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通过对常规孔雀石绿测定方法的优化,本试剂盒具有以下优势:
无放射性操作
方便的一步试剂,无需混合
非常稳定,保质期长:+ 4°C时> 6个月
灵敏度极佳:100μl体系10 pmol
可用于比色皿(1ml体系)或微孔板(100 μl反应)分析,是高通量应用的理想选择
简单而完整的试剂盒,配有标准磷酸盐溶液,用于分析校准
试剂盒内含有1ml标准磷酸盐溶液(phosphate standard ),用于标准曲线的制作.
References:
1. B. Martin et al. J. Biol. Chem. 1985 260 14932
2. K.W. Harder et al. Biochem. J. 1994 298 395
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试剂盒组成:
13001 MGTM孔雀石绿试剂
保存: 4°C. 长期 –70°C.
体积: 25 ml
13002 标准磷酸盐溶液(PHOSPHATE STANDARD)
浓度: 800 μM phosphate(水溶)
保存: 4 or -20°C
体积: 1 ml
13003 ½-Volume 96-well microplate
数量:2 Plate
测定方法:比色检测,HTS
应用:主要用于蛋白质磷酸酶测定。包括磷脂磷酸酶,酪氨酰-tRNA合成酶(与焦磷酸酶偶联)和病毒RNA三磷酸酶的测定。
运输:常温
长期储存:+ 4℃下
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文献和实验。必须注意,蛋白质溶液应绝对澄清无细小微粒,否则应先用微孔滤膜或超速离心除去。 一般情况下应避免磷酸根离子和硼酸根离子的存在,因为它们都可吸附于颗粒表面而减弱胶体金对蛋白质的吸附。 2、蛋白质最适用量的选择:将待标记的蛋白质储存液作系列稀释后,分别取0.1ml(含蛋白质5~40ug)加到 1ml胶体金溶液中,另设一管不加蛋白质的对照管,5分钟后加入0.1ml 10%NaCl溶液,混匀后静置2小时,不稳定的金溶胶将发生聚沉,能使胶体金稳定的最适蛋白量再加10%即为最佳标记蛋白量。 3、标记
。 一般情况下应避免磷酸根离子和硼酸根离子的存在,因为它们都可吸附于颗粒表面而减弱胶体金对蛋白质的吸附。2、蛋白质最适用量的选择:将待标记的蛋白质储存液作系列稀释后,分别取0.1ml(含蛋白质5~40ug)加到 1ml胶体金溶液中,另设一管不加蛋白质的对照管,5分钟后加入0.1ml 10%NaCl溶液,混匀后静置2小时,不稳定的金溶胶将发生聚沉,能使胶体金稳定的最适蛋白量再加10%即为最佳标记蛋白量。3、标记:在接近并略为高于蛋白质等电点的条件下标记是比较合适的,在此情况下蛋白质分子在金颗粒表面的吸附
排斥时,血清Cystatin C增高也明显早于肌酐清除率。因此,血清Cystatin C有可能取代操作较为复杂的Ccr用于评价肾小球滤过功能。 6、评价与问题 ⑴新生儿血清Cystatin C浓度略高于成年人,0~4个月为0.8~2.3mg/L,5个月~13岁接近于成人。 ⑵由于血清Cystatin C测定试剂盒未完全推广,一些实验室尚未开展本试验。 肾小管功能试验 编辑本段 回目录 肾小管功能主要是重吸收和排泌。肾小管的重吸收作用主要
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