;用于金黄色葡萄球菌的分离培养;250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌;RT;
远藤氏琼脂培养基/LES ENDO琼脂/m-Endo Agar LES/Membrane Endo Agar LES;膜过滤水中大肠杆菌计数;250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌;RT;
MIO培养基/动力吲哚鸟氨酸培养基/MIO Medium;动力、吲哚和鸟氨酸试验;250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌;RT;
D/E中和琼脂/D-E中性琼脂/戴伊恩格利中和琼脂/ D/E Neutralizing Agar;卫生环境中微生物的分离培养, 消毒效果测定;250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌;RT;
V-J琼脂/Vogel-Johnson琼脂/VJ琼脂/伏戈尔约翰逊琼脂/沃格尔约翰逊琼脂/VJ Agar;病源标本和其他标本中甘露醇阳性金黄色葡萄球菌的选择性分离;250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌;RT;
蛋白酶(枯草杆菌)Proteinase(Bacillus subtilis)
乳酸脱氢酶(兔肌)LAD9001-60-9含量:≥98.0%
胶原酶Collagenase from Clostridium histolyticum
透明质酸酶Hyaluronidase from bovine testes37326-33-3含量:≥98.0%
过氧化物酶(辣根)Perxidase(horseradish)含量:≥98.0%
IL36A Protein Mouse 重组小鼠 IL-1F6 / IL-1 epsilon 蛋白
小鼠气管和支气管上皮细胞完全培养基 100mL
SPINK4 Others Mouse 小鼠 SPINK4 人细胞裂解液 (阳性对照)
C2C12小鼠成肌细胞 C2C12 mouse myoblasts DMEM+10%FBS
CL-0313293FT(人胚肾细胞)5×106cells/瓶×2
NCI-H838(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 A9(皮下结缔组织细胞)
CM-R029大鼠肠平滑肌细胞完全培养基100mL
CDH18 Others Cynomolgus 食蟹猴 CDH18 / Cadherin-18 人细胞裂解液 (阳性对照)
人前脂肪细胞-内脏HPA-v
NCI-H1869[H1869]细胞,人肺癌细胞 人膀胱癌细胞,BIU-87细胞 人肝脏间充质干细胞HMSC-hp
水貂肺上皮细胞;Mv.1.Lu(NBL-7)
IgG1 Others Mouse 小鼠 IgG1-Fc 人细胞裂解液 (阳性对照)
T4 DNA连接酶T4 DNA Ligase品牌IL36A Protein Mouse 重组小鼠 IL-1F6 / IL-1 epsilon 蛋白
小鼠气管和支气管上皮细胞完全培养基 100mL
SPINK4 Others Mouse 小鼠 SPINK4 人细胞裂解液 (阳性对照)
C2C12小鼠成肌细胞 C2C12 mouse myoblasts DMEM+10%FBS
CL-0313293FT(人胚肾细胞)5×106cells/瓶×2
NCI-H838(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 A9(皮下结缔组织细胞)
T4 DNA连接酶T4 DNA Ligase品牌公司主营产品:
生化试剂:抗生素、维生素、培养基、染色剂、酶/辅酶、碳水化合物、分离试剂、缓冲试剂、核酸及衍生物、氨基酸/蛋白质等其它生化试剂,我们提供各种L-丙氨酸56-41-7品牌。
分子生物学:核酸电泳、DNA Marker、克隆表达、PCR/Q-PCR、RT-PCR、基因组提取、质粒提取、RNA提取、DNA纯化回收、核酸纯化相关试剂。
细胞培养:血清、培养基、平衡盐溶液、辅助添加试剂、细胞检测试验。
蛋白质研究:蛋白电泳、蛋白提取、蛋白纯化、蛋白定量、组织/蛋白染色。
免疫学:抗体、免疫组化、ELISA、免疫印迹WB
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文献和实验Ligation of DNA with T4 DNA Ligase
recombination and DNA synthesis. DNA ligase from E. coli is a polypeptide with a molecular weight of 74,000 and is NAD-dependent. T4 DNA ligase is the product of gene 30 of the T4 phage, has a molecular weight of 68,000, and is ATP-dependent. Both enzymes
相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶,可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
液: 1X T4 DNA Ligase Buffer: [50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 µg/ml BSA, (pH 7.5 @ 25°C)]。推荐DNA浓度(0.1 - 1 µM 的5′末端)。 使用注意:ATP是反应必须的辅因子。这一点与要求NAD作辅因子的大肠杆菌DNA连接酶不同。 如在反应体系中补加1 mM的ATP,连接反应还可以在NEB提供的四种限制性内切酶缓冲液(NEBuffers)或在T4 DNA多聚
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