酶抑制剂(Inhibitor Cocktails)

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  • 2025年12月29日
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    酶抑制剂(Inhibitor Cocktails)产品专题
    关键词:蛋白酶抑制剂;CocktailAEBSFAprotininBestatinE-64LeupeptinPepstatin A;磷酸酶抑制剂;磷酸化
     
    1. 蛋白酶抑制剂Cocktail (不含EDTA100X DMSO储液)
    背景知识:
    内源蛋白的产生和降解一般都维持在一个平衡状态,因此在稳定的环境因素下细胞内的蛋白含量是也是稳定的。但是在体外研究中,蛋白合成过程终止,而降解大大增强,从而影响蛋白得率。因此我们建议使用多种小分子组成的抑制剂混合物来抑制蛋白酶的功能,阻止蛋白降解情况的发生。
    产品成分:
    成分 浓度 靶点
    AEBSF 104 mM Serine proteases
    Aprotinin 80 μM Serine proteases
    Bestatin 5 mM Aminopeptidases
    E-64 1.5 mM Cysteine proteases
    Leupeptin 2 mM Serine and cysteine proteases
    Pepstatin A 1.5 mM Aspartic proteases
    产品细节
    描述: 6种广谱蛋白酶抑制剂的混合物,保护蛋白完整性
    运输条件: 蓝冰运输
    注意点: 传统的蛋白酶抑制剂(E-64, AEBSF, bestatin, leupeptin and aprotinin)是不能够抑制某些去泛素化(DUB)蛋白酶(例如ATAXIN-3)的功能的。(参考文献: Neil D. Rawlings, Guy Salvesen et al. Handbook of Proteolytic Enzymes,Vol.1, 2012).

    储存条件:
    产品应保存于-20°C,有效期2年。使用时请室温放置,用完立即放回-20°C

    应用领域:
    蛋白纯化,蛋白免疫印迹, 免疫()沉淀,蛋白质pull-down实验,免疫荧光,免疫组织化学,激酶测定等。

    使用方法:
    在室温下溶解DMSO储液, 在您的实验体系中,按照1100的比率(体积比体积)将抑制剂cocktail加入到样品溶液中(比如细胞裂解液或者组织抽提物)



     
    1. 蛋白酶抑制剂Cocktail (不含EDTA, mini片剂) 
    产品描述:
    内源蛋白的产生和降解一般都维持在一个平衡状态,因此在稳定的环境因素下细胞内的蛋白含量是也是稳定的。但是在体外研究中,蛋白合成过程终止,而降解大大增强,从而影响蛋白得率。因此我们建议使用多种小分子组成的抑制剂混合物来抑制蛋白酶的功能,阻止蛋白降解情况的发生。通常来讲,蛋白酶抑制剂Cocktail应用于哺乳动物裂解液或组织提取液,用以增加蛋白稳定性。如果没有Cocktail保护,样品中存在的蛋白酶将会降解包括磷酸化蛋白在内的全部蛋白。蛋白酶抑制剂Cocktail是含有5种广谱蛋白酶抑制剂的混合物,能有效保护蛋白完整性。

    产品组成:
    组分 靶点 类型
    AEBSF Serine proteases Irreversible
    Aprotinin Serine proteases Reversible
    Bestatin Aminopeptidases Reversible
    E-64 Cysteine proteases Irreversible
    Leupeptin Serine and cysteine proteases Reversible

    储存条件:
    产品应保存于4°C,有效期2年。

    注意:
    1. 若想加快片剂在溶液中的溶解速度,可以简短地旋涡振荡。
    2. 某些DUB蛋白酶(例如ATAXIN-3)无法被常见的蛋白酶抑制剂抑制,例如E-64,AEBSF,bestatin,leupeptinAprotinin(Reference: Neil D. Rawlings, Guy Salvesen et al. Handbook of Proteolytic Enzymes, Vol.1, 2012)

    实验方法:
    1. 本产品适用于Western Blot, Co-IP, pull-down, IF, IHC, kinase assay等实验。
    2. mini片剂可直接加入到细胞裂解液中,1片对应体积为10 ml。另一种用法是用1 mL ddH2O溶解1mini片剂配成10X的贮液备用。这种贮液在4°C可以放置1周以上,在-20°C可以放置4周以上。溶解时,简短地旋涡振荡可加速药片溶解。
     

