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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
详见说明书
- 亚型:
IgG
- 形态:
Lyophilized or Liquid
- 保存条件:
避光-20℃,保存一年
- 克隆性:
详询
- 标记物:
详询(烜雅可供应生物素、酶、荧光素标记的抗体)
- 适应物种:
h,m,r
- 保质期:
一年
- 抗原来源:
Polypeptide
- 目录编号:
XY-KT-3307
- 级别:
生产厂家
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 宿主:
Rabbit,mouse
- 应用范围:
ih,wb
- 浓度:
1mg/ml
- 靶点:
详见说明书
- 抗体英文名:
GRP78 (HSPA5)
- 抗体名:
GRP78 (HSPA5)
- 规格:
100-200ul
[产品简介]
下面是我公司为研究者们总结出的GRP78 (HSPA5)抗体实验遇到的常见问题
FISH常见问题
消化不足
表现:细胞成块,没有清楚的边界;信号弱,可见细胞间连接物。解决:检查酶溶液的温度并增加消化时间;检查预处理液的温度并增加预处理的时间。
过消化

表现:没有清楚的细胞边界,细胞形态被破坏;可能有弱的或缺失的信号;荧光背景高。解决:检查酶溶液的温度并减少消化时间;检查预处理液的温度并减少预处理的时间。
过预处理
表现:没有清楚的细胞边界,具不规则的细胞形态;可能有弱的或缺失的信号。解决:检查酶溶液的温度并减少消化时间;检查预处理液的温度并减少预处理的时间。
杂交时间不当
表现:形态正常、信号弱;解决:增加杂交时间;检查探针量;检查杂交后洗脱条件。
背景高
原因:杂交后洗脱不充分。解决:检查洗脱液的温度。
信号强度变化
原因:由于气泡造成的探针不均匀分布。解决:重复实验并确认杂交期间盖玻片下无气泡;在探针混合物的第一接触面加盖盖玻片。组织掉片或组织形态分解
原因:组织固定不足;使用不恰当的玻片;不正确的烤片;移除盖玻片时组织被撕掉;过消化;过预处理。解决:校验固定条件;使用正确的玻片;校验烤片条件;泡更长的时间使盖玻片脱落。
过变性
表现:线状信号。解决:检查变性的时间和温度。无/弱信号
| 可能的原因 | 推荐的解决方案 |
| 未添加探针(别笑,特别是探针和杂交缓冲液分开的非预混情况) | 探针充分解冻,确保移液器吸取到探针试剂。 |
| 探针、杂交缓冲液使用前没有充分混匀(非预混探针) | 吹打探针混合液,使探针充分混匀,短暂离心。 |
| 探针添加数量不足 | 确保移液器吸取准确,探针加入量足量,请不要稀释探针(包括预混和非预混)。 使用前确保探针解冻充分并达到室温。 |
| 标本及探针变性不充分 | 确保玻片进行变性时温度在推荐的温度。 将玻片变性时间延长2~4分钟。 |
| 标本及探针变性不充分 | 确保玻片进行变性时温度在推荐的温度。 将玻片变性时间延长2~4分钟。 |
| 杂交条件不合适 | 确保遵守杂交所规定的时间和温度。 橡皮胶封片时勿留缝隙。 根据情况,调整杂交时间(跨度一般较大)和湿度。 |
| 杂交时盖玻片下有气泡形成 | 放盖玻片时要覆盖探针表面,轻轻挤压以便挤出气泡。 |
| 玻片干燥不充分 | 探针滴加至玻片前,确保玻片上的乙醇溶液已经完全挥发。 |
| 探针干燥太快 | 探针滴加后应立即将盖玻片覆盖目标区域。 进行洗脱时,一次只能移除一张玻片上的盖玻片,并且在移除下一张之前立即将玻片浸入洗脱液中。 |
| 洗脱液或洗脱条件不正确 | 确保按照产品说明书要求配制洗脱液(生产商提供洗脱液的除外)。 确保洗脱液的温度达到洗脱步骤所规定温度。 玻片浸入洗脱液前移去盖玻片。 |
| 探针或标本玻片储存不正确 | 确保探针-20℃避光保存。 将未杂交玻片干燥后置于-20℃长期保存或者室温短期保存(一般不超过两星期)。 将杂交后玻片置于-20℃避光保存。 |
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文献和实验with chaperones in these cells is of interest. Furthermore, Pb and Cu bind strongly to the molecular chaperone heat shock 70 kDa protein Hspa5, also known as glucose-regulated protein 78 (Grp78) or immunoglobulin-binding protein (BiP). This chapter describes
【求助】谁有关于GRP78或者ER stress 相关的信号通路图?
syo820924 急需,谢谢共享! liuxin20040601 从文献上下的图片 liuxin20040601 还有一张。 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号:shixiongcoming
化。BAPTA的pKa3为5.47,pKa4为6.36。这个特点显示了去质子化的步骤并不包含在Ca的螯合步骤中。由于不受质子的干扰,它的螯合率比EGTA要高很多。BAPTA-AM是BAPTA的乙酰甲酯衍生物,通过AM法,能被轻易负载到细胞中。BAPTA-AM对于细胞内钙离子的监控是非常有用的。 kaige88 葡萄糖调节蛋白(glucose regulated proteins, GRPs)是内质网中一类重要的驻留蛋白,包括GRP78和GRP94。 GRP
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