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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
详见说明书
- 亚型:
IgG
- 形态:
Lyophilized or Liquid
- 保存条件:
避光-20℃,保存一年
- 克隆性:
详询
- 标记物:
详询(烜雅可供应生物素、酶、荧光素标记的抗体)
- 适应物种:
h,m,r
- 保质期:
一年
- 抗原来源:
Polypeptide
- 目录编号:
XY-KT-3389
- 级别:
生产厂家
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 宿主:
Rabbit,mouse
- 应用范围:
ih,wb
- 浓度:
1mg/ml
- 靶点:
详见说明书
- 抗体英文名:
Caspase-8(p20)
- 抗体名:
Caspase-8(p20)
- 规格:
100-200ul
[产品简介]
下面是我公司为研究者们总结出的Caspase-8(p20)抗体实验遇到的常见问题
FISH常见问题
消化不足
表现:细胞成块,没有清楚的边界;信号弱,可见细胞间连接物。解决:检查酶溶液的温度并增加消化时间;检查预处理液的温度并增加预处理的时间。
过消化

表现:没有清楚的细胞边界,细胞形态被破坏;可能有弱的或缺失的信号;荧光背景高。解决:检查酶溶液的温度并减少消化时间;检查预处理液的温度并减少预处理的时间。
过预处理
表现:没有清楚的细胞边界,具不规则的细胞形态;可能有弱的或缺失的信号。解决:检查酶溶液的温度并减少消化时间;检查预处理液的温度并减少预处理的时间。
杂交时间不当
表现:形态正常、信号弱;解决:增加杂交时间;检查探针量;检查杂交后洗脱条件。
背景高
原因:杂交后洗脱不充分。解决:检查洗脱液的温度。
信号强度变化
原因:由于气泡造成的探针不均匀分布。解决:重复实验并确认杂交期间盖玻片下无气泡;在探针混合物的第一接触面加盖盖玻片。组织掉片或组织形态分解
原因:组织固定不足;使用不恰当的玻片;不正确的烤片;移除盖玻片时组织被撕掉;过消化;过预处理。解决:校验固定条件;使用正确的玻片;校验烤片条件;泡更长的时间使盖玻片脱落。
过变性
表现:线状信号。解决:检查变性的时间和温度。无/弱信号
| 可能的原因 | 推荐的解决方案 |
| 未添加探针(别笑,特别是探针和杂交缓冲液分开的非预混情况) | 探针充分解冻,确保移液器吸取到探针试剂。 |
| 探针、杂交缓冲液使用前没有充分混匀(非预混探针) | 吹打探针混合液,使探针充分混匀,短暂离心。 |
| 探针添加数量不足 | 确保移液器吸取准确,探针加入量足量,请不要稀释探针(包括预混和非预混)。 使用前确保探针解冻充分并达到室温。 |
| 标本及探针变性不充分 | 确保玻片进行变性时温度在推荐的温度。 将玻片变性时间延长2~4分钟。 |
| 标本及探针变性不充分 | 确保玻片进行变性时温度在推荐的温度。 将玻片变性时间延长2~4分钟。 |
| 杂交条件不合适 | 确保遵守杂交所规定的时间和温度。 橡皮胶封片时勿留缝隙。 根据情况,调整杂交时间(跨度一般较大)和湿度。 |
| 杂交时盖玻片下有气泡形成 | 放盖玻片时要覆盖探针表面,轻轻挤压以便挤出气泡。 |
| 玻片干燥不充分 | 探针滴加至玻片前,确保玻片上的乙醇溶液已经完全挥发。 |
| 探针干燥太快 | 探针滴加后应立即将盖玻片覆盖目标区域。 进行洗脱时,一次只能移除一张玻片上的盖玻片,并且在移除下一张之前立即将玻片浸入洗脱液中。 |
| 洗脱液或洗脱条件不正确 | 确保按照产品说明书要求配制洗脱液(生产商提供洗脱液的除外)。 确保洗脱液的温度达到洗脱步骤所规定温度。 玻片浸入洗脱液前移去盖玻片。 |
| 探针或标本玻片储存不正确 | 确保探针-20℃避光保存。 将未杂交玻片干燥后置于-20℃长期保存或者室温短期保存(一般不超过两星期)。 将杂交后玻片置于-20℃避光保存。 |
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Quantification of Active Caspase-3 and Active Caspase-8 in Microglia Cells
During microglia activation the levels of active caspase-3, caspase-7 and caspase-8 are increased, which leads to the transcription of proinflammatory cytokines and factors. As such, the induction of caspase activity in microglia can be used
一 caspase家族蛋白酶的组成 未活化的caspase家族蛋白酶是以酶原形式存在的,酶原的氨基端有一段被称为“原结构域”(pro-domain)的序列。酶原活化时不但要将原结构域切除,并且要将剩余部分剪切成一大一小两个亚基,分别称为P20和P10,活性酶就是由这两种亚基以(P20/P10)2的形式组成的。这种活化反应也是Asp特异的,剪切发生在酶原中保守序列的Asp与其后的氨基酸残基
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