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大量
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辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒
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12个月
- 供应商:
上海信裕生物科技有限公司
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阴凉干燥
- 规格:
50管/48样
辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒
价格 : 询价
规格 : 100管/48样
测试方法:微量法
测定意义
辅酶ⅡNADP(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NADP+和NADPH含量测定可以计算NADP(NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值,其变化与磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应密切相关。NADPH/NADP+比值不仅是细胞氧化还原态的主要标志之一,而且在PPP途径、生物合成和抗氧化代谢中具有重要调控作用。
辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒测定原理
分别用酸性和碱性提取液提取样品中NADP+和NADPH。NADPH通过PMS的递氢作用,使氧化型噻唑蓝(MTT)还原为甲瓒,570nm下检测吸光值,从而测定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原NADP+为NADPH,从而检测NADP+含量。
所需的仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
标准品的制备(一)标准物质应具备的条件
必备的主要条件 ①纯度高;②定值准确可靠;③稳定性好,在保管、使用有效期内其示值误差不超出证书的许可范围;④均一性好,任何一份分装的小样品都具备整个标准物质的特性指 标。
附加条件 ①摩尔质量尽可能大;②具有符合使用目的之反应特性;③制造简便,价格低廉,购买方便;④标准物质的组成若发生变化(如吸潮)时,可采用重新干燥(恒重)等措施使其复原。
(二)标准液的配制
标准液配制的依据 供临床生化常规测定用的标准液属于二级标准物质,其示值的准确性对检验质量有重大影响,必须在标准物质选择、恒重方法程序、基质(包括水)的质量、最优化的配方和制备工艺上都要严格按照我国卫生部医政司主持编写修订的《全国临床检验操作规程》(1997 年 5月,第二版)的要求进行。
标准液的质量鉴定 不论是实验室自行配制或厂家生产的标准液,都需要认真地按照国家卫生部的规定做好质量检定。提出的规范化的要求和质量检定标准,并在标准液制备过程中应该严格检定程序,使其达到质量标准。
(三)标准液的正确使用
应采购诊断试剂正规生产厂家生产的商品标准液,尤其有国家卫生部生产文号的产品。
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文献和实验与残渣重量之差,计算粗脂肪含量。由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外,还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质,因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪。三、实验材料、主要仪器和试剂1.实验材料油料作物种子、中速滤纸 2.仪器: (1)索氏脂肪抽提器(图1)或YG-Ⅱ型油分测定器 (2)干燥器(直径15-18cm,盛变色硅胶)(3)不锈钢镊子(长20cm)(4)培养皿(5)分析天平(感量
漏斗冲入100mL 容量瓶中,加水达70-80mL,摇匀后置于80℃恒温水浴上浸提0.5h。 待上述样品冷却后,沉淀蛋白质,加入5%硫酸锌5mL,再慢慢滴入0.3mol/L Ba(OH)2 5mL,以沉淀蛋白质。振荡后静置,至上层出现清液后再加一滴Ba(OH)2,直至无白色沉淀时,向容量瓶加水至刻度。 3.还原糖含量的测定: 过滤上述已定容的样品液,取5mL 滤液,再定容到100mL(此步视样品的含糖量而定)。取已稀释的溶液2mL,与标准葡萄糖显色法相同:加铜试剂2mL,煮沸10min,加砷钼
1.84); (2)9.2mol/L HClO4; (3)2%蒽酮试剂:同蒽酮法(或9%苯酚,同方法一); (4)淀粉标准液:准确称取100mg纯淀粉,放入100ml容量瓶中,加60~70ml热蒸馏水,放入沸水浴中煮沸0.5h,冷却后加蒸馏水稀释至刻度,则每ml含淀粉1mg,吸取此液5.0ml,加蒸馏水稀释至50ml,即为每ml含淀粉100μg的标准液。 【方法】 1.标准曲线制作 取小试管11支从0~10编号,按表24-3加入
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