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现货
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Corning
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432006
| CoolCell FTS30 程序降温盒,可容纳 30个1.0/2.0mL冻存管,紫色;外径x 高度16.5 x 11.5 cm,孔直径 12.3 mm |
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文献和实验推荐使用程序降温盒,分装好的冻存管转入程序降温盒后直接放入-80℃冰箱过夜; 7、 如没有程序降温盒,则按下列顺序依次降温:室温→4℃ 20min→-20℃ 30min→-80℃过夜→液氮保存,注意转移过程中要保冷,避免产生温差或冻存管融化; 8、 从-80℃冰箱取出冻存管迅速转移到液氮长期保存。 注意事项: 1、 DMSO配制的时候会放热,一定要等冻存液冷却后使用,避免灼伤细胞; 2、 细胞离心后尽量吸干净上清液,减少培养基残留,避免稀释冻存液; 3、 不建议手动梯度降温,温度不稳定,容易
g,5 分钟)。2.去上清液,加入含 20% 以上小牛血清的完全培养基或血清,于 4℃ 预冷 15 分钟后,加入 10% 的 DMSO,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,分装于细胞冻存管,细胞浓度为 3×106~1×107 /ml 之间。3.将上述细胞分装于冻存管中,将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记 (日期、细胞种类及代次、冻存支数)。4.先将冻存管置入置于 4℃ 30 min,再转入- 20℃ 2 h 后,再放入- 80℃ 冰箱冷冻过夜,次日保存到液氮罐中。目前更多使用程序降温盒
条件下 220g 离心 5min。 19、将类器官沉淀重悬于 700μl 预冷的 DMEM / F12中,使用移液器吹打数次,机械地破坏类器官。 20、将所得细胞悬液重复 8-12 步骤,完成传代。 类器官冻存 21、取 1-4 个孔的类器官,消化离心后取细胞沉淀,加入 1ml 细胞冻存液。 22、将细胞重悬后转移至冻存管中,利用程序降温盒缓慢降温至 -80℃。 23、第二天,将样品转移到液氮中长期储存。 类器官复苏 24、将液氮冻存的 OC 类器官放置在 37℃ 水浴锅中进行解冻,水浴
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