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- JC9196
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 库存：
大量
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 规格：
50T
线粒体是细胞呼吸的主要场所，细胞活动所需的能量主要由在线粒体内进行的氧化所产生的能量来供应。制备线粒体的关键是保持线粒体的完整性和纯度，可通过分级分离法获得，即先低俗出去细胞核以及细胞碎片，再进行高速梯度离心分离线粒体。
自备材料：
低温离心机、匀浆器
尼龙网或细胞筛
注意事项：
试剂 (如PMSF)对于不同实验不必全部使用，在实验条件成熟后可以不必使用。
如果不是用于制备线粒体蛋白，Mitochondria Lysis buffer和Mitochondria Stock buffer不必加入PMSF。如果用于制备线粒体蛋白样品，Mitochondria Lysis buffer和Mitochondria Stock buffer需添加PMSF。PMSF一定要在试剂加入到样品中前1～2min内加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。
分离线粒体的所有步骤均需在冰上或4℃进行，所用溶液需冰浴或4℃预冷，全部操作时间尽量控制在1h以内。
通常在分离线粒体时前后两次离心速度选取1000g和12000g，如果希望纯度更高，但对线粒体的得率要求不高，前后两次离心速度可用2000g和6000g。
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文献和实验sumu2006 我买了细胞线粒体分离试剂盒，想用于分离血小板线粒体。 查文献发现有专门的血小板线粒体分离试剂盒。 不想浪费之前的试剂盒，不知能否用于血小板，哪位高人可以指点下？ 万分感谢！ Fasta921 两种试剂盒方法比较一下。 再根据血小板小，无核等特点作出修改！ dpw147 楼主你好，我想知道，你搞明白细胞的和血小板的线粒体分离试剂盒是否一样可用
从单个小鼠肿瘤样本中分选高纯度、高活性 TIL 细胞亚群的完整工作流程
TIL 细胞分选工作流程，解决实验瓶颈：即如何将小鼠肿瘤组织高效的分离成单细胞悬液、磁珠预富集 CD45+ TIL 细胞，然后从同一样品中依次分选高纯度和高活性的 TIL 细胞亚群。 分离高纯度、高活性的 TIL 细胞亚群的工作流程 1. 肿瘤分离 利用带有加热装置的八通道全自动组织解离器 gentleMACSTM Octo 和小鼠肿瘤分离试剂盒分离 1g 小鼠肿瘤组织。 2. CD45+ TIL 的免疫磁性预富集 为了提高目标 TIL 细胞的频率及纯度，从肿瘤分离出来的单细胞悬浮液中， TIL
液层和红细胞层（见图1）。 图1 稀释脐带血离心前后的分层状态图 5） 向离心管中加入10mL 的RPMI 1640培养基洗涤细胞，250g，室温离心 10min ，弃上清。重复该步骤 1~2 次，即可用于后续试验。 3 注意事项 1） 血液新鲜程度是影响分离效果的关键因素，请尽量使用采集后24h内的血液进行CBMC分离。 2） 为保证细胞的活力，整个操作过程请轻柔，避免对细胞造成机械性的损伤。 3） 为保持细胞状态良好，请尽量缩短整个试验的周期。 4 脐带血单个核细胞分离试剂盒
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