    1. 磷酸酶抑制剂Cocktail100X
    产品描述
    对蛋白的磷酸化修饰的保护而言,更多组分抑制剂意味着更好的效果。因此,我们提供了两管共8种抑制剂的磷酸酶抑制剂产品。在细胞的信号传导、代谢状态研究中,蛋白和脂类的磷酸化是重要的标志物。数十年来,研究人员在体外实验中采用比较容易得到的磷酸根类似物(A管)来阻止磷酸化状态丢失。而近年来,新发现了一批天然产物(B管)是很有潜力的磷酸酶抑制剂,增加了磷酸化保护范围。磷酸酶抑制剂CocktailA+B两类抑制剂类型组成,为您提供全面的protein磷酸化保护。

    产品组成
     
    管号 成分 浓度(100x 靶点
    A () Sodium Fluoride 100 mM Acid phosphatases
    Sodium Orthovanadate 100 mM Alkaline phosphatases, PTPs, ATPases
    Sodium Tartrate 400 mM Acid phosphatases
    Sodium Molybdate 115 mM Acid and phosphoprotein phosphatases
    Imidazole 200 mM Alkaline phosphatases
    B (DMSO) (-)-p-Bromotetramisole oxalate 2.5 mM Alkaline phosphatases
    Cantharidin 500 μM Ser/Thr phosphatases
    Microcystin LR, Microcystis aeruginosa 500 nM PP1 and PP2A
     
    1. 可以兼容常用的去垢剂如 1% SDS, Triton, NP-40
    2. DTT, EDTA and EGTA 可能会降低 Sodium Orthovanadate的保护活性。

    储存条件
    本产品保存在-20°C, 可稳定存放2年。若保存于2-8°C,可稳定存放2个月。

    实验方法
    应用领域:Western Blot analysis, Co-IP, pull-down, IF, IHC, kinase assay and etc.
    操作方法:将产品于室温融化。在相应的实验开始前,1:100(v/v)的稀释比将其加入相应的溶液中(如细胞裂解液或组织提取液)。分步加入AB: 先加A管,混匀;再加B管,再一次混匀。
    注意
    为更好地保护磷酸化的蛋白和脂类,我们建议同时使用A管和B管,因为这些抑制剂cocktail分别针对不同的磷酸酶家族,两管共用具有对磷酸化的协同稳定作用。

    磷酸酶抑制剂不含蛋白酶抑制剂,因此我们建议在使用它的同时要加入蛋白酶抑制剂。
     
    1. 去乙酰化酶抑制剂Cocktail  (100X  70% DMSO储液)
    产品描述
    去乙酰化酶抑制剂Cocktail 100X)用于维持组蛋白和其它非组蛋白乙酰化状态。去乙酰化酶抑制剂Cocktail 是设计保存蛋白的乙酰化状态的化学物质组合。赖氨酸乙酰化是一种重要的翻译后修饰可影响蛋白质的转录、细胞周期、信号转导途径。乙酰转移酶和去乙酰化酶平衡可以影响染色质凝聚,转录因子的活性和蛋白质的聚集。脱抑制鸡尾酒是研究这些重要生物学通路的一个有用工具。
    成分 M.Wt 浓度100× 靶点
    Trichostatin A 302.37 40 μM Class I/II HDAC
    EX-527 248.71 1 mM SIRT
    Nicotinamide 122.12 400 mM Class III HDAC
    Sodium Butyrate 110.09 200 mM Class I/II HDAC

    储存条件
    本产品保存在-20°C, 可稳定存放1年。

    实验方法
    该产品可用于免疫印迹免疫荧光Flow Cytometry
    在室温下解冻,加入1:100v/v)稀释培养基孵育时间,推荐测定前放置16-48小时
    在进行western blotting时,推荐同时加入蛋白酶抑制剂

    220ul+1ml  2个包装
    2+10个片剂 2个包装
    产品 规格 单价  
    蛋白酶抑制剂Cocktail
    (不含EDTA100X DMSO储液)
    200uL(可加入到20ml溶液) 68  
    蛋白酶抑制剂Cocktail
    (不含EDTA100X DMSO储液)
    1ml(可加入到100ml溶液) 258  
    蛋白酶抑制剂Cocktail
    (不含EDTA, mini片剂)
    2 pcs(可加入到20ml溶液) 78  
    蛋白酶抑制剂Cocktail
    (不含EDTA, mini片剂)
    10 pcs(可加入到100ml溶液) 280  
    磷酸酶抑制剂Cocktail100X 200uL A+200uL B 68  
    磷酸酶抑制剂Cocktail100X 1 mL A + 1mL B 258  
    去乙酰化酶抑制剂Cocktail  (100X 70% DMSO储液) 200uL(可加入到20ml溶液) 68  
    去乙酰化酶抑制剂Cocktail  (100X 70% DMSO储液) 1ml(可加入到100ml溶液) 258  

     

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