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RT 避光
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大量
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
10ml
产品简介:
伊红(Eosin)又称曙红,属人工合成染料中的呫吨类染料,为桃红色或粉红色的粉末。分子式为C20H6O5Br4Na2,分子量为691.86。
临床上,可通过检测精子膜的完整性来评价精子的存活率,用精子活体染色液(伊红法)可以常规检测所有精子标本的存活率,通过染料拒染法来鉴别细胞膜完整的精子,从而得出活精子的百分率。该染色液由伊红、去离子水等组成,利用了染料拒染原理,即相关基于损伤的细胞膜,如在非活的(死)细胞上的膜,允许非透过膜性染料可进入膜内染色;而活细胞的细胞膜能够抗拒染料进入,所以产生拒染现象,不着色。该染色液液仅适用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
精子活体染色液(伊红法)注意事项:
精液标本一旦液化应立即检测精子存活率,在30min内,在任何情况下都不能超过1h,以免因脱水或温度变化导致精子失活而使染色检测结果不准。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验成分 蛋白胨 10g 乳糖 10g 磷酸氢二钾 2g 琼脂 17g 2%伊红Y溶液 20mL 0.65%美蓝溶液 10mL 蒸馏水 1000mL pH7.1 制法 将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正PH,分装于烧瓶内,121℃
福尔马林固定30min;3.用蒸馏水漂洗1次,再用蒸馏水稀释的苏木精液(1/20)染10min;4.先用自来水冲洗几次,而后置入1%NaHCO3液中漂洗至蓝紫色;5.在放入伊红水溶液中染30s-1min;6.用蒸馏水冲洗,迅速通过丙酮2次,每次3-5min;7.通过2:1丙酮/二甲苯3次,每次1-2min;8.通过1:2丙酮/二甲苯3次,每次1-2min;9.放入纯二甲苯5-10min,用光学树脂封片后观察10.把盖片置载物玻片上,令小盖片细胞面向上,用树胶封存,再覆以较大盖片; 结果:原代
不匀或过淡,过深等现象,因此分化后一定要镜检,观察胞核是否清晰,胞浆呈淡白色。否则需再次分化,不然一旦复染后,组织会呈紫蓝色即“蓝盖红”现象。 5.还原液不宜过浓,若碱性太强易使组织脱落故以淡为宜。 6.伊红宜淡染,复染过深胞核会不清晰,影响镜检。 7.若脱水,透明等步骤不够彻底,则组织表面会有一层雾状膜。若有这一现象,应立即更换纯酒精脱水,再次透明。在潮湿的季节里应注意酒精的浓度、若降低要及时更换。 8.染色后的组织切片、要将组织四周的污染物痕迹擦掉,以免影响美观
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