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外泌体浓缩试剂盒(细胞培养上清)

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  • 钰博生物
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  • 中国/美国
  • 2025年07月13日
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    • 英文名

      外泌体浓缩试剂盒(细胞培养上清)

    • 保质期

      12个月

    • 供应商

      上海钰博生物科技有限公司

    • 保存条件

      2-8℃下保存

    • 规格

    外泌体浓缩试剂盒(细胞培养上清)产品介绍
    密度超速离心作为传统并有效的外泌体分离方法,其复杂的操作流程昂贵的仪器设备,限制了外泌体的常规研究。通过多聚物沉淀细胞培养液中的外泌体,一般均需要较高转速离心才能将外泌体沉降下来,限制了大体积样本中外泌体的沉淀或富集润基生物研制的外泌体浓缩试剂盒是利用专门设计和表面修饰的树脂来捕获(浓缩)样本中外泌体的,根据外泌体的结构特点,树脂可快速和有效地与外泌体结合,进而分离(浓缩)样本中外泌体,应用洗脱液可洗脱得到完整的外泌体,同时可去除细胞培养上清或尿液样本中小分子和离子。
    此试剂盒有不同规格的浓缩柱,一次可处理5ml10ml40ml样本,可达到至少40倍的外泌体浓缩此种方法操作简单,适合常规实验室的外泌体研究,有广泛的下游应用,如粒径分析,核酸提取,Western BlotELISA等,也可以进一步对外泌体纯化,如抗体偶联磁珠外泌体捕获和分离试剂盒(Cat.#EXOMBoCU-xx)或外泌体提取和纯化试剂盒(Cat.#EXORGxxCU-1)。

    外泌体浓缩试剂盒(细胞培养上清)保存与应用
    【保存条件】
    本试剂盒室温下运输,室温或 2-8℃下保存 12 个月按照试剂盒不同成分分别保存,使用前请充分混匀。
    【应用范围】
    本产品只用于科学研究,不能用于临床诊断
    本试剂盒提取的外泌体可用于 NTA 粒径分析,Western Blot,核酸提取及其后续分析(Q-PCR,测序等不建议用于外泌体标记和蛋白质质谱分析等。
    外泌体浓缩试剂盒(细胞培养上清)产品介绍
    外泌体(Exosome)是由不同细胞分泌的直径 30-150nm 的胞外膜性囊泡
    Extrocellular VisiclesEVs。外泌体普遍存在于多种体液中,其内容物丰富,包括蛋白质、脂质和核酸等,在细胞间信息交流中发挥着重要作用,主要参与免疫抗原呈递,神经递质传递,脂类代谢及细胞信号转导等过程,并与多种疾病的发生、发展、治疗及预后密切相关。
    密度超速离心作为传统并有效的外泌体分离方法,但其复杂的操作流程,昂贵的仪器设备,限制了外泌体的常规研究。本公司研制一种外泌体提取试剂,通过优化多聚物混合物与样品混合,经离心可将外泌体沉淀富集,其操作简单,用时短,结果稳定,污染蛋白含量较少,只需普通离心机就可以分离得到较纯的完整外泌体。

    外泌体浓缩试剂盒(细胞培养上清)试剂盒组成和说明

    本试剂盒只适用于血清或血浆的外泌体提取。
    成分 Cat# EXORG50A-1 体积 数量 保存条件
    外泌体提取试剂(Exosome Extraction Reagent 10ml 50 2-8
    样品稀释液(Sample Solution 20ml -- 2-8
    纯化柱(Filter Spin Columns/1.5ml 收集管
    Collection Tubes 1.5ml
    -- 50 RT
    成分 Cat# EXORG30A-1 体积 数量 保存条件
    外泌体提取试剂(Exosome Extraction Reagent 4mL 30 2-8
    样品稀释液(Sample Solution 10ml -- 2-8
    纯化柱(Filter Spin Columns/1.5ml 收集管
    Collection Tubes 1.5ml
    -- 30 RT
    本试剂盒每个反应是基于 250μl 血清或血浆作为外泌体提取样品,可依据外泌体用量做成比例放大,建议最小样品起始用量为 100μl,具体见下表。
    样品类型 样品体积 外泌体提取试剂用量
    血清或血浆 100μl 50μl
    血清或血浆 250μl 125μl
    外泌体浓缩试剂盒(细胞培养上清)操作方法
    产品细节图片1
     
     
    1. 样本预处理
    对于冻存样品,室温或 25℃水浴解冻,将完全融化的样品置于冰上;对于新鲜样品,收集样品后置于冰上,3,000×g4℃离心 15min,去除细胞或细胞碎片,离心后将上清吸入新管中。
    1. 沉淀外泌体
    吸取 250μl至少 100μl 处理后的血清或血浆放入 1.5mL 离心管试剂盒不提供,加入等体积(250μl的样品稀释液,混匀,然后加入 125μl 外泌体提取试剂,颠倒充分混匀后 4℃静置至少 30min。静置后的样品 1,500×g4℃离心
    30min,管底可见白色沉淀,吸去上清,1,500×g4℃离心 5min,完全去除残留液体,注意不要破坏外泌体沉淀。
    1. 外泌体重悬
    加入 100ul 样品稀释液,或下游应用所需的相应缓冲液,用移液器反复吹打或漩涡混合均匀,彻底溶解沉淀,此重悬液中含有提取的完整外泌体。
    1. 外泌体纯化

    将重悬的外泌体转移至纯化柱,放入1.5ml收集管(试剂盒提供,事先已放好)中,2,000×g,4℃离心 5min,弃掉纯化柱,收集管中为提取的外泌体,提取的外泌体可直接应用于下游实验(如,粒径分析、核酸提取等),或者储存在2-8℃保存一周,或者-80℃保存大约三个月。

    将重悬的外泌体转移至纯化柱,放入 1.5ml 收集管试剂盒提供,事先已放好)中,2,000×g4℃离心 5min,弃掉纯化柱,收集管中为提取的外泌体。提取的外泌体可直接应用于下游实验(如,粒径分析、核酸提取等,或者储存在 2-8℃保存一周,或者-80℃保存大约三个月。

     

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    • 细胞上清液提取常见问题解析

      离心管浓缩 3-5 倍(超滤柱上层液体即为浓缩后的样品),准备 50 mL 以上的浓缩液再使用本试剂盒提取外泌体。 8、细胞上清液的浓缩倍数该如何选定? 由于不同细胞在不同培养条件下外泌体分泌量差异较大,因此针对上清液的浓缩倍数无法给出具体数值。建议先选定一个倍数进行样品浓缩,以外泌体纯化过程中EPF柱堵柱现象作为浓缩倍数是否合适的依据,如果 EPF 柱出现堵柱现象,则可适当降低超滤浓缩倍数。 9、加了 ECS 液离心之后无沉淀,这个现象正常吗? 由于某些细胞(如悬浮细胞、干细胞、免疫细胞、神经细胞

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