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外泌体提取试剂盒(细胞培养上清/尿液)

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  • 2025年07月16日
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    • 英文名

      外泌体提取试剂盒(细胞培养上清/尿液)

    • 保质期

      12个月

    • 供应商

      上海钰博生物科技有限公司

    • 保存条件

      2-8℃下保存

    • 规格

    外泌体提取试剂盒(细胞培养上清/尿液)产品介绍
    细胞培养上清或尿液外泌体提取试剂盒提供了一种方便、可重复的提取/富集细胞外囊泡(extrocellular visicles,EVs)的方法,其中包括外泌体,是基于优化的多聚物混合物沉淀细胞培养上清或尿液中的外泌体,提取的外泌体可直接应用于下游某些应用。,首先,离心去除细胞培养上清或尿液中细胞和细胞碎片,然后只是简单地加入外泌体提取试剂,混匀,离心沉淀,便可富集外泌体。
    在电镜观察中,应用本试剂盒提取的外泌体形态和完整性与超速离心方法相似,并且能够保持其生物学功能。提取的外泌体可应 用于ELISA,FACS分析,裂解后可做Western Blot检测,但不建议用于外泌体标记和蛋白质质谱分析;提取的外泌体可用于外泌体相关核酸研究,如miRNAs,siRNAs,mRNAs和DNA,适用于Q-PCR,microarray,NGS测序等分析。
    外泌体提取试剂盒(细胞培养上清/尿液)保存与应用
    【保存条件】
    本试剂盒室温下运输,室温或 2-8℃下保存 12 个月按照试剂盒不同成分分别保存,使用前请充分混匀。
    【应用范围】
    本产品只用于科学研究,不能用于临床诊断
    本试剂盒提取的外泌体可用于 NTA 粒径分析,Western Blot,核酸提取及其后续分析(Q-PCR,测序等不建议用于外泌体标记和蛋白质质谱分析等。
    外泌体提取试剂盒(细胞培养上清/尿液)产品介绍
    外泌体(Exosome)是由不同细胞分泌的直径 30-150nm 的胞外膜性囊泡
    Extrocellular VisiclesEVs。外泌体普遍存在于多种体液中,其内容物丰富,包括蛋白质、脂质和核酸等,在细胞间信息交流中发挥着重要作用,主要参与免疫抗原呈递,神经递质传递,脂类代谢及细胞信号转导等过程,并与多种疾病的发生、发展、治疗及预后密切相关。
    密度超速离心作为传统并有效的外泌体分离方法,但其复杂的操作流程,昂贵的仪器设备,限制了外泌体的常规研究。本公司研制一种外泌体提取试剂,通过优化多聚物混合物与样品混合,经离心可将外泌体沉淀富集,其操作简单,用时短,结果稳定,污染蛋白含量较少,只需普通离心机就可以分离得到较纯的完整外泌体。

    外泌体提取试剂盒(细胞培养上清/尿液)试剂盒组成和说明

    本试剂盒只适用于血清或血浆的外泌体提取。
    成分 Cat# EXORG50A-1 体积 数量 保存条件
    外泌体提取试剂(Exosome Extraction Reagent 10ml 50 2-8
    样品稀释液(Sample Solution 20ml -- 2-8
    纯化柱(Filter Spin Columns/1.5ml 收集管
    Collection Tubes 1.5ml
    -- 50 RT
    成分 Cat# EXORG30A-1 体积 数量 保存条件
    外泌体提取试剂(Exosome Extraction Reagent 4mL 30 2-8
    样品稀释液(Sample Solution 10ml -- 2-8
    纯化柱(Filter Spin Columns/1.5ml 收集管
    Collection Tubes 1.5ml
    -- 30 RT
    本试剂盒每个反应是基于 250μl 血清或血浆作为外泌体提取样品,可依据外泌体用量做成比例放大,建议最小样品起始用量为 100μl,具体见下表。
    样品类型 样品体积 外泌体提取试剂用量
    血清或血浆 100μl 50μl
    血清或血浆 250μl 125μl
    外泌体提取试剂盒(细胞培养上清/尿液)操作方法
    产品细节图片1
     
     
    1. 样本预处理
    对于冻存样品,室温或 25℃水浴解冻,将完全融化的样品置于冰上;对于新鲜样品,收集样品后置于冰上,3,000×g4℃离心 15min,去除细胞或细胞碎片,离心后将上清吸入新管中。
    1. 沉淀外泌体
    吸取 250μl至少 100μl 处理后的血清或血浆放入 1.5mL 离心管试剂盒不提供,加入等体积(250μl的样品稀释液,混匀,然后加入 125μl 外泌体提取试剂,颠倒充分混匀后 4℃静置至少 30min。静置后的样品 1,500×g4℃离心
    30min,管底可见白色沉淀,吸去上清,1,500×g4℃离心 5min,完全去除残留液体,注意不要破坏外泌体沉淀。
    1. 外泌体重悬
    加入 100ul 样品稀释液,或下游应用所需的相应缓冲液,用移液器反复吹打或漩涡混合均匀,彻底溶解沉淀,此重悬液中含有提取的完整外泌体。
    1. 外泌体纯化

    将重悬的外泌体转移至纯化柱,放入1.5ml收集管(试剂盒提供,事先已放好)中,2,000×g,4℃离心 5min,弃掉纯化柱,收集管中为提取的外泌体,提取的外泌体可直接应用于下游实验(如,粒径分析、核酸提取等),或者储存在2-8℃保存一周,或者-80℃保存大约三个月。

    将重悬的外泌体转移至纯化柱,放入 1.5ml 收集管试剂盒提供,事先已放好)中,2,000×g4℃离心 5min,弃掉纯化柱,收集管中为提取的外泌体。提取的外泌体可直接应用于下游实验(如,粒径分析、核酸提取等,或者储存在 2-8℃保存一周,或者-80℃保存大约三个月。

     

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